卓鴻璘 泉州市洛江區(qū)虹山鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站 福建泉州 362015

我國(guó)研制的豬瘟兔化弱毒疫苗臨床應(yīng)用的效果很好，經(jīng)過多年豬瘟強(qiáng)制免疫后，近年來(lái)豬瘟大規(guī)模的流行和暴發(fā)已經(jīng)得到有效控制，但是目前非典型豬瘟及持續(xù)帶毒情況仍然比較嚴(yán)重，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的損失[1-3]。丘惠深等研究表明，非典型豬瘟的發(fā)生和疫苗的免疫效果關(guān)系密切，因此，加強(qiáng)豬瘟免疫抗體檢測(cè)，根據(jù)抗體水平制定合理的免疫程序，提高疫苗的免疫效果對(duì)防控豬瘟的發(fā)生有重要的意義[2]。

本研究使用豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)某規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場(chǎng)種豬及未經(jīng)過豬瘟疫苗免疫的仔豬進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，調(diào)查公豬、后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬及 5、10、15、20、25、30、35、40 日齡未經(jīng)豬瘟疫苗免疫仔豬的抗體水平，分析不同胎次經(jīng)產(chǎn)母豬的抗體差異，了解未經(jīng)免疫豬瘟疫苗仔豬豬瘟抗體水平的消長(zhǎng)情況，為評(píng)估豬瘟疫苗的免疫效果和確定仔豬豬瘟疫苗的首免日齡提供科學(xué)參考。

1 材料和方法

1.1 樣品來(lái)源 共采集泉州市某規(guī)?；i養(yǎng)殖場(chǎng)血清樣本268份，其中種豬68份 （見表1），5、10、15、20、25、30、35、40 日齡仔豬樣本各 25 份 （抗體水平合格母豬所產(chǎn)且未經(jīng)豬瘟疫苗免疫的健康仔豬）。

1.2 主要儀器和試劑 主要儀器：酶標(biāo)分析儀（北京普朗新技術(shù)有限公司，型號(hào)DNM-9602）；臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠制造，型號(hào)TGL-16G）；eppendorf手動(dòng)移液器。檢測(cè)試劑：豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自武漢科前生物股份有限公司。

1.3 檢測(cè)方法 試驗(yàn)嚴(yán)格按照豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒使用說明書進(jìn)行操作。

1.4結(jié)果判定 試驗(yàn)成立的條件是陰性對(duì)照OD630nm＞0.5，陽(yáng)性對(duì)照的阻斷率均＞50%。在試驗(yàn)成立的基礎(chǔ)上將樣品OD630nm值根據(jù)說明書提供的公式計(jì)算阻斷率，如果阻斷率≤30%判為陰性，如果阻斷率≥40%判為陽(yáng)性，阻斷率在30%～40%，該樣品判為可疑。

表1 種豬樣本采集情況表

2 結(jié) 果

2.1 種豬豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果 該豬場(chǎng)公豬、后備母豬的抗體合格率均為100%，經(jīng)產(chǎn)母豬豬瘟抗體合格率為98%（見表2）。

2.2 仔豬豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果 該場(chǎng)3頭抗體水平合格母豬所產(chǎn)并且未經(jīng)過豬瘟疫苗免疫仔豬的豬瘟抗體在 5、10、15、20、25 日齡合格率均為 100%，30日齡時(shí)豬瘟抗體合格率為96%，35日齡時(shí)豬瘟抗體合格率為68%，40日齡時(shí)豬瘟抗體合格率為20%（見表 3）。

3 分析與討論

3.1 仔豬豬瘟母源抗體水平分析及制定首免日齡該豬場(chǎng)5日齡仔豬豬瘟母源抗體合格率達(dá)到100%，并且5～25日齡的合格率一直維持在100%。仔豬在30日齡后豬瘟抗體合格率低于100%，30日齡之后抗體合格率出現(xiàn)比較大的下降，35日齡時(shí)豬瘟抗體合格率降為68%，到40日齡時(shí)豬瘟抗體合格率下降為20%（見圖1）。從抗體阻斷率的分布情況看，仔豬豬瘟母源抗體阻斷率離散度小，抗體水平比較均勻，但是抗體阻斷率隨著日齡的增加逐漸下降（見圖2）。仔豬豬瘟疫苗的首免時(shí)間選擇在仔豬母源抗體低于80%保護(hù)率、母源抗體還沒完全消失的日齡，這個(gè)階段免疫既能保證仔豬的保護(hù)率，又能避免母源抗體的干擾[4-6]。該場(chǎng)仔豬母源抗體合格率從30日齡后下降比較快，35日齡后出現(xiàn)大幅度的下降，35日齡時(shí)豬瘟抗體合格率降為68%，接近于農(nóng)業(yè)部要求合格率70%的標(biāo)準(zhǔn)。因此，建議首免日齡為35日齡。

本次采集的仔豬為抗體水平合格母豬所產(chǎn)的健康仔豬，仔豬的母源抗體水平較好，抗體水平比較整齊。這部分仔豬的抗體水平能代表大部分仔豬母源抗體的情況，但是生產(chǎn)中有存在母豬抗體不合格和仔豬活力差等影響仔豬獲得合格母源抗體的情況，因此，確保生產(chǎn)母豬有合格的抗體水平和減少弱仔仔豬及提高豬群免疫應(yīng)答能力等對(duì)于提高豬瘟的防疫質(zhì)量也很重要。

圖1 仔豬豬瘟母源抗體合格率變化情況

圖2 仔豬豬瘟母源抗體平均阻斷率變化情況

3.2 種豬抗體水平分析 該場(chǎng)抽檢的種豬豬瘟抗體水平比較好，說明豬瘟疫苗免疫效果很好，但是部分高胎齡的母豬抗體阻斷率不高，有1頭已經(jīng)處于可疑期間，建議多關(guān)注高胎齡母豬的抗體水平。從抗體阻斷率的分布情況看種公豬和后備母豬的離散度小，抗體阻斷率比較均勻；經(jīng)產(chǎn)母豬1～2胎和3～4胎抗體阻斷率離散度小，但是隨著胎齡的增加，5～6胎和7～8胎母豬的抗體阻斷率的離散度明顯變大。修金生等研究表明，對(duì)抗體不合格的種豬加強(qiáng)豬瘟疫苗免疫可以提高合格率水平[7]。建議養(yǎng)殖場(chǎng)定期對(duì)種豬的抗體水平進(jìn)行檢測(cè)，及時(shí)對(duì)抗體水平不合格的種豬進(jìn)行補(bǔ)免，并淘汰補(bǔ)免后抗體水平仍然不合格的種豬。

表2 種豬豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果

表3 仔豬豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果