河南省駐馬店市婦幼保健院，河南 駐馬店 463000

臨床研究表明慢性腎衰竭的病情發(fā)展過程不可逆[1]，如何對慢性腎衰竭進(jìn)行早期預(yù)防及延緩病程發(fā)展是目前研究焦點(diǎn)。傳統(tǒng)中醫(yī)對慢性腎衰竭有著深入研究，且中醫(yī)藥在慢性腎衰竭的治療中具有獨(dú)特優(yōu)勢，已有臨床研究證實(shí)冬蟲夏草制劑在延緩慢性腎衰竭病程中的作用明顯[2]，為了提供更多有效治療慢性腎衰竭的臨床依據(jù)，本次研究采用腎切除SD雄性大鼠給予冬蟲夏草制劑飼養(yǎng)與腎切除SD雄性大鼠常規(guī)飼養(yǎng)及不予腎切除SD雄性大鼠進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)對比研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 動物 將80只二月齡、清潔級的SD雄性大鼠，由河南省實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號：0003703，平均體重(261.9±21.1)g。

1.2 儀器及材料 電子秤、醫(yī)用凈化手術(shù)臺、手術(shù)設(shè)備、灌胃導(dǎo)管、恒溫箱、微波爐水浴箱、離心機(jī)、切片機(jī)、顯微鏡、生化分析儀及自動血細(xì)胞分析儀。金水寶膠囊、補(bǔ)腎生血沖劑。

1.3 方法

1.3.1 模型的制備 選取80只SD雄性大鼠進(jìn)行造模[3]，具體方法為：給予SD雄性大鼠含有20 mg/L的左旋硝基精氨酸的水飲用2周，進(jìn)行腹腔麻醉，麻醉?xiàng)l件：無菌，麻醉藥物：40 mg/kg巴比妥鈉，成功麻醉后大鼠取仰臥位并將雙下肢交叉固定，對左腎區(qū)域進(jìn)行剃毛、消毒處理后于距左肋脊角1.5 cm處取一切口，隨后游離出左腎臟并切除腎皮質(zhì)的2/3。術(shù)后1周再行2次手術(shù)對右側(cè)腎臟進(jìn)行全切，兩次手術(shù)共切除腎臟總質(zhì)量的5/6，術(shù)后2 d恢復(fù)飲用含有20 mg/L的左旋硝基精氨酸的水，將手術(shù)成活的60只SD雄性大鼠作為研究對象。另外20只在手術(shù)意外死亡12只、造模反應(yīng)過重死亡8只。另選擇20只SD雄性大鼠手術(shù)時只對腎周圍脂肪囊進(jìn)行分離，暴露腎臟及腎蒂，不予腎切除。

1.3.2 分組及給藥 成活的SD雄性大鼠均于手術(shù)后的第5周進(jìn)行血肌酐、血尿素氮檢查，并按照血肌酐、血尿素氮水平高低分為觀察1、2組及模型組，每組20只。期間，大鼠術(shù)后逐漸出現(xiàn)精神萎靡、活動量減少、毛粗無光澤、飲食量減少、耳緣及尾部蒼白，對照組大鼠活動正常、飲食正常、機(jī)警、毛發(fā)管著。各組SD雄性大鼠按照每籠4～5只進(jìn)行飼養(yǎng)，觀察1組按1.0 g/kg金水寶膠囊(成份為發(fā)酵蟲草菌粉Cs-4)灌胃，觀察2組按1.0 g/kg補(bǔ)腎生血沖劑，模型組與對照組給予相同量的純凈水，所有動物均給予普通飼料及自由飲水飼養(yǎng)，4周后進(jìn)行采血對相關(guān)指標(biāo)水平進(jìn)行檢測。

1.4 觀察指標(biāo) 末次給藥后，空腹大鼠靜脈血，采用貝克曼AU680全自動生化分析儀對總膽固醇及甘油三酯進(jìn)行測定；取大鼠動脈血，采用OMIN-C型血?dú)夥治鰞x對血紅蛋白及紅細(xì)胞壓積進(jìn)行測定；采用絡(luò)合滴定法對血鈣進(jìn)行測定，采用酶法對血磷進(jìn)行測定，采用酸沉淀-紫外分光光度法對血清內(nèi)中分子物質(zhì)進(jìn)行測定。

2 結(jié)果

2.1 總膽固醇及甘油三酯 觀察1組SD雄性大鼠的總膽固醇及甘油三酯水平與模型組及對照組對比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表1。

表1 各組總膽固醇、甘油三酯水平比較

注：與對照組相比，aP<0.05；與模型組相比，bP<0.05。

2.2 血紅蛋白及紅細(xì)胞壓積 觀察1組SD雄性大鼠的血紅蛋白及紅細(xì)胞壓積與模型組及對照組對比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表2。

表2 各組血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積比較

注：與對照組相比，aP<0.05；與模型組相比，bP<0.05。

2.3 血鈣及血磷水平 觀察1組SD雄性大鼠的血鈣及血磷水平與模型組及對照組對比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表3。

表3 各組血鈣、血磷水平比較

注：與對照組相比，aP<0.05；與模型組相比，bP<0.05。

2.4 血清內(nèi)血清內(nèi)中分子物質(zhì)水平 觀察1組SD雄性大鼠的血清內(nèi)中分子物質(zhì)水平與模型組及對照組對比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表4。

表4 各組血清內(nèi)中分子物質(zhì)水平比較

注：與對照組相比，aP<0.05；與模型組相比，bP<0.05。

3 討論

腎衰竭是指人體的腎臟功能出現(xiàn)部分喪失或者全部喪失，可分為急性與慢性兩大類型。其中慢性腎衰竭是由腎臟發(fā)生長期病變，隨著病程增加而導(dǎo)致腎功能逐漸下降的過程，由于慢性腎衰竭的病程不可逆，如果延緩該疾病病程以避免尿毒癥的發(fā)生是當(dāng)前研究重點(diǎn)。冬蟲夏草在慢性腎衰竭治療中的作用明顯，其優(yōu)勢在于：①冬蟲夏草中所含的“蟲草多糖”能對腎小球?yàn)V膜上的免疫復(fù)合物進(jìn)行有效清除，從而提高內(nèi)生肌酐清除率，促進(jìn)腎功能恢復(fù)；②冬蟲夏草中所含的“蟲草酸”能對腎臟血流微循環(huán)進(jìn)行改善[4]，促使腎小管再生；③冬蟲夏草能刺激患處的再生因子，促使受損及壞死的腎小管修復(fù)或再生；④為人體補(bǔ)充自身不能合成的7種必須氨基酸及多種微量元素；⑤能提高氧自由基的清除率。

為了進(jìn)一步證實(shí)冬蟲夏草制劑治療慢性腎衰竭的效果，采用金水寶膠囊分析延緩慢性腎衰竭的作用機(jī)理。研究表明，脂質(zhì)代謝異常在腎衰的進(jìn)展中具有重要作用[5]，腎功能受損越嚴(yán)重，脂質(zhì)代謝異常越突出，本次研究發(fā)現(xiàn)觀察組SD雄性大鼠的總膽固醇及甘油三酯水平與模型組及對照組對比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，說明金水寶膠囊能降低實(shí)驗(yàn)大鼠的總膽固醇及甘油三酯水平，能起到糾正脂質(zhì)代謝紊亂及延緩慢性腎衰竭病程的作用，其作用機(jī)制為對蛋白代謝進(jìn)行調(diào)節(jié)，對正氮平衡起到促進(jìn)作用，對血漿中必須氨基酸的缺乏現(xiàn)象進(jìn)行了較好的糾正，同時金水寶膠囊還能防治腎小球出現(xiàn)硬化及間質(zhì)纖維化，對腎功能起到了較好的保護(hù)作用。腎性貧血是慢性腎衰竭發(fā)展至終末期的常見并發(fā)癥[6]，該并發(fā)癥的嚴(yán)重程度與腎功能減退程度有直接關(guān)系，研究發(fā)現(xiàn)觀察組SD雄性大鼠的血紅蛋白及紅細(xì)胞壓積與模型組及對照組對比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，說明金水寶膠囊能提高SD雄性大鼠的血紅蛋白及紅細(xì)胞壓積，起到改善貧血的作用。鈣磷代謝紊亂是慢性腎衰竭的常見并發(fā)癥，臨床認(rèn)為對低血鈣、高血磷進(jìn)行有效控制可以延緩慢性腎衰竭惡化[7]，本次研究發(fā)現(xiàn)觀察組SD雄性大鼠的血鈣及血磷水平與模型組及對照組對比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說明金水寶膠囊能提高SD雄性大鼠的血鈣水平，降低血磷水平，起到改善鈣磷代謝異常及延緩慢性腎衰竭病程的作用。臨床研究發(fā)現(xiàn)慢性腎衰竭患者的生存質(zhì)量與尿毒癥毒素的清除率有關(guān)聯(lián)[8]，而尿毒癥毒素中以血清內(nèi)中分子物質(zhì)為主，因此血清內(nèi)中分子物質(zhì)是判斷慢性腎衰竭患者生存質(zhì)量的有效指標(biāo)，本次研究發(fā)現(xiàn)觀察組SD雄性大鼠的血清內(nèi)中分子物質(zhì)水平與模型組及對照組對比均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，說明金水寶膠囊能降低SD雄性大鼠的血清內(nèi)中分子物質(zhì)水平，起到提高生存質(zhì)量及延緩慢性腎衰竭病程的作用。同時金水寶膠囊還具有增強(qiáng)單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能的作用，從而提高了細(xì)胞免疫功能。

綜上所述，金水寶膠囊可延緩慢性腎衰竭大鼠的病程，但在慢性腎衰竭治療中還需進(jìn)一步的臨床研究。