李冷媚 吳小娟 李瑞娥

廣東省東莞市橫瀝醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東東莞 523460

降鈣素原屬于糖蛋白的一種，而且并無(wú)任何激素活性，多在體內(nèi)出現(xiàn)細(xì)菌感染時(shí)被發(fā)現(xiàn)，而且其濃度與體內(nèi)菌血癥、膿毒癥血癥等諸多炎癥反應(yīng)病情嚴(yán)重程度關(guān)系密切，目前多用來(lái)診斷炎癥和感染疾病，且多與血培養(yǎng)聯(lián)用，其原因在于血培養(yǎng)在檢測(cè)前后存在被污染風(fēng)險(xiǎn)以及花費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)，故需降鈣素原定量檢測(cè)用于檢測(cè)血液細(xì)菌感染嚴(yán)重程度，預(yù)測(cè)病情未來(lái)發(fā)展及臨床治療效果，而且花費(fèi)時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)短于血培養(yǎng)[1-2]。本次研究選擇2015年1月～2016年12月在我院血液檢測(cè)的患者1460例，均在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取外周循環(huán)血液樣本，分別行血清降鈣素原定量檢測(cè)及血培養(yǎng)，以血培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，分析兩種檢測(cè)結(jié)果差異，獲得一定研究成果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究選擇2015年1月～2016年12月在我院血液檢測(cè)的患者1460例，男949例，女511例，年齡5～85歲，年齡平均（44.47±13.85）歲；涉及ICU病房、兒科、耳鼻喉科、婦產(chǎn)科、機(jī)關(guān)門診、急診科、泌尿外科等臨床科室。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)如下：（1）意識(shí)清楚，精神系統(tǒng)正常；（2）入院后均接受血尿常規(guī)以及影像學(xué)檢查措施，明確相應(yīng)診斷；（3）所有患者、家屬、法定監(jiān)護(hù)人及代理人均對(duì)研究?jī)?nèi)容知情同意，自愿參與，并在醫(yī)院倫理委員會(huì)監(jiān)督及允許下同醫(yī)院簽訂知情同意書(shū)。

表3 血清降鈣素原與血培養(yǎng)在不同細(xì)菌中的檢測(cè)結(jié)果

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

排除標(biāo)準(zhǔn)如下：（1）心肝腎等重要臟器嚴(yán)重功能不全；（2）血液系統(tǒng)疾病，傳染性疾??；（3）腫瘤患者；（4）預(yù)估生存期不足6個(gè)月，研究期間突發(fā)死亡者。

1.4 方法

本次研究采用萬(wàn)孚熒光定量免疫分析儀及BD血培養(yǎng)系統(tǒng)。所有受檢者均在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取外周循環(huán)血液樣本，分別抽取10mL用于血培養(yǎng)，5mL用于血清降鈣素原定量檢測(cè)。

1.4.1 血培養(yǎng)方法 研究人員將外科洗手后，嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作規(guī)程，將抽取血液樣本后注入血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)（瓶口已消毒），妥善保存后送入實(shí)驗(yàn)室，按照先后順序?qū)⑴囵B(yǎng)瓶編號(hào)，置于BD全自動(dòng)血培養(yǎng)儀內(nèi)，開(kāi)始培養(yǎng)。待儀器報(bào)警，提示已檢測(cè)到存在細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象，將該培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)種至其他培養(yǎng)皿，繼續(xù)培養(yǎng)并分離菌落，經(jīng)微生物篩查系統(tǒng)進(jìn)行分析，判斷菌落種類及檢測(cè)結(jié)果。

1.4.2 降鈣素原定量檢測(cè)方法 將抽取血液樣本置于真空采血管內(nèi)，妥善保存送檢實(shí)驗(yàn)室后，放入離心機(jī)內(nèi)，在3000r/min條件下離心操作5min，獲取血清后，經(jīng)萬(wàn)孚熒光免疫分析儀及相應(yīng)的配套試劑開(kāi)展血清降鈣素原定量檢測(cè)，并采取質(zhì)控措施二次檢測(cè)，詳細(xì)觀察并記錄檢測(cè)結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）無(wú)血液感染，PCT水平≤0.1ng/mL；（2）高度懷疑，建議進(jìn)一步檢測(cè)，PCT水平＜0.50ng/mL，且＞0.1ng/mL；（3）存在血液感染，PCT水平≥0.5ng/mL[3-4]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本次研究采用SPSS22.0處理數(shù)據(jù)，采用百分比（%）表示計(jì)數(shù)資料，并采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P＜ 0.05，提示數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清降鈣素原定量檢測(cè)與血培養(yǎng)測(cè)量結(jié)果比較

1460例中經(jīng)血清降鈣素原定量檢測(cè)結(jié)果顯示陽(yáng)性406例（27.81%），陰性 1054例（72.19%）；1460例經(jīng)血培養(yǎng)確診陽(yáng)性者58例（3.97%），陰性1402例（96.02%）；詳見(jiàn)表1。

表1 血清降鈣素原定量檢測(cè)與血培養(yǎng)測(cè)量結(jié)果比較

2.2 血清降鈣素原檢測(cè)結(jié)果

血清降鈣素原定量檢測(cè)敏感度79.31%、特異度74.32%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值11.33%、陰性預(yù)測(cè)值98.86%、準(zhǔn)確率74.52%，詳見(jiàn)表2。

表2 血清降鈣素原檢測(cè)結(jié)果

2.3 血清降鈣素原與血培養(yǎng)在不同細(xì)菌中的檢測(cè)結(jié)果

58例血培養(yǎng)確認(rèn)陽(yáng)性者中血清降鈣素原檢出率為79.31%，而1402例經(jīng)血培養(yǎng)陰性者中血清降鈣素原陽(yáng)性檢出為25.68%，組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=79.8035，P＜ 0.01）；詳見(jiàn)表 3。

2.4 多次檢測(cè)PCT陽(yáng)性患者檢測(cè)情況

58例血培養(yǎng)陽(yáng)性者中≥3次/例PCT檢測(cè)，共9例，2次PCT檢測(cè)間隔時(shí)間不足7d，其中6例存活中，PCT檢測(cè)后結(jié)果趨于下降及升高者各1例，其余4例則變化無(wú)規(guī)律，PCT均值＜5μg/L、≥5μg/L者分別為2例，4例；死亡3例，PCT檢測(cè)后結(jié)果趨于下降1例，其余2例則變化無(wú)規(guī)律，PCT均值＜5μg/L、≥5μg/L者分別為2例，1例。

3 討論

3.1 全身炎癥與降鈣素原

全身諸多炎性反應(yīng)多無(wú)特異性反應(yīng)，目前以血液培養(yǎng)作為血液感染類疾病診斷金標(biāo)準(zhǔn)[5-6]，但病原菌培養(yǎng)或微生物檢測(cè)存在較大進(jìn)步空間，故需對(duì)現(xiàn)有檢測(cè)手段進(jìn)行更新優(yōu)化，或研發(fā)新類型檢測(cè)方法[7-10]。血清降鈣素原屬于降鈣素前肽一類物質(zhì)，在生理情況下其血液內(nèi)多維持較低水平，健康人參考范圍通常在0.1ng/mL以下，而若體內(nèi)無(wú)感染性炎癥反應(yīng)，血清降鈣素原多維持原來(lái)水平，基本無(wú)異常升高情況出現(xiàn)，但對(duì)波及全身諸多臟器及系統(tǒng)的細(xì)菌、真菌以及寄生蟲(chóng)等病原物質(zhì)感染比較敏感，而對(duì)于腫瘤、自身免疫系統(tǒng)疾病以及慢性炎癥反應(yīng)，則敏感度不高。這與病原物質(zhì)感染后，患者體內(nèi)臟器淋巴細(xì)胞以及內(nèi)分泌系統(tǒng)大量分泌合成降鈣素原有關(guān)。目前，通常認(rèn)為發(fā)病后2h內(nèi)血清降鈣素原水平開(kāi)始升高，發(fā)病后6 ～ 8h升高明顯，而在發(fā)病后12～48h時(shí)間段內(nèi)達(dá)到峰值，發(fā)病后7d多下降至正常范圍，若血清降鈣素原持續(xù)維持較高水平，提示治療效果不佳，無(wú)法滿足臨床需求。

3.2 臨床指導(dǎo)與診斷應(yīng)用

通常情況下，多依靠外周血液白細(xì)胞計(jì)數(shù)波動(dòng)情況判斷患者體內(nèi)是否存在炎癥反應(yīng)，進(jìn)而分析是否需使用抗生素，而分離培養(yǎng)的菌落則顯示致病物質(zhì)具體類型，聯(lián)合藥敏試驗(yàn)，則可指導(dǎo)臨床抗生素的治療[11-12]。目前，很多學(xué)者支持降鈣素原檢測(cè)結(jié)果不足0.1ng/mL時(shí)，提示感染較少，不建議將抗生素納入治療藥物計(jì)劃中，當(dāng)降鈣素原水平超過(guò)0.5ng/mL時(shí)，提示強(qiáng)烈建議將抗生素作為首選治療藥物，而且降鈣素原定量檢測(cè)花費(fèi)時(shí)間較短，故建議臨床實(shí)踐中，可用降鈣素原檢測(cè)做維護(hù)血液細(xì)菌感染的篩查措施[13-15]。本次研究中，血清降鈣素原定量檢測(cè)敏感度79.31%、特異度74.32%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值11.33%、陰性預(yù)測(cè)值98.86%、準(zhǔn)確率74.52%；而且有菌感染標(biāo)本中血清降鈣素原檢出率顯著高于無(wú)菌感染標(biāo)本（P＜0.01）；而且有菌感染標(biāo)本中血清降鈣素原平均值均高于0.5ng/mL，而無(wú)菌感染標(biāo)本中血清降鈣素原檢測(cè)水平均值小于0.5ng/mL；這表明血清降鈣素原在判斷是否存在血液感染方面具有良好的臨床價(jià)值，廣泛適用于確實(shí)存在的細(xì)菌感染性疾病及中毒性疾病，臨床應(yīng)用前景較好。但不可忽視的是，使用血清降鈣素原檢測(cè)中存在一定的假陽(yáng)/陰性，這可能與樣本污染，或即使檢測(cè)陰性也不能排除無(wú)血液感染有關(guān)，故在臨床實(shí)際工作中建議與其他指標(biāo)聯(lián)用，從而獲得更為準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果。此外，本次研究中，多次檢測(cè)PCT者顯示若PCT檢測(cè)結(jié)果逐漸下降，則需提高對(duì)死亡風(fēng)險(xiǎn)的警惕性。

總之，在細(xì)菌感染檢測(cè)血液樣本方面采用血清降鈣素原定量檢測(cè)能夠獲得良好的檢測(cè)結(jié)果，但目前仍需要擴(kuò)大樣本量，進(jìn)一步研究。