回瑞華,侯冬巖,李鐵純,刁全平

(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,遼寧 鞍山 114007)

羅布麻(Apocynum．venetumL．)屬野生草本宿根植物[1]，最早發(fā)現(xiàn)于新疆羅布泊而命名為羅布麻.羅布麻主要分布于我國(guó)東北、華北、西北和黃河流域.羅布麻耐旱、耐寒、耐暑熱、抗鹽堿能力強(qiáng)，在鹽堿荒地、沙漠邊緣、海岸及戈壁灘等自然條件惡劣的環(huán)境生長(zhǎng)，對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng).羅布麻葉含有豐富的萜類、黃酮、氨基酸、生物堿、有機(jī)酸等多種活性成分，具有清火平肝、安神定痛、止咳平喘、祛痰、預(yù)防和治療高血壓、延緩衰老等作用[2～4]，衛(wèi)生部定其為保健兼食品的天然產(chǎn)物.近年來，國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究人員對(duì)羅布麻葉的萜類、黃酮等活性成分研究較多[5～9]，而對(duì)羅布麻葉脂溶性成分的研究少見報(bào)道.研究表明，羅布麻葉的脂溶性成分對(duì)于其藥效活性具有一定的相關(guān)性.本研究對(duì)不同產(chǎn)地羅布麻葉脂溶性成分進(jìn)行分析，為進(jìn)一步研究和開發(fā)羅布麻葉提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

所用儀器和試劑見表1.

1.2 樣品及前處理

羅布麻葉樣品：新疆羅布泊羅布麻葉、新疆伊犁羅布麻葉、遼寧羅布麻葉.粉碎后過0.6 mm篩，備用.

1.3 石油醚作溶劑提取脂溶性成分

分別稱取10.00 g 3個(gè)產(chǎn)地的羅布麻葉粉末，用濾紙包好，置于索氏提取器中，加入150 mL石油醚，提取至索氏提取器中溶劑變?yōu)闊o色，提取時(shí)間為8 h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器回收溶劑，得油狀物.

表1 實(shí)驗(yàn)所用儀器和試劑

1.4 乙醚作溶劑提取脂溶性成分

分別稱取10.00 g 3個(gè)產(chǎn)地的羅布麻葉粉末，用濾紙包好，置于索氏提取器中，加入150 mL乙醚，提取至索氏提取器中溶劑變?yōu)闊o色，提取時(shí)間為8 h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器回收溶劑，得油狀物.

1.5 酯化處理

由于羅布麻葉的脂溶性提取物沸點(diǎn)較高，需將其進(jìn)行酯化處理后再進(jìn)行GC/MS分析.分別取1.3和1.4脂溶性提取物各1.0 mL，加入正己烷8.0 mL、氫氧化鈉甲醇溶液(0.5 mol/L)2.0 mL,70 ℃水浴回流20 min，取出冷卻后移至刻度試管中加水12 mL,超聲振蕩、離心、取上層清液待做GC/MS分析.

1.6 氣相色譜/質(zhì)譜測(cè)定條件

1.6.1 氣相色譜條件 彈性石英毛細(xì)管色譜柱：HP-5,25 m×0.25 mm×0.25 um；柱溫：初始溫度100 ℃，以5 ℃/min升至260 ℃(保持4 min)；汽化室溫度280 ℃；進(jìn)樣量0.3 μL；載氣(He)流量1 mL/min；分流比:40∶1；溶劑延遲3 min.

1.6.2 質(zhì)譜條件 電子轟擊離子源；離子源溫度200 ℃；四極桿溫度150 ℃；倍增器電壓1 345 V；電子能量70 eV；發(fā)射電流34.6 μA；接口溫度220 ℃；質(zhì)量掃描范圍20～500 m/z.

1.7 測(cè)定方法

分別取經(jīng)1.5酯化處理后的樣品0.3 μL進(jìn)樣，進(jìn)行GC/MS分析.由GC/MS所得的質(zhì)譜信息，對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行鑒定，并測(cè)得各組分在總組分中的相對(duì)含量，總離子流量圖見圖1～圖6.

圖1 新疆羅布泊羅布麻葉乙醚提取脂溶性成分的總離子流圖

圖2 新疆伊犁羅布麻葉乙醚提取脂溶性成分的總離子流圖

圖3 遼寧羅布麻葉乙醚提取脂溶性成分的總離子流圖

圖4 新疆羅布泊羅布麻葉石油醚提取脂溶性成分的總離子流圖

圖5 新疆伊犁羅布麻葉石油醚提取脂溶性成分的總離子流圖

圖6 遼寧羅布麻葉石油醚提取脂溶性成分的總離子流圖

2 結(jié)果與討論

2.1 不同產(chǎn)地羅布麻葉脂溶性成分分析

由不同產(chǎn)地羅布麻葉脂溶性成分GC/MS總離子流量圖1～圖6可知，乙醚作溶劑提取脂溶性成分分離效果較好.本實(shí)驗(yàn)采用乙醚作溶劑提取脂溶性成分，鑒定出的脂溶性成分見表2.

表2中A、B、C分別代表新疆羅布泊羅布麻葉、新疆伊犁羅布麻葉和遼寧羅布麻葉樣品.

表2 不同產(chǎn)地羅布麻葉脂溶性成分鑒定結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果由表2可知，新疆羅布泊羅布麻葉中鑒定出18種脂溶性成分：脂肪酸12種，占總量的60.99%；醇類1種，占總量的15.06%；黃酮類1種，占總量的0.30%；烷烴類4種，占總量的16.43%，總檢出率為92.78%.

新疆伊犁羅布麻葉中鑒定出18種脂溶性成分：脂肪酸11種，占總量的53.63%；醇類2種，占總量的9.71%；黃酮類1種，占總量的0.30%；烷烴類4種，占總量的17.09%，總檢出率為94.05%.

遼寧羅布麻葉中鑒定出15種脂溶性成分：脂肪酸8種，占總量的54.43%；醇類2種，占總量的25.98%；黃酮類1種，占總量的0.70%；烷烴類4種，占總量的12.12%，總檢出率為93.23%.

2.2 結(jié)果討論

由不同產(chǎn)地羅布麻葉脂溶性成分的分析可知，不同產(chǎn)地羅布麻葉均含有脂肪酸、醇類、黃酮類和烷烴類脂溶性成分.但不同產(chǎn)地羅布麻葉中，上述脂溶性成分相對(duì)含量不同.新疆羅布泊羅布麻葉中不飽和脂肪酸相對(duì)含量最高.

新疆伊犁羅布麻葉中鑒定出β-草烯.β-草烯屬萜類化合物，通常存在于樟科植物的揮發(fā)油中，在羅布麻葉中檢出β-草烯未見報(bào)道.

遼寧羅布麻葉中醇類化合物相對(duì)含量高達(dá)25.98%，其中羽扇醇是一種三萜類化合物，通常存在于草莓、芒果、葡萄、橄欖等水果之中.近年來研究證實(shí)，羽扇醇在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中有抗氧化、抗炎癥、促進(jìn)皮膚愈合等作用，對(duì)乳腺癌、前列腺癌以及小鼠的黑色素瘤有一定的抑制作用.

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