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        不同月份產(chǎn)羔奶山羊初乳免疫球蛋白和常乳乳成分檢測

        2018-07-04 06:24:28趙曉娥孫念琴宋愛愛徐明輝李延華王軍寧馬保華
        家畜生態(tài)學報 2018年6期

        趙曉娥, 孫念琴,宋愛愛,魏 強, 徐明輝,李延華, 王軍寧, 馬保華*

        (1.西北農(nóng)林科技大學 動物醫(yī)學院/ 農(nóng)業(yè)部動物生物技術重點實驗室,陜西 楊凌 712100; 2.許昌百益奶山羊養(yǎng)殖場, 河南 許昌 461000;3.富平縣畜牧技術推廣中心, 陜西 富平711700;4.富平縣動物疫病預防控制中心,陜西 富平 711700)

        泌乳是哺乳動物重要的生理機能,為哺育仔畜、繁衍種族所必需[1]。母畜生產(chǎn)后,母乳是仔畜重要的營養(yǎng)物質(zhì)來源,乳汁的質(zhì)量和產(chǎn)量對仔畜的生長發(fā)育很重要。母羊乳汁質(zhì)量越好,羔羊生長發(fā)育也就越好,尤其是哺乳前期。初乳中含有豐富的免疫球蛋白、乳鐵蛋白、維生素等,可防止感染和增強免疫機能[2]。常乳中含有乳蛋白、乳糖、脂肪、無機元素、氨基酸、酶類和維生素等[3]。研究表明哺乳動物產(chǎn)奶量受遺傳、胎次、環(huán)境、營養(yǎng)水平等因素的影響[4-5],乳成分與泌乳期、胎次、日糧組成、環(huán)境及管理等因素相關,其成分含量存在明顯差異[6]。奶山羊在不同季節(jié)產(chǎn)羔后,季節(jié)性變化是否引起母羊乳中免疫球蛋白和其他乳成分含量的變化還不是很清楚。因此,本研究收集不同月份產(chǎn)羔母羊的乳樣,通過乳中免疫球蛋白及不同乳成分含量的比較分析,為后期調(diào)整奶山羊日糧組成以保證不同月份產(chǎn)羔母羊的乳品質(zhì)提供數(shù)據(jù)基礎。

        1 材料與方法

        1.1 試驗動物及管理

        關中奶山羊,年齡1.5~4歲,體況良好,無繁殖及傳染性疾病,發(fā)情周期正常,于當年8月、10月、12月、翌年2月同期發(fā)情、配種處理,翌年的1月、3月、5月和7月產(chǎn)羔、產(chǎn)奶。隨機抽出1月、3月、5月和7月產(chǎn)羔的關中奶山羊各10只,共40只奶山羊作為本研究的試驗動物。每批次的10只試驗羊在同一條件下舍飼飼喂,常規(guī)管理。

        1.2 主要試劑

        山羊免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒,山羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒(上海邦奕生物科技有限責任公司)。

        1.4 乳樣的收集與處理

        每批10只奶山羊,分別于產(chǎn)羔后的0,2,5 d 和7d收集兩個6~8 mL初乳樣品,用于IgA和IgG水平測定。2 000 r/min離心初乳樣品,收集上清液保存于-20 ℃冰箱內(nèi)待測。山羊初乳中IgA和IgG的濃度用ELISA試劑盒檢測[7-9],上海邦奕生物科技有限責任公司代測。

        在泌乳期的7,9,30,60,90,120,150 d和180 d,每只試驗羊每次采集45 mL乳樣,重復收集兩個乳樣,貯于-20 ℃冰箱保存,用于乳成分(乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固形物)測定。乳成分及其含量用全自動乳樣分析儀(MilkoScan FT120,F(xiàn)OSS Corporation, Denmark)分析。測試時,首先對全自動乳樣分析儀進行校正,預溫40 min,將乳樣提前置于40 ℃水浴缸中進行水浴解凍,待乳樣溫度達到30 ℃左右時將乳樣上下顛倒輕晃,然后將全自動乳樣分析儀吸頭置于乳樣中檢測,乳樣分析儀會對乳樣的主要成分、酸度、冰點和密度進行兩次分析,分析后計算兩次的平均值。

        1.6 數(shù)據(jù)處理

        2 結果與分析

        2.1 奶山羊初乳中免疫球蛋白標準曲線

        根據(jù)奶山羊初乳中IgA和IgG水平繪制標準曲線,見圖1。由圖1可以看出,IgA和IgG標準曲線的R2分別為0.9991和0.9994,表明檢測方法正確、檢測結果可靠。

        2.2 不同月份產(chǎn)羔母羊初乳中免疫球蛋白的測定結果

        不同月份產(chǎn)羔母羊初乳中IgA和IgG濃度的變化如圖2所示。

        圖1 ELISA測定山羊初乳中IgA 和IgG的標準曲線Fig.1 Standard curves for the measurement of IgA and IgG in goat colostrum with ELISA kits

        圖2 不同月份產(chǎn)羔奶山羊初乳中IgA和IgG濃度的變化Fig.2 The concentration of IgA and IgG in colostrums of kidding goats in different months

        由圖2可以看出,1月、3月、5月、7月產(chǎn)羔母羊在相同的泌乳時間初乳中IgA和IgG水平無顯著差異(P>0.05);不同月份產(chǎn)羔母羊初乳中IgA和IgG水平動態(tài)變化趨勢一致,IgA濃度0~2 d下降較快,5~7 d下降緩慢維持在較低水平;IgG濃度0~5 d下降較快,5~7 d下降緩慢維持在較低水平。0 d時,IgA濃度最高為1890.84±124.51 μg/mL,7 d時,下降到951.02±1.34 μg/mL;0 d時,IgG濃度最高為127.26± 4.47 mg/mL,7 d時,下降到8.56±1.44 mg/mL。

        2.3 不同月份產(chǎn)羔母羊常乳中乳成分的測定結果

        不同月份產(chǎn)羔母羊常乳中乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固形物測定結果見圖3。由圖3可以看出,1月、3月、5月、7月產(chǎn)羔母羊在6個月泌乳期間,常乳中的乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固形物(干物質(zhì))含量變化趨勢一致,其均值變化范圍為3.31%~3.45%,4.91%~5.77%,4.03%~4.20%,8.48%~8.88%, 13.72%~15.07%。 5月份生產(chǎn)的母羊,在泌乳的7 d、30 d、60 d時,羊乳中的蛋白質(zhì)含量相對較低,在其它泌乳期,不同月份產(chǎn)羔母羊乳中的乳蛋白含量無顯著差異(圖3A)。5月份產(chǎn)羔母羊在泌乳的7 d、9 d羊乳中的脂肪含量高于7月份產(chǎn)羔母羊(P<0.05),其他泌乳期,不同月份產(chǎn)羔母羊羊乳中的乳脂含量無差異性變化(圖3B)。在相同的泌乳期,不同月份產(chǎn)羔母羊乳中的乳糖含量無差異性變化(圖3C)。5月份產(chǎn)羔母羊在泌乳的150 d,羊乳中的非脂含量低于其他月份產(chǎn)羔母羊(P<0.05,P>0.05)。在泌乳的前期,7月份產(chǎn)羔母羊乳中的總脂含量顯著低于1月份產(chǎn)羔母羊(P<0.05),在泌乳的中期,5月份產(chǎn)羔母羊乳中的總脂含量低于其他月份產(chǎn)羔母羊(P<0.05,P>0.05)(圖3E)。

        圖3 不同月份產(chǎn)羔母羊乳中乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固形物含量的變化Fig.3 The protein, fat, lactose, non-fat solid and total fat solid (TS) content in milk of kidding goats in different months

        3 討 論

        3.1 不同月份分娩的奶山羊初乳中IgA 和IgG含量變化分析

        母畜生產(chǎn)后,初乳中免疫球蛋白含量的高低對仔畜成活及生長很重要。免疫球蛋白不僅可以提高仔畜的免疫力,同時,IgG和IgA對其乳腺也有保護作用[10]。因此,奶山羊初乳中IgA和IgG的含量的高低對于羔羊的生長發(fā)育具有很大的影響。在奶山羊整個泌乳過程中,乳汁中的免疫球蛋白的濃度變化很大[11],1~18 h內(nèi)的初乳中免疫球蛋白的含量最高[12],可達120 mg/mL,而泌乳高峰期則降至0.50~1 mg/mL。莎能奶山羊產(chǎn)后3 h和12 h,初乳中的IgG含量分別為72.01 mg/mL和 48.81 mg/mL[13]。本試驗中,IgA和IgG的濃度0~2 d下降很快,5~7 d維持在較低水平,0 d時最高可達127.26 mg/mL,7 d時下降到8.56 mg/mL。初生羔羊?qū)Τ跞橹忻庖咔虻鞍椎奈章首罡呒s為50%[12],剛出生的羔羊未吃初乳時外周血清中IgG和IgA含量極少,但羔羊哺食初乳后幾個小時,其外周血清中免疫球蛋白含量很高[13]。本試驗對不同月份產(chǎn)羔母羊初乳中IgA和IgG的含量進行了檢測,發(fā)現(xiàn)1月、3月、5月、7月母羊產(chǎn)后初乳中IgA和IgG含量動態(tài)變化趨勢一致,不同批次相同泌乳期乳中IgA和IgG的濃度無差異性變化,其動態(tài)變化趨勢與陳祖秋報道的結果相符[12]。說明不同月份產(chǎn)羔對母羊初乳中IgA和IgG含量影響不大,其動態(tài)變化與泌乳時間有關。

        3.2 奶山羊在不同月份分娩對母羊常乳乳成分含量的影響

        山羊奶的主要營養(yǎng)成分有乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固型物等。在本研究中,1月、3月、5月、7月產(chǎn)羔母羊在產(chǎn)后7 d、9 d及1~6個月的泌乳期間,乳汁樣品中的乳蛋白、乳脂、乳糖、非脂固形物和總脂固型物含量動態(tài)變化趨勢類似,乳糖和非脂固形物濃度動態(tài)變化幅度不大,乳蛋白、乳脂和總脂固型物表現(xiàn)為泌乳初期含量較高,隨后逐漸下降,到檢測的末期又有所上升,這種變化趨勢是正常的,主要與泌乳期泌乳量的動態(tài)變化有關,產(chǎn)奶量越高,乳脂肪含量越低[14]。采樣期間,從主要乳成分在乳樣品中的絕對含量來看,蛋白質(zhì)、乳糖和非脂固形物含量與文獻報道的奶山羊乳汁中含量相符或稍高(3.31%~3.45%,2.98%~3.08%; 4.03%~4.20%,3.90%~3.96%;8.48%~8.88%,8.38%~8.61%)[15-16],脂肪含量與總脂固形物均相對偏高[15],可能是所在養(yǎng)殖場奶山羊食用較高比例粗纖維的緣故。張彥明等[17]提出奶山羊日糧中粗纖維含量的高低對乳中脂肪含量變化影響最大。山羊除了腺泡上皮細胞直接從血液中攝取一部分脂肪酸外,還可以利用日糧中的纖維素在瘤胃中發(fā)酵所產(chǎn)生的低級脂肪酸(如乙酸、丙酸和丁酸等)。因此,可以通過調(diào)整日糧來改變羊奶中的脂肪含量。另外,發(fā)現(xiàn)5月份產(chǎn)羔母羊在泌乳旺期(6~8月)乳中脂肪含量低于其他各組,可能是此羊場在每年的6~8月提供奶山羊大量青麥草導致泌乳母羊產(chǎn)奶量的增加,乳脂含量相對就會降低。盡管5月份產(chǎn)羔母羊乳脂含量相對偏低(4.91%),但在正常范圍之內(nèi),據(jù)報道羊奶中脂肪含量為3.6%~5.5%。而對1月、3月和7月產(chǎn)羔母羊來說,應加強青綠飼料的補充,以降低乳汁中的乳脂和總脂含量。總的來說,山羊奶中含有的脂肪酸大多是中、短鏈脂肪酸,容易代謝,不會造成脂肪堆積引起肥胖[18-19]。因此我們可以認為脂肪和總脂固形物含量偏高并沒有降低羊奶的質(zhì)量。

        4 小 結

        奶山羊在不同月份產(chǎn)羔并不影響初乳中IgA和IgG含量的變化,對常乳中乳脂、和總脂固形物有一定的影響,對乳蛋白和乳糖及非脂固形物影響不大,常乳中乳成分含量在部分泌乳期有變化,但并未降低羊奶的質(zhì)量。

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