于愛華 于 靈 徐 勇
(常州市金壇區(qū)中醫(yī)醫(yī)院檢驗科,江蘇 常州 213200)
在尿液分析中包含了對尿液的外觀檢驗、尿液的化學檢驗、以及尿液的有形成份檢驗,尿液的有形成份包含細胞、管型、結(jié)晶、細菌、寄生蟲,一般需要手工顯微鏡觀察。隨著現(xiàn)代醫(yī)學檢驗技術(shù)日新月異的發(fā)展,檢驗的自動化進程也隨之得到了發(fā)展,就尿液分析儀而言,由于它的檢測法既簡便、快捷、檢測項目多,又重復(fù)性好、標本用量少,故已成為臨床上尿液檢測的重要組成部分,但是它決不可代替?zhèn)鹘y(tǒng)的顯微鏡對尿液有形成分(細胞、管型、結(jié)晶、細菌、寄生蟲等)的檢測,且由于尿液分析儀檢測與顯微鏡下的檢測原理截然不同,報告方式也不同,很難找出兩者的對應(yīng)關(guān)系,迄今為止,還沒有一種直接的核算方式[3],因此,儀器法只是一個篩選實驗,尿液的顯微鏡檢測在尿液檢測中仍是一個重要的環(huán)節(jié)。下面就對尿液的顯微鏡檢測法的重要性做一介紹。[2]
1.1 一般資料 標本來源于本院2016年1月份至2016年12月份門診和病房做尿液分析的患者,從中挑選出255例樣本,其中女性患者為104人,男性患者為151人;門診患者為140人,病房患者為115人;年齡方面,18~50歲的為120人,50~60歲的為45人,大于60歲的為90人。
1.2 主要儀器和試劑 URO-500尿干化學分析儀(南京優(yōu)源醫(yī)療設(shè)備有限公司),及配套的14聯(lián)試劑;CH-20顯微鏡(日本OLYMPUS公司)。
1.3 方法 統(tǒng)計這255例尿液標本分析結(jié)果統(tǒng)計鏡檢觀察到白細胞但干化學法陰性或陽性的例數(shù);統(tǒng)計鏡檢觀察到紅細胞細胞但干化學法陰性或陽性的例數(shù);
表1 白細胞細胞鏡檢法與干化學法的比較
通過統(tǒng)計分析得出 靈敏度=(152/177)×100%=86%
特異性=(55/78) ×100%=70%
漏診率=1-靈敏度=1-86%=14%
誤診率=1-特異性=1-70%=30 %
符合率=(152+55)/255=82.3%
表2 紅細胞細胞鏡檢法與干化學法的比較
通過統(tǒng)計分析得出 靈敏度=(95/118)×100%=81%
特異性=(109/137) ×100%=80%
漏診率=1-靈敏度=1-81%=19%
誤診率=1-特異性=1-80%=20 %符合率=(95+109)/255=80%
結(jié)果表明白細胞及紅細胞鏡檢法和干化學法存在一定的誤差,雖然大部分均相符,表明干化學法因方法學的缺陷存在一定的假陽性和假陰性。
干化學法檢測白細胞和紅細胞的原理及影響因素。
3.1干化學法檢查尿中白細胞的原理 尿白細胞試劑帶的主要成分是吲哚酚酯、重氮鹽。粒細胞胞漿內(nèi)含有酯酶,此酶可作用于模塊中的吲哚酚酯,使其產(chǎn)生吲哚酚,后者發(fā)生氧化縮合反應(yīng)或與重氮鹽反應(yīng)形成紫色縮合物,其顏色深淺與細胞的多少呈比例關(guān)系,此種方法簡便、檢測快捷。
但下列因素對它的檢查結(jié)果的準確性都可能造成影響(1)不同型號的試劑帶測定尿白細胞的敏感度不同,使用時必須注意批間差異,以免因試劑帶不同而引起同一標本測定結(jié)果的差異。然而,鏡檢法就不存在此問題,它對同一份標本檢測只存在檢測者之間的技術(shù)差異。(2)尿液標本必須新鮮,留尿后必須立即測定,以免白細胞破壞,導(dǎo)致干化學法與鏡檢法的實驗誤差。(3)使用某些藥物時,可產(chǎn)生假陽性,尿蛋白>5g/L或尿液中含有大劑量頭孢氨芐、慶大霉素等藥物時,可使結(jié)果偏低或出現(xiàn)假陰性,而鏡檢法受到的影響不大。(4)由于尿液在膀胱中貯存時間過長或標本放置時間延長,導(dǎo)致白細胞破壞,酯酶釋放到尿液中,造成干化學法陽性,鏡檢陰性的所謂假陽性現(xiàn)象。(5)干化學法只能測定粒細胞,不與淋巴細胞反應(yīng),所以它不像鏡檢法那樣,不論粒細胞、淋巴細胞都能檢測得到。在2015年6月至12月期間日常的工作中碰到5例大量使用藥物,致干化學法陰性或弱陽性;3例腎病患者中大量淋巴細胞導(dǎo)致的干化學結(jié)果與鏡檢結(jié)果不符,其中大多數(shù)是鏡檢陽性而干化學顯示陰性或弱陽性。[5]
3.2干化學法檢查尿中紅細胞的原理 尿紅細胞試劑帶中的主要試劑成分是過氧化物底物和鄰甲聯(lián)苯胺(或四甲替聯(lián)苯胺)。尿液中的血紅蛋白或其破壞釋放的游離血紅蛋白均含有亞鐵血紅素,后者具有過氧化酶樣活性,可使無色的鄰甲聯(lián)苯胺(或四甲替聯(lián)苯胺)脫氫變成藍色的鄰甲聯(lián)苯胺(或四甲替聯(lián)苯胺)物質(zhì)。此法簡便、檢測快捷。
但下列因素對它的檢測結(jié)果都可能造成影響(1)不同型號的試劑帶測定尿紅細胞的敏感度不同,使用時必須注意批間差異,以免因試劑不同而引起同一份標本測定結(jié)果的差異,而鏡檢法不存在此問題,它對同一份標本檢測只存在檢測者之間的技術(shù)差異。(2)尿液標本必須新鮮,留尿后盡量立即測定,以免紅細胞破壞,導(dǎo)致干化學法與鏡檢法實驗誤差。干化學法既可與完整的紅細胞反應(yīng),又能測定游離的血紅蛋白;而鏡檢法只能檢測紅細胞。(3)尿液中含有對熱不穩(wěn)酶,肌紅蛋白或菌尿可引起干化學法測定尿紅細胞的假陽性;尿液中有大量維生素C的存在,可競爭性抑制反應(yīng)致使干化學法產(chǎn)生假陰性,而以上現(xiàn)象對鏡檢法的檢測影響不大。(4)腎病患者,紅細胞在腎臟或泌尿道破壞或尿比重過低,尿pH值偏高,均易造成紅細胞破壞,造成所謂紅細胞干化學檢測的“假陽性”現(xiàn)象。在2015年6月至12月期間日常的工作中碰到15例尿液中含有大量維生素C導(dǎo)致的干化學假陰性,52例因紅細胞被破壞導(dǎo)致的干化學陽性而鏡檢顯示陰性或看到被破壞的紅細胞碎片,15例因外傷病人肌肉損傷嚴重大量肌紅蛋白進入尿液導(dǎo)致的干化學假陽性,而鏡檢中并無紅細胞。[5]
3.3 檢測其他有形成份干化學法與鏡檢法的比較 干化學法對管型、結(jié)晶、真菌、寄生蟲、腫瘤細胞是無法檢測的這也是它的不足之處,而鏡檢法能直接顯示有形成份(管型、結(jié)晶、真菌、寄生蟲、腫瘤細胞),而這些有形成份對泌尿系統(tǒng)疾病的診斷、療效的觀察有重要的意義或決定性意義[3]。
通過以上的舉例分析以及多年的臨床實踐證明,尿液的顯微鏡檢測法仍然是診斷泌尿系統(tǒng)疾病的重要指標之一,目前實驗室常用的尿液分析儀檢查結(jié)果不能完全替代鏡檢法。特別是對腎科患者的尿液,以鏡檢結(jié)果為診斷依據(jù)和觀察療效指標,所以對尿液的常規(guī)檢測,最好是將鏡檢法與尿液的一般性狀檢查、化學檢查互為補充和參照,還能為后者提供未發(fā)現(xiàn)的異常變化,這樣對于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別診斷都有重要的意義。[1]因此,尿鏡檢法在尿液的檢測中具有尿液分析儀檢測法所不可取代的重要性。
[參 考 文 獻]
[1]楊惠元.尿液檢驗中尿鏡檢的重要性.《檢驗醫(yī)學與臨床》 2011,07.
[2]趙娟.尿沉渣鏡檢在尿液分析中的重要性.《世界最新醫(yī)學信息文摘(連續(xù)型電子期刊)》.2015, (45).
[3]崔靜.王翠.尿液干化學聯(lián)合AVE-763B尿沉渣分析、顯微鏡檢對尿液檢測的應(yīng)用評價.《內(nèi)蒙古中醫(yī)藥》, 2013, 32(33) .
[4]叢玉隆.馬駿龍.鄧新立. 尿液常規(guī)分析質(zhì)量控制及臨床應(yīng)用研究體會、《臨床檢驗雜志》,?2001, 19(4):241-243.
[5]胡衛(wèi). 尿液干化學分析法檢測尿中紅細胞與白細胞結(jié)果假陰性的探討、《檢驗醫(yī)學與臨床》,?2011, 08(4):435-436.