王 聰，王嘉歡，汪 勇，王中華，權(quán) 力

(西北農(nóng)林科技大學農(nóng)學院，陜西楊凌 712100)

植物表皮蠟質(zhì)是附著在植物最外層的疏水性物質(zhì)，是植物防止非氣孔性水分散失，抵抗病蟲害入侵，防止昆蟲蠶食，抵抗紫外輻射和霜凍，以及維持植物表皮清潔與植物表面防水的一層保護膜，對植物的生長發(fā)育及抗蟲、抗旱等具有重要作用[1-4]。植物表皮蠟質(zhì)主要由可溶于有機溶劑的超長鏈脂肪族化合物及其衍生物組成[5]。不同物種的蠟質(zhì)組分及晶體結(jié)構(gòu)均有差異，同一物種不同器官的蠟質(zhì)組成及晶體結(jié)構(gòu)也不同，有些植物蠟質(zhì)的晶體結(jié)構(gòu)隨著植物的生長發(fā)育而呈現(xiàn)多種形態(tài)[6]。前人研究發(fā)現(xiàn)，擬南芥、水稻、小麥等表皮蠟質(zhì)的組分為烷烴、醛、酮、酯、脂肪酸、初級脂肪醇、次級脂肪醇、萜類、酚類、固醇等物質(zhì)；蠟質(zhì)的晶體結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)片狀、管狀、波浪狀、線狀等多種形態(tài)，其中以片狀和管狀居多[7-9]。片狀蠟質(zhì)的主要組分是伯醇或三萜類化合物，管狀蠟質(zhì)的主要組分為β-二酮、仲醇和二醇等化合物[10]。在植物生長發(fā)育過程中，蠟質(zhì)的組分和晶體結(jié)構(gòu)與環(huán)境條件密切相關(guān)，晶體結(jié)構(gòu)會隨蠟質(zhì)組分的改變而改變[10]。

干旱影響大麥等作物的生理代謝、生長發(fā)育、產(chǎn)量及品質(zhì)[11-15]，植株器官表皮蠟質(zhì)性狀與作物抗旱性密切相關(guān)。但是，有關(guān)大麥表皮蠟質(zhì)組分及晶體結(jié)構(gòu)的研究鮮有報道。本研究以大麥品種Morex為研究對象，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS)和掃描電鏡對其不同時期不同器官表皮蠟質(zhì)組分及其含量、晶體結(jié)構(gòu)進行檢測與分析，以期了解大麥表皮蠟質(zhì)組成及其晶體形態(tài)隨生育進程變化的特點，為大麥葉片、穗下莖及葉鞘表皮蠟質(zhì)的合成及大麥蠟質(zhì)合成相關(guān)基因的研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)計

供試材料為大麥Morex，由西北農(nóng)林科技大學小麥分子生物學與育種實驗室提供。于2016年10月種植大麥于西北農(nóng)林科技大學北校區(qū)西區(qū)科研試驗田，翌年分別選取葉片、孕穗期和揚花期穗下莖及葉鞘進行蠟質(zhì)浸提，并對其進行氣相色譜分析和掃描電鏡分析。

1.2 方 法

1.2.1 樣品制備

分別用鑷子隨機選取大麥種植日后100、130、160、190、210和240 d的頂部葉片作為供試樣品；在大麥孕穗期和揚花期，隨機選取穗下莖和葉鞘作為供試樣品，每種樣品4個重復。用掃描儀分別對樣品進行掃描，用Image J 軟件計算表面積，計算方法：在Image J軟件中打開需要計算面積的葉片，在Set Scale菜單中設(shè)定已知距離，選定待測葉片后，待測葉面積被紅色自動填充，在Analyze菜單欄中選擇Analyze Particles計算葉面積，若需計算總面積，可勾選Summarize，輸出結(jié)果可粘貼至Excel表中進行處理。

1.2.2 蠟質(zhì)提取及GC-MS 樣品制備

室溫條件下，在通風櫥內(nèi)將樣品浸沒在裝有30 mL 氯仿的50 mL 玻璃燒杯中，1 min 后取出(期間用鑷子輕翻葉片使其充分被氯仿浸沒)，加入10 μL C24烷烴(1 mg·mL-1)作為內(nèi)標，混勻。待氯仿部分揮發(fā)后，將剩余溶液過濾至15 mL 樣品瓶中，吸取3 mL 氯仿漂洗燒杯2次并全部過濾至樣品瓶中。待過濾液在通風櫥揮發(fā)至1 mL 時，將其轉(zhuǎn)入GC 樣品瓶中，吸取1 mL 氯仿漂洗過濾液樣品瓶并全部轉(zhuǎn)入GC 樣品瓶。用氮氣將樣品吹干，加入30 μL 吡啶、30 μL雙(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺[Bis(trimethylsilyl) trifluoroacetamid]，立即蓋好瓶蓋，70 ℃衍生反應(yīng)60 min，用氮氣恒溫吹干儀將反應(yīng)液吹至完全干燥后加入1 mL 氯仿回溶，供GC-MS分析。

1.2.3 蠟質(zhì)成分分析

采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS-QP2010，日本島津)測定、分析蠟質(zhì)成分。

檢測條件：進樣量1 μL，進樣口溫度280 ℃，分流比2∶1，檢測器溫度320 ℃，掃描離子50～600 amu，載氣為氦氣(He2)。升溫程序：50 ℃ 保持2 min；以20 ℃·min-1升溫至240 ℃，保持2 min；以1.5 ℃·min-1升溫至320 ℃，保持15 min。

根據(jù)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫，對蠟質(zhì)各組分進行定性分析和鑒定。利用Lab Solution 軟件對各組分離子峰的面積進行積分，參照C24內(nèi)標定量分析蠟質(zhì)各組分化合物。

蠟質(zhì)絕對含量=各組分化合物離子峰面積/內(nèi)標C24離子峰面積×內(nèi)標C24體積/樣品體積

相對含量=絕對含量/總含量×100%

1.2.4 掃描電鏡觀察

選擇邊緣平整、形態(tài)良好的葉片、穗下莖和葉鞘用回形針固定在白紙上，放置于干燥箱中，待完全干燥后進行掃描電鏡觀察并拍照。

掃描電鏡方法：將完全干燥的樣品取出，用小刀切取2.5 mm×2.5 mm 的正方形放在導電膠上，將導電膠粘貼在托盤上，抽真空后噴金鍍膜(Hitachi,E-1045)，在冷場發(fā)射掃描電子顯微鏡(Hitachi,S-4800)中掃描觀察蠟質(zhì)晶體。

1.3 數(shù)據(jù)分析

用Excel 2010和DPS 7.05對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，使用Duncan新復極差法對數(shù)據(jù)進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 大麥表皮蠟質(zhì)組分各化合物的碳鏈分布

由GC-MS分析氣相色譜離子峰圖的分布情況可以得出，大麥不同組織表皮蠟質(zhì)各化合物得到了很好的分離，經(jīng)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索，各組織表皮蠟質(zhì)化合物種類共鑒別出20種，分別為烷烴、初級醇、脂肪醛、脂肪酸和二酮。其中，烷烴有5種，主要是奇數(shù)碳原子，碳鏈長度為C25～C33烷烴；初級醇有5種，主要是偶數(shù)碳原子，碳鏈長為C22～C30初級醇；醛有4種，主要是偶數(shù)碳原子，碳鏈長為C24～C30；脂肪酸有4種，主要是偶數(shù)碳原子，碳鏈長為C22～C28；二酮有2種，分別為碳鏈長為C31的β-二酮和其衍生物羥基-β-二酮。

2.2 大麥不同時期葉片表皮的蠟質(zhì)組分及含量

對大麥葉片蠟質(zhì)組分進行定量分析，結(jié)果(圖1)表明，大麥葉片表皮蠟質(zhì)化學組分有初級醇、烷烴、醛、二酮和脂肪酸。初級醇是大麥葉表蠟質(zhì)的主要成分，以C26醇的含量最高(圖2)。在葉片發(fā)育100～190 d期間，大麥葉片蠟質(zhì)總量持續(xù)穩(wěn)定增加，生長至210 d，葉片蠟質(zhì)總量呈逐漸降低的趨勢，在240 d時趨于穩(wěn)定(圖1)。由此可見，大麥葉片蠟質(zhì)含量隨發(fā)育進程推移呈先增加后降低趨勢。由表1可知，在大麥發(fā)育100～190 d時，葉片的表皮蠟質(zhì)組成主要是初級醇(78.25%～85.44%)，其次是烷烴(5.20%～7.48%)、醛(4.15%～6.03 %)、二酮(1.94%～7.88%)和脂肪酸(0.91%～0.97%)；210～240 d時，葉片蠟質(zhì)主要成分是初級醇(79.39%～80.12%)，其次是二酮(7.77%～9.38%)、烷烴(5.78%～6.66%)、醛(3.87%～4.19%)和脂肪酸(1.58%～1.27%)。由此可見，在大麥不同發(fā)育時期，葉片表皮各蠟質(zhì)組分之間存在差異。發(fā)育100～240 d期間，大麥葉片蠟質(zhì)組分中初級醇的含量先升高后降低。100 d時，由于大麥處于蠟質(zhì)發(fā)育初期階段，蠟質(zhì)各組分含量均較低。120 d 時，蠟質(zhì)組分中初級醇含量急劇增加，達到了12.35 μg·cm-2，且處于主導地位，烷烴、醛、脂肪酸和二酮有少量增加。在190 d時初級醇含量達到最大值(14.53 μg·cm-2)，烷烴、醛和脂肪酸的含量也達到頂峰。在發(fā)育后期(210～240 d)初級醇的含量持續(xù)降低并趨于穩(wěn)定，烷烴、醛和脂肪酸的含量也在逐漸減少。初級醇的絕對含量在100 d和190 d之間直續(xù)增加，但其相對含量卻在190 d時最低；210～240 d時，初級醇的絕對含量和相對含量均較100～160 d有所下降；而二酮的相對含量整體呈增加趨勢，在240 d時最大(9.38%)(圖1，表1)。

圖1 大麥葉片蠟質(zhì)各組分和總蠟質(zhì)含量Fig.1 Absolute components and total wax content of barley leaf wax

大麥蠟質(zhì)中初級醇分別為C22醇、C24醇、C26醇、C28醇和C30醇的偶數(shù)碳鏈長度。其中，C26醇是大麥葉片蠟質(zhì)初級醇的主要成分，在大麥發(fā)育的各個時期含量均最高，C24醇、C28醇和C22醇次之，C30醇最少。大麥生長至190 d 時，各碳鏈長度的初級醇含量均達到最高，以C26醇的含量最高。綜上所述，在此時期大麥葉片在進行充分地蠟質(zhì)合成，初級醇的合成最活躍。210～240 d時，C26醇劇減，其他碳鏈長度的初級醇也有明顯降低(圖2)。

表1 大麥葉片蠟質(zhì)各組分的相對含量Table 1 Relative contents of wax components of barley leaves %

圖2 大麥葉片蠟質(zhì)不同碳鏈長度初級醇含量Fig.2 Content of different carbon chains of primary alcohols in barley leaf wax

2.3 大麥孕穗期及揚花期穗下莖和葉鞘的蠟質(zhì)組分及含量

對大麥孕穗期和揚花期穗下莖和葉鞘蠟質(zhì)進行分析，結(jié)果表明，穗下莖和葉鞘表皮蠟質(zhì)主要成分均由烷烴、初級醇、醛、脂肪酸和二酮組成，以二酮含量高，初級醇次之，烷烴、醛和脂肪酸含量較少。大麥從孕穗期到揚花期，穗下莖和葉鞘蠟質(zhì)總量及各組分含量均呈現(xiàn)增加的趨勢(圖3)。不同器官在不同時期蠟質(zhì)各組分的含量不同，葉鞘蠟質(zhì)總量均比穗下莖高。穗下莖中，二酮含量最高(73.84%～75.47%)，初級醇(7.97%～15.08%)、烷烴(8.25%～12.39%)和醛(1.65%～2.35%)次之，脂肪酸(0.87%～1.43%)最少；在葉鞘中，同樣是二酮含量最高(69.82%～86.85%)，初級醇(7.13%～16.35%)、烷烴(3.87%～7.96%)和醛(1.28%～3.79%)次之，脂肪酸(1.01%～2.07%)最少(表2)。在大麥揚花期，穗下莖和葉鞘蠟質(zhì)各組分含量均達到最高，以二酮含量最高，分別達到了5.43 μg·cm-2和17.20 μg·cm-2(圖2)。

比較各蠟質(zhì)組分的鏈長分布(圖4)發(fā)現(xiàn)，穗下莖中，不同碳鏈長度的烷烴以C31烷烴為主，其次是C29、C27和C25烷烴，C33烷烴最少，且在揚花期的含量均略高于孕穗期；初級醇主要由C22、C24、C26、C28和C30醇構(gòu)成，其中，C30醇的含量最高，C26醇、C28醇和C24醇次之，C22醇最少，且在揚花期含量均明顯增加；醛以碳鏈長度為C24醛為主，其次是C30醛和C26醛，C28醛最少，且在孕穗期和揚花期間無明顯差異；脂肪酸主要由C22、C24、C26和C28酸構(gòu)成，在孕穗期，C28酸占主導地位，在揚花期，C26酸占主導地位，C22和C24酸的含量在兩個時期差異不明顯。在葉鞘中，烷烴中C29烷烴含量最高，其次是C31、C27和C25烷烴，C33烷烴最少，且其在揚花期含量均較高，以C29烷烴的含量變化最明顯。初級醇各碳鏈長度醇含量依次為C30、C26、C28、C24和C22，且在揚花期的含量均較高，其中C30初級醇含量增加最明顯。不同碳鏈長度的醛以C30醛為主，其次是C24和C28醛，C26醛相對較少，且在揚花期的含量均明顯較高，其中C30醛的含量增加最明顯。不同鏈長的脂肪酸中，C28脂肪酸的含量最高，其次是C24和C22脂肪酸，C26脂肪酸最少，且在揚花期的含量均明顯較高，以C22脂肪酸增幅最大。結(jié)果表明，孕穗期和揚花期大麥各器官表皮中的不同鏈長的蠟質(zhì)組分含量存在差異，且各組分在揚花期的含量均較高。

圖3 大麥孕穗期和揚花期不同器官中蠟質(zhì)各組分含量Fig.3 Absolute contents of wax components in different organs of barley at booting stage and flowering stage表2 大麥孕穗期和揚花期不同器官表面蠟質(zhì)各組分的相對含量Table 2 Relative contents of wax components in different organs of barley at booting stage and flowering stage %

圖4 大麥孕穗期和揚花期不同器官表面蠟質(zhì)各組分不同碳鏈長度蠟質(zhì)含量Fig.4 Absolute contents of wax in different organs of different carbon chains in barley at booting stage and flowering stage

由表3可知，不同時期大麥穗下莖和葉鞘表皮蠟質(zhì)組分二酮差異程度不同。大麥孕穗期和揚花期，葉鞘中β-二酮的含量、羥基-β-二酮的含量及其總含量均高于穗下莖，經(jīng)觀察，大麥揚花期葉鞘的白霜狀物質(zhì)較孕穗期更明顯。穗下莖和葉鞘中β-二酮的含量均顯著高于羥基-β-二酮(P<0.05)。孕穗期，葉鞘中β-二酮、羥基-β-二酮及總二酮的含量顯著低于揚花期，與穗下莖中的含量差異均不顯著。

2.4 大麥不同時期葉片表皮蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)的變化

大麥葉片表皮蠟質(zhì)晶體的掃描電鏡結(jié)果(圖5)顯示，大麥發(fā)育不同時期葉片上下表面的蠟質(zhì)晶體均呈現(xiàn)片狀結(jié)構(gòu)，且不均勻覆蓋在整個葉片表面上。不同發(fā)育時期表皮蠟質(zhì)片狀晶體的密度存在明顯差異。在發(fā)育100 d時，片狀晶體分布較稀疏，且葉片上表面片狀晶體的分布較下表面更密集(圖5A、B)。隨著大麥的生長發(fā)育，片狀晶體的分布越來越致密，160 d(圖5E、F)和190 d(圖5G、H) 晶體分布最致密，與大麥葉片蠟質(zhì)總量變化一致，210 d 片狀晶體相對較稀疏(圖5I、J)，240 d 時蠟質(zhì)晶體致密程度基本保持不變(圖5K、L)。結(jié)合初級醇在各時期的含量變化推測，初級醇的生成可能是導致大麥葉片蠟質(zhì)晶體呈現(xiàn)片狀的原因之一。

表3 大麥孕穗期和揚花期不同器官表皮蠟質(zhì)二酮的絕對含量Table 3 Absolute contents of diketones in different organs in barley at flowering stage and mature stage μg·cm-2

同列數(shù)據(jù)后不同字母表示差異在0.05水平顯著。

Different letters following the values in same column indicate significant difference at 0.05 levels.

A和B:葉片上下表面(100 d)；C和D:葉片上下表面(130 d)；E和F:葉片上下表面(160 d)；G和H:葉片上下表面(190 d)；I和J:葉片上下表面(210 d)；K和L:葉片上下表面(240 d)。

A and B:Adaxial and abaxial surface of leaf(100 d); C and D:Adaxial and abaxial surface of leaf(130 d); E and F:Adaxial and abaxial surface of leaf(160 d); G and H:Adaxial and abaxial surface of leaf(190 d); I and J:Adaxial and abaxial surface of leaf(210 d); K and L:Adaxial and abaxial surface of leaf(240 d).

圖5大麥葉片表皮晶體的掃描電鏡觀察

Fig.5Cuticularwaxcrystalsontheleafsurfaceofbarley

2.5 大麥穗下莖和葉鞘表皮蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)

如圖6顯示，大麥穗下莖和葉鞘的蠟質(zhì)晶體均呈棒狀結(jié)構(gòu)。與孕穗期比較，揚花期穗下莖和葉鞘表皮蠟質(zhì)晶體分布均更致密，其中，葉鞘表皮蠟質(zhì)晶體變化較為明顯，且孕穗期和揚花期葉鞘表皮蠟質(zhì)晶體較穗下莖更為致密。

3 討 論

本研究從大麥葉片、穗下莖和葉鞘表皮蠟質(zhì)共鑒定出20種蠟質(zhì)化合物，分別為烷烴、初級醇、醛、脂肪酸和二酮，其含量存在明顯差異，這與對擬南芥表皮蠟質(zhì)組成的研究結(jié)果一致[7]。研究發(fā)現(xiàn)，擬南芥表皮蠟質(zhì)的合成通路主要為合成初級醇的?；€原途徑與合成醛、烷烴、酮的脫羰途徑兩種[16]。依據(jù)大麥葉片蠟質(zhì)組分推測，大麥葉片表皮蠟質(zhì)的合成途徑與擬南芥相似，但供試材料的穗下莖和葉鞘主要合成二酮，與擬南芥不同，這與羅文巧等[9]研究結(jié)果一致，推測大麥表皮蠟質(zhì)的合成基因可能與擬南芥存在差異。

A:孕穗期穗下莖；B:揚花期穗下莖；C:孕穗期葉鞘；D:揚花期葉鞘。

A:Peduncle at booting stage; B:Peduncle at flowering stage; C:Leaf sheath at booting stage; D:Leaf sheath at flowering stage.

圖6大麥孕穗期和揚花期不同器官表皮蠟質(zhì)晶體的掃描電鏡觀察

Fig.6Cuticularwaxcrystalsonthesurfaceindifferentorgansofbarleyatfloweringstageandmaturestage

不同時期大麥葉片表皮蠟質(zhì)成分存在很大的差異，大麥從三葉期(100 d)到揚花期(190 d)蠟質(zhì)含量逐漸增加，隨后逐漸降低并趨于穩(wěn)定。穗下莖和葉鞘中蠟質(zhì)總量變化趨勢同葉片，推測在大麥的揚花期(190 d)之前，大麥表皮處于蠟質(zhì)合成和發(fā)育階段，蠟質(zhì)合成活躍，各組織蠟質(zhì)含量逐步增加。進入成熟期(210～240 d)后，蠟質(zhì)合成減弱，蠟質(zhì)發(fā)育基本完成，因此蠟質(zhì)含量也降低。汪 勇等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在小麥葉片發(fā)育早期(100 d)，初級醇的含量最高，隨后逐漸降低。而本研究發(fā)現(xiàn)，在大麥葉片發(fā)育早期(100 d)，初級醇的含量極低，隨后呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢，并在190 d達到最高。推測可能是因為品種不同所致。分析不同碳鏈長度的蠟質(zhì)組分，發(fā)現(xiàn)大麥葉片表皮蠟質(zhì)成分主要是C22～C30偶數(shù)碳鏈長度的初級醇，以C26醇含量最高，其次是烷烴和醛，分別以C25～C33奇數(shù)碳鏈和C24～C30偶數(shù)碳鏈為主，二酮和脂肪酸的含量相對較少，其中脂肪酸的碳鏈長度以C22～C28偶數(shù)碳鏈為主。大麥葉片表皮蠟質(zhì)組成中，C26初級醇的含量最高，且葉片上下表皮蠟質(zhì)晶體均呈現(xiàn)密集的片狀結(jié)構(gòu)，推測初級醇可能是使表皮蠟質(zhì)呈現(xiàn)片狀晶體結(jié)構(gòu)的主要原因，這與張蕓蕓等[18]發(fā)現(xiàn)小麥葉片下表皮蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)為柱狀的研究結(jié)果不同，可能由于大麥表皮蠟質(zhì)組成與小麥存在差異。

大麥不同器官的表皮蠟質(zhì)成分也存在很大的差異。孕穗期和揚花期穗下莖和葉鞘的蠟質(zhì)主要成分為二酮，且蠟質(zhì)晶體呈現(xiàn)棒狀形態(tài)，這與擬南芥莖稈的片狀晶體不同，與長角果莖稈的晶體形態(tài)一致[19]。Barthlott等[20]研究證明，棒狀晶體的形成主要是因為蠟質(zhì)中的二酮成分比較高。本研究發(fā)現(xiàn)，葉鞘和穗下莖表皮二酮的含量顯著高于其他蠟質(zhì)組分，且蠟質(zhì)晶體呈棒狀形態(tài)，可初步認為大麥中蠟質(zhì)晶體呈現(xiàn)棒狀形態(tài)與二酮有關(guān)。Zhang等[21]研究發(fā)現(xiàn)，二酮的含量是影響白霜狀表型差異的主要原因之一。本研究中，揚花期大麥葉鞘和穗下莖表面的有明顯白霜狀蠟質(zhì)，推測大麥葉鞘和穗下莖表面的白霜狀與高含量二酮有關(guān)。植物表皮蠟質(zhì)的合成及晶體形態(tài)與環(huán)境脅迫直接相關(guān)，干旱條件下植物為防止水分散失，表皮蠟質(zhì)的含量普遍增多，且蠟質(zhì)晶體密布植物表皮。一般認為蠟質(zhì)含量越高，植物的抗旱性越強，抗病蟲害能力越好[22]。本研究中，大麥不同器官的表皮有著豐富的蠟質(zhì)，這些蠟質(zhì)成分對于大麥對抗干旱等逆境有著重要的作用。本研究首次對大麥葉片蠟質(zhì)的發(fā)育進行了研究，分析了大麥不同組織的蠟質(zhì)成分變化，對今后進一步研究大麥蠟質(zhì)組分的合成機理奠定了基礎(chǔ)。

參考文獻：

[1] 王美芳,陳巨蓮,原國輝.植物表面蠟質(zhì)對植食性昆蟲取食行為的影響[J].生態(tài)環(huán)境學報,2009,18(3):1155.

WANG M F,CHEN J L,YUAN G H.Effects of plant epicuticular waxes on phytophagous insects behavior [J].EcologyandEnvironmentalScienses,2009,18(3):1155.

[2] SIEBER P,SCHORDERET M,RYSER U,etal.Transgenic Arabidopsis plants expressing a fungal cutinase show alterations in the structure and properties of the cuticle and postgenital organ fusions [J].ThePlantCell,2000,12(5):721.

[3] STEINKAMP M P.Ultrastructure of lesions produced byCercosporabeticolain leaves of beta vulgaris [J].PhysiologicalPlantPathology,1979,15(1):13.

[4] 宋 超,王 婧,郭彥軍,等.植物表皮蠟質(zhì)對環(huán)境脅迫的響應(yīng)[J].植物生理學通訊,2011,47(10):951.

SONG C,WANG J,GUO Y J,etal,Response of plant epicuticular wax to environmental factors [J].PlantPhysiologyCommunications,2011,47(10):951.

[5] 李靈之,馬 杰,向建華,等.植物角質(zhì)層內(nèi)外蠟質(zhì)的差異及其與抗逆性的關(guān)系[J].植物生理學通訊,2011,47(7):680.

LI L Z,MA J,XIANG J H,etal.Composition differences of epicuticular and intracuticular wax layers and the relationship between cuticle and plant stress tolerance [J].PlantPhysiologyCommunications,2011,47(7):680.

[6] 楊昊虹,史 雪,夏凌峰,等.不同小麥品種(系)穗部表皮蠟質(zhì)的成分及含量分析[J].麥類作物學報,2017,37(3):403.

YANG H H,SHI X,XIA L F,etal.Analysis on composition and content of cuticular waxes on spikes of different wheat varities(lines) [J].JournalofTriticeaeCrops,2017,37(3):403.

[7] STEPHEN G,WEN M,DAVID B,etal.The cytochrome P450 enzyme CYP96A15 is the midchain alkane hydroxylase responsible for formation of secondary alcohols and ketones in stem cuticular wax ofArabidopsis[J].PlantPhysiology,2007,145(3):653.

[8] MAO B G,CHENG Z J,LEI C L,etal.Wax crystal-sparse leaf 2,a rice homologue of WAX2/GL1,is involved in synthesis of leaf cuticular wax [J].Planta,2012,235(1):39.

[9] 羅文巧,吳洪啟,趙 帥,等.小麥品系CP98(11)不同器官表皮蠟質(zhì)組分和蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)的差異分析[J].西北植物學報,2017,37(3):495.

LUO W Q,WU H Q,ZHAO S,etal.Analysis of cuticular wax components and crystal structures in different organs of wheat line CP98(11) [J].ActaBotanicaBoreali-OccidentaliaSinica,2017,37(3):495.

[10] KERSTIN K,ENSIKAT H J.The hydrophobic coatings of plant surfaces:Epicuticular wax crystals and their morphologies,crystallinity and molecular self-assembly [J].Micron(Oxford,England:1993),2008,39(7):759.

[11] 胡繼超,姜 東,曹衛(wèi)星,等.短期干旱對水稻葉水勢、光合作用及干物質(zhì)分配的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學報,2004,15(1):63.

HU J C,JIANG D,CAO W X,etal.Effect of short-term drought on leaf water potential,photosynthesis and dry matter partitioning in paddy rice [J].TheJournalofAppliedEcology,2004,15(1):63.

[12] COCHARD H,COLL L,LE ROUX X,etal.Unraveling the effects of plant hydraulics on stomatal closure during water stress in walnut [J].PlantPhysiol,2002,128(1):282.

[13] KOLODZIEJEK I,KOZIOL J,WALEZA M,etal.Ultrastructrue of mesophyll cells and pigment content in senescing leaves of maize and barley [J].JournalofPlantGrowthRegulation,2003,22(3):217.

[14] 楊金華,程加省,于亞雄,等.不同栽培方式對大麥葉片性狀的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學報,2010,23(1):37.

YANG J H,CHENG J S,YU Y X,etal.Effect of different cultivation model on barley leaf characteristics [J].SouthwestChinaJournalAgriculturalSciences,2010,23(1):37.

[15] 陳文利,徐朗萊,沈文飚,等.鹽脅迫下兩品種大麥葉片H2O2累積及其清除酶活性的變化[J].南京農(nóng)業(yè)大學學報,1999,22(2):97.

CHEN W L,XU L L,SHEN W B,etal.Changes of hydrogen peroxide accumulation and hydrogen peroxide-scavenging enzyme activity in the leaves of two barley species under salt stress [J].JournalofNanjingAgriculturalUniversity,1999,22(2):97.

[16] ROWLAND O.CER4 encodes an alcohol-forming fatty acyl-coenzyme a reductase involved in cuticular wax production inArabidopsis[J].PlantPhysiology,2006,142(3):866.

[17] WANG Y,WANG J,CHAI G.Developmental changes in composition and morphology of cuticular waxes on leaves and spikes of glossy and glaucous wheat(TriticumaestivumL.) [J].PloSOne,2015,10(10):e0141239.

[18] 張蕓蕓,李婷婷,孫瑜琳,等.小麥葉片表皮蠟質(zhì)成分及含量分析[J].麥類作物學報,2014,34(7):963.

ZHANG Y Y,LI T T,SUN Y L,etal.Analysis on composition and content of leaf cuticular waxes of wheat(Triticumaestivum) detected by GC-MS [J].JournalofTriticeaeCrops,2014,34(7):963.

[19] BERNARD A I.Arabidoosiscuticular waxes:Advances in synthesis,export and regulation [J].ProgressinLipidResearch,2013,52(1):110.

[20] BARTHLOTT W,NEINHUIS C,DACID C,etal.Classification and terminology of plant epicuticular waxes [J].BotanicalJournaloftheLinneanSociety,1998,126(3):237.

[21] ZHANG Z.Genetic interactions underlying the biosynthesis and inhibition of 2-diketones in wheat and their impact on glaucousness and cuticle permeability [J].PloSOne,2013,8(1):e54129.

[22] SANCHEZ F J.Residual transpiration rate,epicuticular wax load and leaf colour of pea plants in drought conditions.Influence on harvest index and canopy temperature [J].EuropeanJournalofAgronomy,2001,15(1):57.