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一、研究意義

大補陰丸出自元代醫(yī)學家朱震亨著述的《丹溪心法》，此書由明代程充校訂，刊于1481年。原方載為黃柏（炒褐色）、知母（酒浸，炒，各四兩）、熟地（酒蒸）、龜板（酥炙）各六兩為末，豬脊髓和蜜丸，桐子大，每服七十丸、空心淡鹽湯下。此方降陰火補腎水。目前收錄于2015版《中國藥典》一部，其中在含量檢測項僅對黃柏的主要成分小檗堿進行測定，無法全面反映此方君藥熟地黃和臣藥鹽知母等藥味，現(xiàn)主要對大補陰丸進行全波長3D掃描，確定其主要成分[1]。本文采用了HPLC-DAD法確定了大補陰丸中的主要成分。

二、儀器與材料

Agilent1260高效液相色譜儀（美國安捷倫科技有限公司）、DAD檢測器、Alltech6000型蒸發(fā)光散射檢測器、CBL-Model9960D型超聲振蕩儀、Sartorius BSA224S型電子天平。甲醇和乙腈（色譜純，安徽時聯(lián)特種溶劑股份有限公司），磷酸二氫鉀（分析純，天津博迪化工股份有限公司），水為純化水。其余試劑均為分析純，芒果苷對照品（111607，中國食品藥品檢定研究院），毛蕊花糖苷對照品（111530，中國食品藥品檢定研究院），密力特苷（19467-03-9）、新芒果苷（64809-67-2）和地黃苷 D（81720-08-3）均來自成都格利普生物科技有限公司，大補陰丸廠家為杭州胡慶余堂藥業(yè)有限公司。

三、研究方法與結果

1.大補陰丸HPLC-DAD含量測定

色譜條件：色譜柱：AccurasilC18（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（30∶70）；流速為1.0ml/min；檢測波長為270nm；柱溫為35℃；進樣量為10μl。

對照品溶液的制備：取芒果苷和毛蕊花糖苷對照品適量，精密稱定，加鹽酸-甲醇（1∶100）的混合溶液制成每1ml含芒果苷50μg和毛蕊花糖苷10μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備：取本品水蜜丸，研細，取約0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入鹽酸-甲醇（1∶100）的混合溶液25ml，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率140W，頻率42kHz）1小時，放冷，再稱定質(zhì)量，用上述混合溶液補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得[2]。

按照以上方法對大補陰丸進行含量測定。（見圖1）

2.大補陰丸色譜條件的建立

對大補陰丸按照上述條件、方法進行HPLC-DAD全波長三維掃描。（見圖2）

圖1 大補陰丸含量色譜圖

圖2 大補陰丸全波長三維掃描

通過全波長掃描可以看出，在270nm處，色譜峰數(shù)目較多，且通過芒果苷（鹽知母）和毛蕊花糖苷（熟地黃）全波長三維掃描（見圖3），可以看出在270nm處，兩者均有吸收。同時對熟地黃中所含化學成分進行進一步三維掃描，并確定了熟地黃中密力特苷的三維掃描色譜圖（見圖4），并證明了密力特苷對主方法沒有干擾，確定了此方法的合理性和優(yōu)越性[3]。

圖3 芒果苷和毛蕊花糖苷全波長三維掃描

圖4 密力特苷三維掃描色譜圖

四、討論

本文首先對2015版《中國藥典》檢測方法進行優(yōu)化，確定了最佳流動相比例和吸收波長（270nm），使各種成分得到了很好的分離效果。同時對大補陰丸進行全波長掃描，得到了主要成分芒果苷和毛蕊花糖苷三維立體色譜圖，證明了在270nm處二者均有吸收，此檢測方法能全面地反映大補陰丸的主要含量指標，并且通過進一步對君藥熟地黃和鹽知母中其他主要化學成分進行三維掃描，驗證了在270nm處密力特苷、地黃苷D和新芒果苷對主方法沒有干擾。因此本方法為大補陰丸的質(zhì)量控制提供了有效依據(jù)，可進一步提高大補陰丸的質(zhì)量標準?！?/p>

[1]國家藥典委員會.中國藥典（一部）[M].北京：化學工業(yè)出版社，2015.

[2]蔡鈴英，陳子春.高效液相色譜法測定大補陰丸中鹽酸小檗堿的含量[J].中國民族民間醫(yī)藥，2010（14）：39.

[3]孫忠義.大補陰丸在臨床中的應用[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，1996（S1）：74.