劉立春

（唐山市眼科醫(yī)院，河北 唐山 063000）

單純皰疹病毒性角膜炎是眼科常見的感染性疾病，其發(fā)病率居角膜病之首。此病患者的病情可反復(fù)發(fā)作，若未得到有效的治療可顯著增加視力喪失的發(fā)生率[1]。在臨床上，主要采用角膜刮片PCR檢測(cè)法診斷單純皰疹病毒性角膜炎。本次研究主要分析采用不同的刮片法對(duì)單純皰疹病毒性角膜炎患者進(jìn)行PCR檢測(cè)的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究的對(duì)象為2016年2月至2017年5月唐山市眼科醫(yī)院收治的62例單純皰疹病毒性角膜炎患者。按照刮片方法的不同將這些患者分為觀察組與對(duì)照組。在觀察組31例患者中，有女12例，男19例；其年齡為21～72歲，平均年齡為（51.02±2.15）歲。在對(duì)照組31例患者中，有女10例，男21例；其年齡為24～73歲，平均年齡為（52.73±2.08）歲。兩組患者的一般資料相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

為對(duì)照組患者采用常規(guī)肉眼下角膜刮片取樣法進(jìn)行PCR檢測(cè)，檢測(cè)方法是：將鹽酸奧布卡因滴眼液滴入患者眼球的表面進(jìn)行局部麻醉，間隔5 min滴眼一次，共滴眼2次。在肉眼直視下從其角膜病變處取少量的組織，置于經(jīng)無(wú)菌處理、裝有0.5 ml生理鹽水的離心管中進(jìn)行PCR檢測(cè)。為觀察組患者采用裂隙燈顯微鏡下角膜刮片取樣法進(jìn)行PCR檢測(cè)，檢測(cè)方法是：將鹽酸奧布卡因滴眼液滴入患者眼球的表面進(jìn)行局部麻醉，間隔5 min滴眼一次，共滴眼2次。在裂隙燈顯微鏡的輔助下，用角膜刀從患者角膜病灶的邊緣刮取少許的上皮組織，將組織樣本置于經(jīng)無(wú)菌處理、裝有0.5 ml生理鹽水的離心管中進(jìn)行PCR檢測(cè)。在對(duì)兩組患者進(jìn)行PCR檢測(cè)時(shí)若發(fā)現(xiàn)HSV-1 DNA，可判定檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料用（）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用%表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)PCR檢測(cè)，在觀察組患者中有19例患者檢出HSV-1 DNA，其檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率為61.29%；在對(duì)照組患者中有7例患者檢出HSV-1 DNA，其檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率為22.58%。與對(duì)照組患者相比，觀察組患者進(jìn)行PCR檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 兩組患者檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率的對(duì)比

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)，及早確診單純皰疹病毒性角膜炎患者的病情并積極對(duì)其進(jìn)行治療，是改善其預(yù)后的重要手段[2]。進(jìn)行角膜刮片PCR檢測(cè)是診斷單純皰疹病毒性角膜炎的重要方法。PCR是一種用于體外快速擴(kuò)增DNA的技術(shù)，在檢測(cè)病毒基因方面的特異性、敏感性均較高，近年來(lái)被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域[3]。

在采用角膜刮片PCR檢測(cè)法診斷單純皰疹病毒性角膜炎時(shí)，必須刮取到含有單純皰疹病毒的角膜上皮組織，才能保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。研究發(fā)現(xiàn)，與采用常規(guī)肉眼下角膜刮片取樣法相比，為此病患者采用裂隙燈下顯微鏡下角膜刮片取樣法進(jìn)行PCR檢測(cè)可更準(zhǔn)確地診斷其病情[4]。在裂隙燈顯微鏡下進(jìn)行角膜刮片取樣時(shí)，能夠準(zhǔn)確地分辨發(fā)生病變的角膜上皮組織，確保取樣的準(zhǔn)確性[5]。在顯微鏡下對(duì)單純皰疹病毒性角膜炎患者的病灶進(jìn)行觀察，可準(zhǔn)確地判斷其病變角膜的大小和深度，并可降低對(duì)其患眼的損傷[6]。單純皰疹病毒性角膜炎患者的角膜上皮細(xì)胞在受到病毒的侵襲后可發(fā)生增殖或變性，進(jìn)而可導(dǎo)致角膜上皮缺損，其病灶邊緣的組織中病毒的增殖更為活躍。因此，在對(duì)此病患者進(jìn)行角膜刮片取樣時(shí)，應(yīng)從其患眼病灶的邊緣組織刮取樣本。

本次研究的結(jié)果顯示,與對(duì)照組患者相比，觀察組患者進(jìn)行PCR檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）?？梢?，與采用常規(guī)肉眼下角膜刮片取樣法相比，采用裂隙燈顯微鏡下角膜刮片取樣法對(duì)單純皰疹病毒性角膜炎患者進(jìn)行PCR檢測(cè)可顯著提高其病情的檢出率。

[1] 張蕾,虞衛(wèi),周文璇,等.不同刮片方法在單純皰疹病毒性角膜炎PCR診斷中應(yīng)用的比較研究[J].護(hù)士進(jìn)修雜志,2013,28(4):331-332.

[2] 吳年浪,趙江浩,張惠成.單純皰疹病毒性角膜炎治療中應(yīng)用定量PCR技術(shù)的研究[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2013,42(6):133-136.

[3] 馬君鑫,王林農(nóng),周如俠,等.實(shí)時(shí)熒光探針定量PCR法在壞死性基質(zhì)型單純皰疹病毒性角膜炎病原檢測(cè)中的應(yīng)用[J].中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志,2015，33(5):446-450.

[4] 徐欣,張櫻楠,潘志強(qiáng),等.單純皰疹病毒性角膜炎角膜組織病毒潛伏感染的PCR檢測(cè)分析[J].眼科,2013，12(1):45-48.

[5] Kowalski RP，Thompson PP，Cronin TH.Cell culture isolation canmiss the laboratory diagnosis of HSV ocular infection[J].Int J Oph-thalmol，2010，10(11) : 2045 － 2048.

[6] 王林農(nóng).單純皰疹病毒性角膜炎的實(shí)驗(yàn)室檢查現(xiàn)狀及進(jìn)展[J].國(guó)際眼科雜志,2013，13(12):2414-2417.