盧 潔

成都市第二人民醫(yī)院 檢驗科(成都 610017)

腎病綜合征(NS)典型病理特征為腎小球濾過膜通透性提高，表現(xiàn)出蛋白尿顯著增多、高血脂癥等綜合征[1]。臨床上90%左右NS為原發(fā)性NS(PNS)，其中超過85%為微小病變型，多對糖皮質(zhì)激素敏感，即激素敏感型NS(SSNS)[2]。NS發(fā)病機制尚不明確，可能與細胞免疫、炎癥等有關(guān)[3]。轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)為一種常見細胞因子，可調(diào)節(jié)細胞增殖、分化及凋亡，可促炎癥發(fā)生，誘導細胞外基質(zhì)(ECM)聚集，導致多臟器纖維化[4]。CXC趨化因子配體16(CXCL16)為有趨化功能的細胞因子之一，可溶性CXCL16對CD4+T細胞、CD8+T細胞等多種細胞有趨化作用[5]，且B細胞、巨噬細胞等多種因子可表達CXCL16[6]，可見CXCL16與免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。目前關(guān)于兒童NS與血清TGF-β1或CXCL16水平關(guān)系的相關(guān)研究報道較少。本研究旨在分析兒童NS血清TGF-β1、CXCL16和血脂水平的變化情況，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016年1月至2017年12月成都市第二人民醫(yī)院收治的NS患兒150例作為病例組。納入標準：1)均符合PNS相關(guān)診斷標準[7]，且經(jīng)血生化相關(guān)檢查證實；2)均為初診患兒；3)既往均未應(yīng)用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑；4)均配合完成相關(guān)檢查；5)資料完整。排除標準：1)繼發(fā)性或先天性NS；2)有腎病家族史；3)患免疫性疾病、腫瘤、血液性疾??；4)其他原因引發(fā)的高血脂癥者；5)腎功能異常、高血糖者。其中男96例，女54例；年齡2.0～13.5(6.25±1.02)歲；病例組活動期患兒100例，緩解期患兒50例(均為活動期隨訪到緩解期)。選擇同期在該院作健康體檢的正常兒童60例為對照組，男40例，女20例；年齡2～14(6.34±1.10)歲。病例組患兒和對照組兒童在性別、年齡等基本資料方面比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

病例組活動期患兒血尿標本采集前均未接受激素、免疫抑制劑干預(yù)。清晨空腹抽取各組受試者靜脈血6 mL，常規(guī)離心，離心速度3 000 r/min,離心半徑17 cm，離心5 min后提取血清保存于-20 ℃冰箱中。采用邁瑞B(yǎng)S-220全自動生化分析儀測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)等血脂指標及血清白蛋白(ALB)水平，分別采取酶法與溴甲酚綠法；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清TGF-β1、CXCL16水平，ELISA試劑盒由上海恒遠生物科技有限公司生產(chǎn)，按照說明書操作。另外收集病例組活動期患兒24 h尿液，記錄尿量，通過比色法測定其24 h尿蛋白定量，試劑盒由上海信裕生物科技有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 各組血清TGF-β1、CXCL16水平比較

病例組活動期患兒血清TGF-β1、CXCL16水平均明顯高于病例組緩解期患兒和對照組兒童，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；病例組緩解期患兒上述指標與對照組兒童比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(表1)。

表1 各組兒童血清TGF-β1、CXCL16水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與病例組緩解期比較，#P<0.05

2.2 各組血脂指標和血清ALB水平比較

病例組活動期患兒TC、TG、LDL-C水平均明顯高于病例組緩解期患兒和對照組兒童；ALB水平均明顯低于病例組緩解期患兒和對照組兒童，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；病例組緩解期患兒上述指標與對照組兒童比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(表2)。

表2 各組兒童血脂指標、血清ALB水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與病例組緩解期比較，#P<0.05

2.3 血清TGF-β1、CXCL16水平和24 h尿蛋白定量、ALB、血脂相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)分析表明，病例組活動期NS患兒血清TGF-β1、CXCL16分別與24 h尿蛋白定量、TC、TG、LDL-C呈正相關(guān)，與ALB呈負相關(guān)(P<0.05)(表3)。

表3 病例組活動期患兒血清TGF-β1、CXCL16水平與24 h尿蛋白定量、ALB、血脂的關(guān)系(r)

注：*P<0.05

3 討論

PNS典型特征為高脂血癥與低蛋白血癥，前者多通過血脂指標評價，后者則以血清ALB為常見指標。臨床上血脂指標包括TC、TG、LDL-C、HDL-C等，TC、TG、LDL-C中任一項或多項指標上升提示高脂血癥，血脂中以TC、TG為主要成分，前者可促膽汁酸、細胞漿膜合成，后者以體內(nèi)能量代謝參與為主。LDL-C屬于血中膽固醇運載主要載體之一，借助自由基促使脂質(zhì)過氧化物等物質(zhì)產(chǎn)生，且其自身載脂蛋白B之賴氨酸可氧化修飾，之后其會被巨噬細胞的清道夫受體攝取，促膽固醇形成、聚集。本研究結(jié)果顯示，相比正常兒童，病例組活動期患兒TC、TG、LDL-C水平均明顯升高，而HDL-C無明顯變化，提示TC、TG、LDL-C可能參與NS發(fā)病。同時，血脂指標方面比較，病例組緩解期患兒與對照組兒童比較，差異均無統(tǒng)計學意義，而緩解期患兒均由活動期隨訪到緩解期，說明TC、TG、LDL-C對兒童NS病情有一定的評估作用，特別是NS活動期。本研究發(fā)現(xiàn)，病例組活動期患兒血清ALB水平比對照組兒童及病例組緩解期兒童均明顯降低，提示NS活動期血清ALB明顯降低，表現(xiàn)出低蛋白血癥癥狀，而經(jīng)治療隨訪到緩解期時患兒癥狀明顯改善。

研究[8]表明，脂質(zhì)對系膜細胞有刺激作用，促其和單核細胞相互影響，誘導單核細胞分泌釋放出相關(guān)炎癥因子?？梢奝NS患兒高血脂癥表現(xiàn)時多伴炎癥。TGF-β1被公認為是主要致纖維化因子，分布在染色體19q3上，外顯子7個，其與炎癥反應(yīng)、腎纖維化等均相關(guān)[9]。龐楚越等[10]研究表明SSNS急性期血清TGF-β1水平上升，緩解期TGF-β1水平接近正常。劉濤等[11]研究發(fā)現(xiàn)SSNS活動期外周血單個核細胞TGF-β1 mRNA表達比正常兒童及緩解期顯著高，提示TGF-β1參與NS發(fā)生、進展過程，其機制可能為TGF-β1引發(fā)腎間質(zhì)纖維化、促細胞凋亡等。雖然檢測方法不同，但本研究結(jié)果與之相符。趨化因子與炎癥、免疫應(yīng)答密切相關(guān)。CXCL16包括膜結(jié)合型與分泌型兩種形式，前者在細胞表面跨膜式表達，不僅能發(fā)揮細胞表面之黏附分子作用，而且能發(fā)揮其清道夫受體的生物作用。膜結(jié)合型CXCL16于解整合素樣金屬蛋白酶10影響下會脫落成可溶型，有趨化活性，對T細胞、NKT細胞(均能表達CXCR6)有招募作用[12]。研究[13-14]表明可溶性足細胞源性CXCL16對T細胞、系膜細胞有趨化作用，誘導系膜細胞增殖。研究[15]發(fā)現(xiàn)，PNS患兒CXCL16水平上升，對疾病活動有較好的反映作用。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NS活動期患兒血清CXCL16水平比緩解期患兒、正常兒童均明顯升高，提示CXCE16與NS發(fā)病有關(guān)，其機制尚不明確，可能與其對足細胞損傷介導有關(guān)。

本研究對NS活動期血清TGF-β1、CXCL16與24 h尿蛋白定量、血脂、ALB的相關(guān)性進行分析發(fā)現(xiàn)，TGF-β1、CXCL16均與24 h尿蛋白定量、TC、TG、LDL-C呈正相關(guān)，與ALB呈負相關(guān)，提示TGF-β1、CXCL16均參與NS發(fā)病，與NS活動密切相關(guān)，同時TGF-β1、CXCL16與相關(guān)指標的關(guān)系保持一致性，說明二者具有相關(guān)性，共同參與疾病發(fā)生、發(fā)展過程。目前臨床治療PNS以激素干預(yù)為主，但部分患兒對激素不敏感，有研究重點分析激素敏感型NS相關(guān)指標，本研究不足之處為未根據(jù)激素敏感與否分組，有待日后通過大樣本、多中心研究進一步分析。

綜上所述，NS活動期患兒血清TGF-β1、CXCL16水平升高，TGF-β1、CXCL16與血脂相關(guān)指標、24 h尿蛋白定量、ALB均相關(guān)，監(jiān)測血清TGF-β1、CXCL16可用于兒童NS病情活動評估。

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