劉志容，陳 璐，彭順香，吳曉蓉，錢琦琪，張錄順，程 麗

1.成都市第二人民醫(yī)院 普外三科(成都 610017)；2.成都醫(yī)學(xué)院 生物醫(yī)學(xué)系(成都 610500)；3.成都醫(yī)學(xué)院 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院(成都 610500)；4.發(fā)育與再生四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(成都 610500)；5.成都醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院(成都 610500)

精神分裂癥(schizophrenia,SCZ)作為世界上致殘率最高的疾病之一，已經(jīng)成為一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。SCZ是一組原因未明的嚴(yán)重精神疾病，其臨床表現(xiàn)癥狀多樣，常有感覺、思維、情感和行為等多方面障礙。SCZ嚴(yán)重?fù)p害全世界0.5%～1.0%人口的身體健康，在中國成年人中終生患病率約1.0%，但其發(fā)病機(jī)制至今尚不清楚。由于SCZ具有高度的遺傳性，其遺傳機(jī)制越來越受到人們的關(guān)注[1-2]。

晝夜節(jié)律系統(tǒng)對于人類行為和生理節(jié)律的正常調(diào)節(jié)至關(guān)重要。晝夜節(jié)律基因突變可影響正常神經(jīng)生理，與自閉癥和抑郁癥等疾病的病理生理過程密切相關(guān)[3-4]。既往研究[5-7]顯示，晝夜節(jié)律基因RORα多態(tài)性位點(diǎn)(rs782931、rs11639084和rs7172342)與雙相情感障礙及SCZ的消極和精神錯(cuò)亂癥狀相關(guān)。但上述3個(gè)RORα多態(tài)性位點(diǎn)與四川漢族SCZ患者之間的關(guān)系尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。因此，本研究采用臨床病例對照方法，探討RORα多態(tài)性位點(diǎn)與四川漢族人群SCZ發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2015-2016年四川大學(xué)華西醫(yī)院連續(xù)招募的427例四川漢族人群為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：1)根據(jù)《精神疾病診斷與統(tǒng)計(jì)手冊》第四版(DSM-IV)精神分裂癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)2名精神科主任醫(yī)師同時(shí)診斷為精神分裂癥；2)除患SCZ，沒有任何生理疾病或其他精神疾??；3)四川漢族。納入143例SCZ患者作為病例組，284例健康人群作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：1)沒有嚴(yán)重的身體疾病及個(gè)人、家庭精神疾病史；2)四川漢族。

1.2 基因分型

用天根DNA 提取試劑盒從志愿者血樣中提取基因組DNA，通過限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)分析RORαrs782931、rs11639084和rs7172342位點(diǎn)的基因型。引物序列、擴(kuò)增條件和限制酶如表1所示。酶切產(chǎn)物通過非變性聚丙烯酰胺凝膠垂直電泳和硝酸銀染色法對其進(jìn)行肉眼分型。為保證分型結(jié)果的準(zhǔn)確性，隨機(jī)選取10%的樣本進(jìn)行測序驗(yàn)證。

表1 擴(kuò)增引物序列及擴(kuò)增反應(yīng)條件

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。病例組和對照組基因的基因型和等位基因表達(dá)情況采用例數(shù)(%)描述，Hard-Wenborger平衡分析采用2檢驗(yàn)。比值比(OR)和95%置信區(qū)間(CI)來評估特定等位基因或基因型與疾病的相對風(fēng)險(xiǎn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)ɑ除特別說明外均設(shè)定為0.05。

2 結(jié)果

所有納入人群的基因型和等位基因頻率結(jié)果顯示，對照組所有基因型均符合Hard-Wenborger平衡(rs11639084P=0.27; rs7172342P=0.09;rs782931，P=0.19)。等位基因頻率分布在病例組和對照組之間，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表2)。rs11639084 CT基因型明顯增加SCZ的患病風(fēng)險(xiǎn)(CT vs. TT, OR= 3.91, 95% CI: 2.31～6.63,P<0.001)，而rs782931 GG基因型則降低SCZ的患病風(fēng)險(xiǎn)(GG vs.AA, OR= 0.07, 95 % CI: 0.01～0.56,P<0.001)(表3)。rs7172342多態(tài)性在病例組患者與對照組健康人群間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表2，表3)。

表2 兩組rs782931、rs11639084和rs7172342多態(tài)性等位基因頻率的比較[n(%)]

表3 兩組rs782931、rs11639084和rs7172342多態(tài)性基因型頻率的比較[n(%)]

3 討論

維甲酸相關(guān)孤兒受體亞家族包含RORα、RORβ和RORγ，RORα是進(jìn)化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子之一，屬于類固醇激素受體超家族[8]。維甲酸相關(guān)孤兒受體亞家族廣泛分布于機(jī)體的各個(gè)組織,包括腦、睪丸、腎臟、脂肪和肝臟,尤其在丘腦和小腦中表達(dá)量最高[9-10]。

RORα是多種生物進(jìn)程的關(guān)鍵調(diào)控基因，參與各種生理過程，在調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、激素分泌和控制體溫[11]，維持睡眠/覺醒周期、內(nèi)分泌、生理和行為功能等方面起著關(guān)鍵作用[12]。既往研究[12]報(bào)道，作為生物節(jié)律的關(guān)鍵基因之一，RORα多態(tài)性與SCZ、雙相情感障礙、抑郁、癲癇以及自閉癥等疾病的發(fā)病進(jìn)程相關(guān)。Etain等[6]研究結(jié)果顯示，RORαrs782931與BD存在顯著相關(guān)，RORα多態(tài)性影響了攜帶者的生理表型，降低了適應(yīng)外部刺激的能力。Lai等[5]研究發(fā)現(xiàn)，RORαrs11639084和BD之間存在顯著關(guān)聯(lián)，提示RORαrs11639084促進(jìn)BD的發(fā)生。Fanous等[7]分析了2 454例歐洲無癥狀型SCZ患者的心理健康量表評分與RORα多態(tài)性的關(guān)系，結(jié)果表明，RORαrs7172342與SCZ癥狀表型無關(guān)，該結(jié)果與我們在漢族人群中的調(diào)查結(jié)果一致。

綜上所述，本研究表明RORαrs782931和RORαrs11639084多態(tài)性與SCZ發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)存在相關(guān)性，這兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)可能參與了SCZ的發(fā)病進(jìn)程，但該結(jié)果有待在更大樣本量和遺傳/環(huán)境交互分析研究中進(jìn)一步證明。

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