劉蘋蘋，申芳芳，白潔宇，何全中，孫 力，潘 瑩

宮頸癌為全世界范圍內(nèi)女性第二常見的腫瘤，嚴(yán)重影響著女性的身心健康[1-2]。宮頸人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是宮頸癌發(fā)生的必要因素，但只有一小部分HPV感染者最終會發(fā)生宮頸癌，提示宿主的易感性也將影響HPV感染的結(jié)局[3]。宮頸癌作為一種由遺傳因素和環(huán)境因素互相作用而導(dǎo)致的疾病，探索其易感基因有助于了解疾病的病因和高危人群的篩查。目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)為細(xì)胞色素P450 1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)，但還存在較大的爭議。因此本研究搜集目前國內(nèi)外已公開發(fā)表的探討CYP450 1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌易感性的病例對照研究，并對符合納入標(biāo)準(zhǔn)的研究進(jìn)行Meta分析，以期進(jìn)一步了解兩者之間的相關(guān)性，為宮頸癌的病因研究提供一定的證據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1納入和排除標(biāo)準(zhǔn)研究類型：病例—對照研究。研究對象：病例組為組織病理學(xué)診斷為宮頸癌的患者，對照組為健康人群。暴露因素：CYP4501A1基因Ile462Val多態(tài)性。結(jié)局指標(biāo)：宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險。排除標(biāo)準(zhǔn)：①非中、英文文獻(xiàn)；②重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)；③數(shù)據(jù)不全或無法計(jì)算提取的文獻(xiàn)。

1.2文獻(xiàn)檢索策略計(jì)算機(jī)檢索 PubMed、Medline、CNKI及萬方數(shù)據(jù)庫，搜集CYP450 1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌相關(guān)性的病例—對照研究，檢索時限均為建庫至2017年9月。英文檢索詞包括：cytochromeP4501A1、CYP1A1、P4501A1、polymorphism、variant、mutation、cervical carcinoma、cervical cancer、cervix cancer；中文檢索詞包括：細(xì)胞色素P450、基因多態(tài)性、變異、宮頸癌。此外，輔助手動檢索納入研究及近期綜述的參考文獻(xiàn)以補(bǔ)充獲取相關(guān)文獻(xiàn)。

1.3文獻(xiàn)篩選與資料提取及偏倚風(fēng)險評價由2名研究者獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)篩選和資料提取，如遇分歧，則由第三方協(xié)助裁定。按照設(shè)計(jì)好的資料提取表提取資料，提取內(nèi)容如下：第一作者、發(fā)表年份、研究地點(diǎn)、種族、樣本量、基因型的檢測方法、各組基因型分布及對照組哈迪—溫伯格平衡[4](Hardy-Weinberg equilibrium,HWE)情況。然后采用觀察性研究的偏倚風(fēng)險評價工具紐卡斯?fàn)枴滋A量表[5-7](newcastle ottawa scale,NOS)評價納入研究的偏倚風(fēng)險，評價總分為9分，≥5分者即可納入，>6分者為高質(zhì)量研究。

1.4統(tǒng)計(jì)分析采用Stata12.0軟件進(jìn)行Meta分析。效應(yīng)量采用比值比(odds ratio,OR)及其95%可信區(qū)間(confidence interval,CI)。異質(zhì)性檢驗(yàn)采用Q檢驗(yàn)及I2檢驗(yàn)，若P<0.1且I2>50%，表明研究間存在異質(zhì)性，采用隨機(jī)效應(yīng)模型；反之，采用固定效應(yīng)模型。為探討異質(zhì)性的來源，根據(jù)研究種族、NOS評分及是否符合HWE進(jìn)行亞組分析。采用Begg 檢驗(yàn)及 Egger 檢驗(yàn)來檢測發(fā)表偏倚，并運(yùn)用敏感性分析檢測Meta分析結(jié)果的穩(wěn)定性。對照組H-W檢測采用Stata12.0軟件進(jìn)行，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。用分子流行病學(xué)研究方法，采集研究對象血樣，對研究對象CYP1A1基因進(jìn)行檢測，PCR產(chǎn)物經(jīng)特定的酶切后分別產(chǎn)生了3種不同的CYP1A1基因型，包括純合子野生型Ile/Ile、雜合子Ile/Val和純合子突變型Val/Val，鑒于突變純合子ValVal頻率較低，故將它歸入雜合子Ile/Val組，所以把CYP1A1基因型分成了Ile/Ile和Ile/Val+ValVal進(jìn)行比較，以病例組與對照組基因型分布的比值比(OR)為效應(yīng)指標(biāo)，探討CYP1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌易感性之間的關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果初檢出相關(guān)文獻(xiàn)161篇，首先剔除重復(fù)文獻(xiàn)68篇，根據(jù)題目和摘要排除與CYP4501A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌易感性無關(guān)的文獻(xiàn)共81篇，排除綜述類文獻(xiàn)10篇，通過閱讀全文排除對照組對象并非全部是健康人群的文獻(xiàn)共1篇，排除重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)1篇。經(jīng)逐層篩選后，最終納14個病例—對照研究[8-21]，其中8篇[8-15]為英文文獻(xiàn)，6篇[16-21]為中文文獻(xiàn)。其中11篇基因型檢測采用PCR-RFLP法，3篇采用PCR方法。從研究種族來看，有6篇研究高加索人群，8篇研究亞洲人群。

2.2納入研究的基本特征14個病例—對照研究共包括2 223例宮頸癌病例和2 424例健康對照。納入研究基本特征及偏倚風(fēng)險評價結(jié)果見表1。

2.3Meta分析結(jié)果14篇文獻(xiàn)異質(zhì)性檢驗(yàn)，其存在著高度異質(zhì)性，其中χ2=65.43，P=0.000，I2=80.1%，故選擇隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析，其合并效應(yīng)量OR=1.673，95%CI=1.20～2.231，Z檢驗(yàn)結(jié)果顯示z=3.08，P=0.002。說明病例組與對照組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即變異基因型(突變純合子ValVal+雜合子Ile/Val)的個體發(fā)生宮頸癌的危險性，比純合子野生型Ile/Ile基因的個體高1.673倍。

表1 納入研究的基本特征

2.4亞組分析納入的14項(xiàng)研究異質(zhì)性較大，考慮可能因?yàn)檠芯康姆N族不同、納入文獻(xiàn)的質(zhì)量好壞及對照組不符合HWE平衡引起，因此根據(jù)研究種族的不同，以NOS評分>6分和對照組符合HWE平衡進(jìn)行亞組分析。

2.4.1根據(jù)研究種族不同進(jìn)行亞組分析14篇文獻(xiàn)中，其中6篇文獻(xiàn)研究的是高加索人群，8篇文獻(xiàn)研究的是亞洲人群。關(guān)于高加索人群的研究進(jìn)行異質(zhì)性分析，結(jié)果顯示：χ2=17.65，P=0.003，I2=71.7%。因此選擇隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析表明：OR=2.335，95%CI=1.544～3.531，Z檢驗(yàn)結(jié)果顯示z=4.02，P=0.000。說明在高加索人群中，變異基因型(ValVal+Ile/Val)的個體發(fā)生宮頸癌的可能性明顯高于純合子野生型Ile/Ile基因的個體，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。關(guān)于亞洲人群的8項(xiàng)研究進(jìn)行異質(zhì)性分析，結(jié)果顯示：χ2= 29.00，P=0.000，I2=75.9%，因此選擇隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，分析結(jié)果顯示：OR=1.274，95%CI=0.844～1.922，Z檢驗(yàn)結(jié)果顯示：z=1.15，P=0.249，說明了亞洲人群中CYP1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌發(fā)病風(fēng)險卻沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)的相關(guān)性。

2.4.2根據(jù)納入文獻(xiàn)的研究質(zhì)量進(jìn)行亞組分析14篇文獻(xiàn)中，其中9篇文獻(xiàn)NOS評分大于6分，為高質(zhì)量的研究，將高質(zhì)量的研究進(jìn)行異質(zhì)性分析，結(jié)果顯示：χ2=31.76，P=0.000，I2=74.8%。因此選擇隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析：結(jié)果是合并OR=1.946，95%CI=1.360～2.783，Z檢驗(yàn)結(jié)果顯示z=3.64，P=0.000。說明變異基因型(ValVal+Ile/Val)的個體發(fā)生宮頸癌的可能性高于純合子野生型Ile/Ile基因的個體，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.4.3根據(jù)對照組是否符合HWE平衡進(jìn)行亞組分析所納入的文獻(xiàn)中，其中8篇文獻(xiàn)的對照組基因型符合HWE平衡，將對照組符合HWE平衡的研究進(jìn)行異質(zhì)性分析，結(jié)果顯示：χ2= 16.49，P=0.021，I2= 57.6%。因此選擇隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得出結(jié)論：合并OR=1.710，95%CI=1.274～2.295，Z檢驗(yàn)結(jié)果顯示z=3.57，P=0.000。說明變異基因型的個體與純合子野生型Ile/Ile基因的個體相比，變異型是純合子的1.710倍，其發(fā)生宮頸癌的可能性明顯增加1.710倍，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.5發(fā)表偏倚分析對納入的14項(xiàng)研究進(jìn)行漏斗圖分析，漏斗圖基本對稱，說明本研究不存在明顯的發(fā)表偏倚。用Egger試驗(yàn)來評估發(fā)表偏倚(Pr>|z|指標(biāo)為0.945)。

2.6敏感性分析剔除樣本總量中的任一研究，對剩余的文獻(xiàn)研究進(jìn)行Meta分析，得出的結(jié)果與原結(jié)果相近，表明本次Meta分析結(jié)果穩(wěn)定。

3 討論

細(xì)胞色素450(CYP450)是一組結(jié)構(gòu)和功能相關(guān)的超家族基因編碼同工酶。CYP450不僅可以催化眾多內(nèi)源性物質(zhì)( 如脂肪酸、類固醇激素)和外源性物質(zhì)(如藥物、毒物、前致癌物、致畸物質(zhì)) 在體內(nèi)的Ⅰ相代謝反應(yīng)，而且與疾病、腫瘤易感性及機(jī)體耐藥性的產(chǎn)生有密切關(guān)系[22]。研究表明，CYP450基因多態(tài)性與宮頸癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌、食管癌等多種腫瘤的易感性密切相關(guān)[23-24]。目前已知CYP4501A1基因多態(tài)性有4種，Msp、Ile462Val、AA及外顯子Exon7的4 887位點(diǎn)多態(tài)性[25]。其中Ile462Val多態(tài)性又稱為Exon7多態(tài)性，為Exon7的4 889位點(diǎn)多態(tài)性。CYP4501A1第七外顯子血紅素結(jié)合區(qū)A→G氨基酸替換，導(dǎo)致第462位密碼子Ile變?yōu)閂al。近年來，有關(guān)CYP1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌易感性關(guān)系的研究很多，但所得結(jié)果卻不盡一致。研究表明CYP4501A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌易感性無關(guān)。Joseph等[14]研究證實(shí)CYP4501A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌易感性有顯著的相關(guān)性。出現(xiàn)較大差別的原因可能是不同研究設(shè)計(jì)、不同的研究方法等所引起。

本研究通過檢索CYP1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌易感性相關(guān)的文獻(xiàn),共納入國內(nèi)外14篇文獻(xiàn)的研究結(jié)果，2 223例宮頸癌病例和2 424例健康對照。Meta分析結(jié)果顯示，CYP1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌發(fā)病風(fēng)險相關(guān)性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其合并OR=1.673,95%的可信區(qū)間為1.205～2.321,P=0.002；但按照種族分層后，發(fā)現(xiàn)在高加索人群的合并OR為2.335,95%的可信區(qū)間為1.544～3.531,P=0.000；但在亞洲人群的合并OR為1.274,95%的可信區(qū)間為0.844～1.992,P=0.249；說明了高加索人群中變異基因型(ValVal+Ile/Val)的個體發(fā)生宮頸癌的可能性是純合子野生型Ile/Ile基因個體的2.335倍，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但亞洲人群CYP1A1基因Ile462Val多態(tài)性與宮頸癌的關(guān)系不具有顯著的相關(guān)性。推測可能發(fā)生的機(jī)制，宮頸癌的發(fā)生是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，而CYP1A1基因Ile462Val發(fā)生突變后，能催化多環(huán)芳香烴類物質(zhì)活化，形成親電子的致癌分子[26]，從而影響宮頸癌發(fā)病的病理生理進(jìn)程。

本研究得出的結(jié)論與Zhang等[27]通過CYP1A1和宮頸癌相關(guān)性的Meta分析相比，結(jié)論一致，但本研究發(fā)現(xiàn)CYP1A1基因Ile462Val多態(tài)性與高加索人群宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險有明顯的相關(guān)性，卻與亞洲人群的宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險無明顯相關(guān)性，這可能由不同人群的基因型分布、周圍環(huán)境和生活習(xí)慣不同所導(dǎo)致。

本研究可能存在一定的局限性：①本研究納入的文獻(xiàn)均為已發(fā)表的研究，未能將灰色文獻(xiàn)納入，因此可能會存在某些程度的發(fā)表偏倚；②未能考慮環(huán)境—基因或者基因—基因的相關(guān)作用對本研究的影響；③本研究中存在著較為明顯的異質(zhì)性，會一定程度上影響該研究結(jié)果的可靠性。

總之，本研究結(jié)果表明，CYP1A1基因Ile462Val的多態(tài)性增加高加索人群宮頸癌發(fā)病風(fēng)險，但與亞洲人群宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險無明顯相關(guān)性。但該研究受到納入研究數(shù)量及質(zhì)量的限制，結(jié)論還需進(jìn)一步的研究證實(shí)。

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