王維維,周衛(wèi)松
(山東省樂陵市畜牧獸醫(yī)局,樂陵 253600 )
筆者選取臨床發(fā)病的豬血清進行檢驗實驗,以便分析和驗證豬鏈球菌2型和豬流感H1亞型的流行規(guī)律,分別選取對應的抗體檢驗試劑盒來進行抗體的檢測,通過空間層面和時間層面來分析獲得的檢測結果,以便對豬鏈球菌和豬流感病毒的流行感染規(guī)律進行深層次的探究,以便更好的指導豬鏈球菌和豬流感病毒的防治工作。
試劑盒:選取由武漢科前公司所生產(chǎn)的兩種對應的抗體檢測試劑盒。
血清:共選取了來自河北、浙江、湖南、江西、安徽、廣東、湖北、河南等省市自治區(qū)臨床發(fā)病,經(jīng)分離獲得的4659份豬血清,冷凍保存、保存條件為-70℃的冰箱內(nèi)。
在4659份總的豬樣本血清之中,采取隨機選取的方法,選擇了2811份血清通過豬流感病毒ELISA抗體試劑盒進行抗體檢測;采取隨機選取的方法,選擇了4132份血清通過豬鏈球菌2型ELISA抗體試劑盒進行抗體檢測;除此之外,采取隨機選取的方法,選擇了2301份血清同時開展兩種類型的抗體檢測[1]。以上抗體檢測得到的結果均分別從空間層面和時間層面開展了全面而深入的分析工作。
按照說明書的要求嚴格的進行抗體試劑盒的相關操作,其中,豬流感H1亞型的操作步驟如下:首先,將待檢血清予以稀釋,稀釋劑為血清稀釋液,稀釋比例為1:40,完成稀釋后,將待檢血清(100 uL)放進到抗原體背包孔之內(nèi),開展1孔空白對照、2孔陽性對照和2孔陰性對照,然后將血清樣品進行輕微的搖勻,接著放置在37℃環(huán)境下經(jīng)30 min孵育后,將孔內(nèi)溶液進行清除,間隔3 min的時間對反應孔進行清洗[2]。完成后,將100 uL羊抗豬酶標二抗滴入到反應孔之內(nèi),放置在37℃環(huán)境下經(jīng)30 min孵育后,將孔內(nèi)溶液進行清除,將A、B底物液置入到所有反應孔之內(nèi),并搖晃均勻,然后通過10 min避光室溫的環(huán)境下顯色后,滴入1滴終止液,在15 min后對結果進行觀測[3]。判定標準如下:選取酶標儀來對孔OD630值進行測定,若0.25×陽性對照孔平均值≥樣品孔測定值,則為陰性,反之則為陽性。
豬鏈球菌2型的操作步驟與豬流感H1亞型的操作步驟基本相同。判定標準如下:選取酶標儀來對孔OD630值進行測定,若樣品孔測定值<0.35,則為陰性,反之則為陽性。
基于空間層面和時間層面獲得的統(tǒng)計分析結果如下表1、表2。
表1 采樣地區(qū)抗體結果
表2 不同月份抗體結果
基于地域層面的角度可以發(fā)現(xiàn),血清樣本地區(qū)的陽性占比平均為54.72%,其中陽性占比較高的省份有湖南、江西、安徽、湖北和河南。
基于時間層面的角度可以發(fā)現(xiàn),全年陽性占比平均為54.72%,其中陽性占比最高的月份為11月,占比數(shù)值達到70.90%。
基于空間層面和時間層面獲得的統(tǒng)計分析結果見表3、表4。
表3 采樣地區(qū)抗體結果
表4 不同月份抗體結果
基于地域層面的角度可以發(fā)現(xiàn),血清樣本地區(qū)的陽性占比平均為45.11%,其中陽性占比較高的省份有湖南、江西、安徽、湖北。
基于時間層面的角度可以發(fā)現(xiàn),全年陽性占比平均為45.11%,其中陽性占比最高的月份為4月、10月、11月和12月。
針對豬流感病毒的抗體檢測結果的分析,應當全年進行疫苗免疫,并在每年4月、10月、11月和12月開展免疫檢測工作,對于湖南、江西、安徽、湖北等相關省份來說,必須高度關注豬流感病毒的防疫工作。
針對豬流感病毒的抗體檢測結果的分析,應當全年進行疫苗免疫,并在每年9月、10月、11月開展免疫檢測工作,對于湖南、江西、安徽、湖北和河南等相關省份來說,必須高度關注豬流感病毒的防疫工作。
[1] 李天芝,于新友,王金良,等.我國豬流感的流行現(xiàn)狀及分子生物學診斷方法研究進展[J].養(yǎng)豬,2017(2):125-128.
[2] 馮萍,譚明診,陳志海,等.豬鏈球菌2型感染的臨床特征和治療效果分析[J].四川大學學報(醫(yī)學版),2007(9):874-878.
[3] 張安定,金梅林,陳煥春.豬鏈球菌2型研究進展[J].養(yǎng)殖與飼料,2005(10):13-18.