楊尚瑜，雷 嬌，李 雪

(川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 南充 637000)

血液常規(guī)檢查作為臨床檢驗(yàn)的基本項(xiàng)目之一，在臨床疾病的診斷中具有較大的輔助作用[1-2]。一般來(lái)說(shuō)，醫(yī)院上午血常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本量大，上午有門診、住院和體檢的血液常規(guī)標(biāo)本，這些標(biāo)本一般都是集中送至檢驗(yàn)科。為了保證門診和住院患者盡早拿到檢測(cè)報(bào)告，體檢者的血常規(guī)標(biāo)本往往是最后才能完成檢測(cè)。體檢標(biāo)本通常于早上7∶00～8∶00采集，檢測(cè)時(shí)間一般在上午10∶00以后。臨床工作中，在審核體檢者血常規(guī)報(bào)告時(shí)發(fā)現(xiàn)多數(shù)體檢者血常規(guī)結(jié)果中平均血小板體積偏高。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，血小板平均體積在標(biāo)本采集后第0.5小時(shí)或第1小時(shí)后就發(fā)生顯著變化[3-4]，但郭琛峰等認(rèn)為在2 h內(nèi)變化不大[5]，同時(shí)發(fā)現(xiàn)放置時(shí)間對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果其他項(xiàng)的影響報(bào)道[4-5]不一。本文以健康成人靜脈血常規(guī)標(biāo)本室溫下放置時(shí)間為變量觀察血常規(guī)結(jié)果參數(shù)的變化，探討放置時(shí)間對(duì)健康成人血常規(guī)結(jié)果的影響，找出體檢者血液常規(guī)標(biāo)本測(cè)定的最佳時(shí)間，提供更準(zhǔn)確的血常規(guī)報(bào)告。

1 資料與方法

1.1一般資料：隨機(jī)抽取2017年4月～2017年5月到川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院新區(qū)體檢中心體檢的健康成人血液常規(guī)標(biāo)本70例，男33例，女37例，年齡16～65歲。儀器：MindrayBC-6900全自動(dòng)血液分析儀。采血管：美國(guó)Becton Dickinson and Company (BD)公司生產(chǎn)，含EDTA-K2抗凝劑，規(guī)格為3 ml的半透明紫色頭管，生產(chǎn)日期：2016年10月，有效期至2018年1月，批號(hào)為6253701。采血針：美國(guó)BD公司生產(chǎn)，生產(chǎn)日期：2016年10月，有效期：2021年9月，批號(hào)：6278632。試劑情況：試劑均產(chǎn)于中國(guó)邁瑞。其他詳見(jiàn)表1。

表1血液常規(guī)檢測(cè)所需試劑情況表

名稱生產(chǎn)日期有效期批號(hào)M-68FR染色液2017-1-132018-1-122017011301M-68DR稀釋液2017-1-142019-1-132017011408M-68DS稀釋液2017-2-252019-2-242017022502M-68FD染色液2016-8-52017-8-42016080501M-68LD溶血?jiǎng)?017-3-142019-3-132017031410M-68LH溶血?jiǎng)?016-8-162018-8-152016081604M-68LB溶血?jiǎng)?016-12-142018-12-1320160121406

1.2質(zhì)控：血液常規(guī)質(zhì)控品采用Sysmex生產(chǎn)、規(guī)格為4.5 ml的低中水平質(zhì)控品，有效期至2017年6月11日，批號(hào)為70780810。

1.3檢測(cè)方法：在檢測(cè)樣本之前先進(jìn)行血液常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控，在控后室溫下，分別于采血后第20分鐘、第1小時(shí)、第1.5小時(shí)、第2.5小時(shí)和第5小時(shí)等5個(gè)時(shí)間點(diǎn)將標(biāo)本依次放于MindrayBC-6900專用試管架上，然后置于MindrayBC-6900全自動(dòng)血液分析儀的進(jìn)樣區(qū)自動(dòng)進(jìn)行檢測(cè)，并記錄每次檢測(cè)的結(jié)果。

2 結(jié)果

血液常規(guī)檢測(cè)結(jié)果在室溫下放置不同時(shí)間后，各結(jié)果都有不同程度的變化。白細(xì)胞計(jì)數(shù)(White blood cell count,WBC)隨著放置時(shí)間的增加有少許增高的趨勢(shì)。經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)，放置第1小時(shí)、第1.5小時(shí)、第2.5小時(shí)和第5小時(shí)下與采血后第20分鐘檢測(cè)的WBC比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；室溫放置第1小時(shí)與第5小時(shí)結(jié)果比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而中性粒細(xì)胞(Neutrophil，N)計(jì)數(shù)在采血后第1.5小時(shí)、第2.5小時(shí)和第5小時(shí)與第20分鐘值比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

淋巴細(xì)胞(Leukocyte,L)數(shù)絕對(duì)值、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(Red blood cell count，RBC)、血紅蛋白(Hemoglobin,HGB)含量、紅細(xì)胞平均體積(Mean corpuscular volume,MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(Mean corpuscular hemoglobin,MCH)和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(Mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC)在室溫下放置第1小時(shí)、第1.5小時(shí)、第2.5小時(shí)和第5小時(shí)與第20分鐘測(cè)定值相比，經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

血小板計(jì)數(shù)(Platelet count，PLT)隨放置時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸減少。采血后第1.5小時(shí)、第2.5小時(shí)和第5小時(shí)與第20分鐘時(shí)間點(diǎn)測(cè)定結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與采血后第1小時(shí)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血小板平均體積(Mean platelet volume，MPV)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。經(jīng)配對(duì)t檢驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)，采血后第20分鐘MPV與放置第1小時(shí)、第1.5小時(shí)、第2.5小時(shí)和第5小時(shí)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；采血后第1.5小時(shí)、第2.5小時(shí)、第5小時(shí)與第1小時(shí)的MPV結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；采血后第2.5小時(shí)、第5小時(shí)結(jié)果與第1.5小時(shí)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各參數(shù)結(jié)果具體情況見(jiàn)表2。

項(xiàng)目第20分鐘第1小時(shí)第1.5小時(shí)第2.5小時(shí)第5小時(shí)WBC(×109/L)6.42±1.706.48±1.70①6.50±1.70①6.51±1.71①6.53±1.71①②N(×109/L)3.95±1.283.97±1.513.98±1.28①4.0±1.28①4.02±1.28①L(×109/L)1.91±0.571.93±0.581.95±0.581.93±0.581.95±0.58RBC(×1012/L)4.64±0.504.65±0.504.64±0.514.62±0.544.63±0.50HGB (g/L)143.81±16.08143.60±15.85143.63±15.69143.59±15.70143.58±15.70HCT(%)43.72±4.2943.48±4.3043.40±4.2643.40±4.2743.46±4.33MCV(fl)93.85±5.9893.78±5.9993.82±5.9993.82±6.0693.48±7.71MCH(pg)31.05±2.1830.97±2.1831.0±2.1931.0±2.1831.06±2.20MCHC(g/L)330.7±6.84330.11±6.46330.47±6.35330.41±6.45330.07±6.66PLT(×109/L)199.00±46.17199.30±46.18196.27±46.05①②194.80±46.03①②195.63±45.82①②MPV(fl)11.23±1.4811.46±1.50①11.57±1.50①②11.70±1.41①②③11.69±1.43①②③

注：與采血后第20分鐘比較，①P<0.05；與采血后第1小時(shí)比較，②P<0.05；與采血后第1.5小時(shí)比較，③P<0.05

3 討論

血液常規(guī)檢驗(yàn)是對(duì)血液中白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板及其相關(guān)參數(shù)的檢測(cè)與分析，不僅是診斷各種血液病的主要依據(jù)，而且對(duì)其他系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別也可以提供許多重要信息，是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中最常用、最基本的檢驗(yàn)內(nèi)容之一[6]。血液常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性為疾病的診斷、鑒別診斷和療效等提供了有力的保證[7-8]。

通過(guò)本文的研究結(jié)果并分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，WBC在采血后第1小時(shí)稍有增高，但第1小時(shí)、第1.5小時(shí)和第2.5小時(shí)之間變化不大，趨于穩(wěn)定。N在第1.5小時(shí)后開(kāi)始有升高。這與劉偉和趙紅英等學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)室溫下WBC結(jié)果隨放置時(shí)間增加而稍增加[9-10]較一致。這可能是由于所用真空采血管為3 ml管，但一般采血量都不到3 ml，從而引起管內(nèi)壓力增加；而儀器自動(dòng)穿刺進(jìn)樣的吸樣力是一定的，管內(nèi)阻力增加就會(huì)阻礙吸樣力，從而可能會(huì)引起吸樣減少，導(dǎo)致WBC等結(jié)果偏低；而隨著吸樣次數(shù)的增加，在每次開(kāi)始吸樣時(shí)會(huì)有一部分阻力隨著吸樣管道溢出管外，多次吸樣后采血管內(nèi)的壓力逐漸減小，吸樣量會(huì)逐漸增加，從而引起WBC值和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)值逐漸增高。采血量不夠也會(huì)造成抗凝劑過(guò)量，引起管內(nèi)環(huán)境為高滲，時(shí)間久置后也會(huì)引起WBC和N變化。有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)高抗凝劑濃度會(huì)引起WBC的核漿比例變化[11]，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞異淋化和單核化表現(xiàn)。還有可能是儀器混勻效果不好、標(biāo)本量偏少等原因，但具體什么原因還需進(jìn)一步的研究。

RBC、HGB和MPV等參數(shù)在室溫放置5 h都較穩(wěn)定，對(duì)其結(jié)果基本無(wú)影響。這與郭琛峰等學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞在第5小時(shí)后開(kāi)始變化[5]一致。這可能與紅細(xì)胞能進(jìn)行糖酵解產(chǎn)生一定能量，使細(xì)胞維持在正常形態(tài)和大小，從而引起短時(shí)間內(nèi)紅細(xì)胞不被破壞有關(guān)。還有可能是紅細(xì)胞體積稍大，對(duì)于抗凝劑濃度和管內(nèi)壁壓力的影響較小。

PLT在第1.5小時(shí)后開(kāi)始有明顯下降，且隨著時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降。這與胡紅梅等研究的PLT隨放置時(shí)間延長(zhǎng)持續(xù)下降[12]一致。由于血小板在離體后易發(fā)生聚集和黏附，參與止凝血，管內(nèi)雖有抗凝劑，但也可能發(fā)生微小的凝血反應(yīng)，導(dǎo)致PLT因被使用或者破壞而減少。筆者使用的EDTA鉀鹽抗凝，當(dāng)濃度過(guò)高時(shí)，可導(dǎo)致血小板聚集的作用[13-14]，從而也會(huì)引起血小板計(jì)數(shù)下降。有研究發(fā)現(xiàn)血液常規(guī)標(biāo)本放置越久，其PLT越容易聚集，導(dǎo)致PLT計(jì)數(shù)偏低[15]。MPV是幾個(gè)指標(biāo)中變化最明顯的，隨著放置時(shí)間的延長(zhǎng)，呈增大趨勢(shì)。這主要是由于EDTA鉀鹽抗凝劑的作用，當(dāng)采血量不足時(shí)，會(huì)使抗凝管內(nèi)離體的血處于高滲液中，導(dǎo)致血細(xì)胞內(nèi)滲透壓低于細(xì)胞外，水分子等進(jìn)入PLT內(nèi)，引起體積增大，從而導(dǎo)致MPV增加[16]。

因此，在臨床工作中，為確保血液常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，更好地為臨床患者服務(wù)，血常規(guī)標(biāo)本最好在采血后1 h內(nèi)完成檢測(cè)；對(duì)不能及時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本則盡量要冷藏保存，但保存時(shí)間也不宜過(guò)長(zhǎng)。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 于廣亞.影響血常規(guī)標(biāo)本檢測(cè)相關(guān)因素臨床研究[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2011，28(14):8.

[2] 楊 軍.妊娠期貧血患者全血細(xì)胞分析的應(yīng)用價(jià)值[J].吉林醫(yī)學(xué)，2017,38(10):1844.

[3] 張開(kāi)民，賈明合，汪從祥.乙二胺四乙酸二鉀對(duì)血常規(guī)分析中各測(cè)量參數(shù)的影響[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012,9(23):2928.

[4] 張 丹.抗凝靜脈血標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)血細(xì)胞分析結(jié)果的影響.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012,9(4)：477.

[5] 郭琛峰.靜脈血樣品放置時(shí)間對(duì)血細(xì)胞分析結(jié)果的影響[J].上海醫(yī)藥，2016,37(18)：32.

[6] 李艷冬.血液標(biāo)本靜置時(shí)間對(duì)血常規(guī)結(jié)果影響分析[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)志,2016,48(7):856.

[7] 林幼萍.膿毒癥患者血小板參數(shù)檢測(cè)的臨床意義[D]. 廣州：南方醫(yī)科大學(xué)，2013.

[8] 劉 靜.血常規(guī)、生化以及腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)在結(jié)直腸癌患者篩查中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2016,26(22)：3278.

[9] 劉 偉.標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)血常規(guī)測(cè)定中的白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板和血色素的影響[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2015,10(10):274.

[10] 趙紅英.靜脈血標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)血常規(guī)檢查結(jié)果的影響[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013,10(12)：1580.

[11] 梁委軍，曾張琴,董家書.EDTA-K2濃度對(duì)全血細(xì)胞分析的影響[J].中國(guó)醫(yī)療設(shè)備，2010,25(9)：87.

[12] 胡紅梅，張晉敏和陳淑紅.標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)全血細(xì)胞各參數(shù)的影響[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，(8)：903.

[13] 甘 強(qiáng),李 娜,張 華,等.EDTA依賴性血小板減少6例分析及糾正[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017，38(13)：1870.

[14] 崔俊林,曹 娟.乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少的分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016,37(1)：105.

[15] 施紫薇，黃 婷，胡錫林.MindrayBC-6800全自動(dòng)血液分析儀低值血小板臨床性能評(píng)價(jià)[J].中國(guó)醫(yī)療裝備，2017,14(2)：23.

[16] 徐云俠,王銀娥，汪文英,等.真空管采血量不足對(duì)血液分析儀分析結(jié)果的影響[J].中華全科醫(yī)學(xué)，2009,7(3)：322.