高海濤 穆俊晌 張璞 王欣 趙京 張勛

[摘要] 目的 就羅格利酮針對糖尿病大鼠內(nèi)耳組織血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）及細胞間粘附分子—1（ICAM-1）水平的影響情況加以分析。方法 該次研究共計納入糖尿病大鼠50只（按照相同方式進行動物模型建立），由該院在2016年2月—2017年6月自行培養(yǎng)，任意選取組內(nèi)25只大鼠，給予羅格列酮處理，即觀察組。余下25只大鼠則未采取其他藥物處理。采集兩組大鼠內(nèi)耳組織樣本，針對其VEGF以及ICAM-1水平比較。 結果 在未處理前，兩組大鼠在VEGF以及ICAM-1水平，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；而在使用羅格列酮處理后，觀察組大鼠VEGF水平為（4.52±1.02）μg/L，對照組為（7.43±1.32）μg/L，差異有統(tǒng)計學意義（t=12.937，P=0.000）；在ICAM-1水平上，觀察組為（1.34±0.24）μg/L，對照組則為（2.56±0.31）μg/L，差異有統(tǒng)計學意義（t=9.927，P=0.000）。 結論 羅格列酮可有效針對糖尿病大鼠體內(nèi)VEGF以及ICAM水平進行控制，進而達到對糖尿病所導致內(nèi)耳微血管病變治療的效果。

[關鍵詞] 羅格列酮；糖尿病；VEGF；ICAM-1

[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）03（a）-0017-03

Observation of the Effect of Rosiglitazone on the Expression of VEGF and ICAM-1 in the Inner Ear of Diabetic Rats

GAO Hai-tao， MU Jun-shang， ZHANG Pu， WANG Xin， ZHAO Jing， ZHANG Xun

Third Hospital of Hebei Medical University， Shijiazhuang， Hebei Province， 050051 China

[Abstract] Objective The effects of rosiglitazone on the levels of vascular endothelial growth factor （VEGF） and intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1） in the inner ear tissues of diabetic rats were analyzed. Methods A total of 50 diabetic rats （according to the same animal model） were set up in this study from February 2016 to June 2017， and 25 rats were selected and treated with rosiglitazone as the observation group. The remaining 25 rats were not treated with other drugs. Samples of the inner ear tissue of two groups of rats were collected and compared to their VEGF and ICAM-1 levels. Results In the untreated group， two rats in the VEGF and ICAM-1 level had no significant differences（P>0.05）；and in the use of rosiglitazone treatment， the level of VEGF group rats （4.52±1.02）μg/L， the control group （7.43±1.32）μg/L，the difference was statistically significant（t=12.937，P=0.000）。In ICAM-1 on the level of the observation group was （1.34±0.24）μg/L， the control group was （2.56±0.31）μg/L，the difference was statistically significant（t=9.927，P=0.000）. Conclusion Rosiglitazone can effectively control the level of VEGF and ICAM in diabetic rats， so as to achieve the effect of diabetic microangiopathy.

[Key words] Rosiglitazone； Diabetes； VEGF； ICAM-1

糖尿病屬于我國主要慢性疾病，且在居民不良生活習慣以及飲食方式等方面因素的作用下，糖尿病的發(fā)生率更以極快的速度在增加。目前，臨床尚缺乏對于該癥的根治對策，需要長時間借助藥物針對血糖水平加以控制[1-2]。其中內(nèi)耳血管病變最為常見，而該并發(fā)癥誘發(fā)機制臨床尚未形成統(tǒng)一定論。借助羅格列酮針對該癥進行治療已逐步在臨床得到推廣[3-4]。該次研究以2016年2月—2017年6月自行培養(yǎng)50只大鼠，針對該藥在改善內(nèi)耳組織VEGF及ICAM-1表達水平方面的作用加以分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該次研究共計納入糖尿病大鼠50只，任意選取組內(nèi)25只大鼠，給予羅格列酮處理，即觀察組。余下25只大鼠則未采取其他藥物處理。采集兩組大鼠內(nèi)耳組織樣本，針對其VEGF以及ICAM-1水平加以比較。從兩組大鼠構成情況來看，對照組月齡為2～4個月，中間值為（2.43±1.02）個月，體重在176～223 g，中間值為（192.83±1.98）g。觀察組月齡為2～3個月，中間值為（2.76±10.67）個月，體重在179～228 g，中間值為（191.67±1.98）g。以上基本數(shù)據(jù)對比可知一般資料差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

1.2 方法

動物模型制備，在飼養(yǎng)過程中，需要借助高糖飼料進行飼養(yǎng)，同時進行鏈尿佐菌素滴注，使用劑量控制在60 mg/kg，促使本組大鼠成為糖尿病大鼠。進行該次研究時，采集兩組大鼠血液進行測定可知，兩組大鼠空腹血糖濃度均在16.6 mmol/l以上。隨后，對照組大鼠按照常規(guī)方式繼續(xù)進行喂養(yǎng)。而觀察組則需要使用羅格列酮（國藥準字H20061297），使用劑量為2 mg/kg，喂養(yǎng)3次/d。持續(xù)進行14 d喂養(yǎng)后，對兩組大鼠雙側顳骨進行獲取。隨后，在咬骨鉗的作用下，將顳骨多余骨質(zhì)進行去除。并借助乙二胺四乙酸二鈉進行脫鈣處理。大約10 d后，按照免疫組化常規(guī)流程針對內(nèi)耳組織樣本進行制定。借由90%乙醇進行約2 h浸泡，然后借助對應模具順著耳蝸軸水平的位置進行包埋。在顯微鏡的作用下進行切片，厚度控制在6 mm左右，并用30%酒精展開漂洗，將其放置在溫水中展開，附著在涂抹有聚萘氨酸玻片上。待12 h后，將切片借助PBS進行沖洗。待上述操作完成后，借助常規(guī)DAB顯色試劑盒對切片進行染色，染色6 min左右，進行沖洗。最后，借助蘇木素進行復染，達到對細胞核進行染色的效果，依次進行脫水、透明以及封片操作。隨后借助高倍顯微鏡，針對兩組切片中VEGF、ICAM-1水平進行測定。該次切片觀察工作由該院具備多年臨床經(jīng)驗醫(yī)師2名共同進行，以保障該計數(shù)結果的準確性。

1.3 觀察指標

在該次研究中側重需要對兩組大鼠內(nèi)耳組織切片VEGF、ICAM-1水平展開統(tǒng)計[5]。

1.4 統(tǒng)計方法

該次研究過程中，涉及兩組大鼠各方面數(shù)據(jù)都采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件展開統(tǒng)計，以均值±標準差（x±s）的形式對計量資料加以表示，行t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

結合檢測結果可以發(fā)現(xiàn)，在使用羅格列酮前，觀察組大鼠VEGF水平、ICAM-1水平上與對照組差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。在使用羅格列酮后，觀察組大鼠VEGF水平為（4.52±1.02）μg/L，對照組為（7.43±1.32）μg/L；在ICAM-1水平上，觀察組為（1.34±0.24）μg/L，對照組則為（2.56±0.31）μg/L（P<0.05），見表1。

3 討論

在多中因素的共同作用下，糖尿病于國內(nèi)的發(fā)生率正以極快的速度在增加，現(xiàn)已發(fā)展成為威脅國內(nèi)中老年群體健康的主要病癥。臨床尚無針對該癥的特效治療對策，在病癥持續(xù)發(fā)展下，將誘發(fā)患者出現(xiàn)其他方面并發(fā)癥，其中以聽力受損發(fā)生率居高[6-7]。

在臨床研究持續(xù)推進的情況下，糖尿病慢性多臟器并發(fā)癥主要誘發(fā)因素已逐漸被探明，即神經(jīng)病變、微血管病變。在微血管病變的作用下，將直接對患者毛細血管基底厚度進行影響，促使其出現(xiàn)異常增厚的情況[8]。早在黃輝[9]研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，毛細血管基底層厚同樣會出現(xiàn)在內(nèi)耳中。在基底膜異常增厚的情況下，自然會影響到內(nèi)耳血液供應，出現(xiàn)血流不暢癥狀，促使營養(yǎng)物質(zhì)無法充分運輸?shù)絻?nèi)耳神經(jīng)組織中，導致患者內(nèi)耳細胞處于缺氧狀態(tài)，最終影響到內(nèi)耳功能，臨床表現(xiàn)為聽力下降。

血管內(nèi)皮細胞生長因子，在本質(zhì)上為二聚體糖蛋白，其功能主要表現(xiàn)在加快血管生成速度、針對血管通透能力進行改善的層面。具體來講其生物功能側重體現(xiàn)在以下幾方面：①提升葡萄糖在內(nèi)皮細胞中的轉(zhuǎn)運效率。在高水平VEGF水平的作用下，葡萄糖運載體經(jīng)由細胞質(zhì)進入到細胞膜中，促使細胞膜內(nèi)葡萄糖水平異常上升，進而導致患者出現(xiàn)各種糖尿病并發(fā)癥。②使得白細胞異常激活，促使其異常釋放大量的活性物質(zhì)，導致患者出現(xiàn)局部出血的情況，并誘發(fā)新生血管的形成。③促使血管通透性異常增加，導致血漿蛋白出現(xiàn)外滲。在健康狀態(tài)下，ICAM-1處于水平較低狀態(tài)，而在炎性介質(zhì)等因素的作用下，將促使其異常表達，并促使其參與到血管內(nèi)皮細胞以及白細胞的滲出等過程中，促使炎癥進一步發(fā)展。早在趙凱亮等[10]研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，ICAM-1以及VEGF水平與糖尿病內(nèi)耳微血管病變存在有一定聯(lián)系。

結合臨床治療可知，借助羅格列酮針對糖尿病內(nèi)耳微血管病變患者展開治療已在臨床得到普及。在藥物本質(zhì)上，羅格列酮需歸屬到噻唑烷二酮的范圍中。在該藥的作用下，可直接對細胞內(nèi)部與糖代謝有關的蛋白質(zhì)表達情況進行影響，進而達到加速葡萄糖轉(zhuǎn)向細胞內(nèi)部的速度，進而達到增加患者胰島素敏感性的作用，最終達到對患者體內(nèi)血糖水平控制的效果。在羅格列酮的作用下，可針對糖尿病患者ICAM-1表達情況進行抑制的效果，更能達到對單核巨噬細胞誘發(fā)動脈粥樣硬化斑塊的速度。當前，針對羅格列酮降低糖尿病患者體內(nèi)ICAM-1水平的機制尚未有統(tǒng)一定論。

在該次研究中，該院就以50只糖尿病大鼠為主要對象，針對羅格列酮在糖尿病大鼠內(nèi)耳組織中ICAM-1以及VEGF水平表達中的影響情況展開分析。在使用羅格列酮處理后，觀察組大鼠VEGF水平為（4.52±1.02）μg/L，對照組為（7.43±1.32）μg/L，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；在ICAM-1水平上，觀察組為（1.34±0.24）μg/L，對照組則為（2.56±0.31）μg/L，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結合統(tǒng)計可以發(fā)現(xiàn)，在羅格列酮的作用下，可有效減少糖尿病大鼠內(nèi)耳組織細胞中ICAM-1以及VEGF表達水平，能達到對內(nèi)耳細胞血液循環(huán)情況進行有效改善。早在李素艷等[11]研究中同樣指出，在羅格列酮的作用下，可將糖尿病患者體內(nèi)VEGF水平降低10%左右，與該次研究基本相符?？蓪⒃撍庍\用于對糖尿病內(nèi)耳微血管病變患者的治療過程中，針對其內(nèi)耳血液循環(huán)情況進行有效改善，實現(xiàn)對患者聽力的有效改善，間接起到促進該部分患者快速恢復，提升其生活質(zhì)量的效果。

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（收稿日期：2017-12-02）