李純

摘 要：目的：通過(guò)高效液相色譜法對(duì)片狀雙黃連藥品的多組分質(zhì)量加以分析，并研究其多組分的含量。方法：應(yīng)用新型梯度洗脫技術(shù)對(duì)片劑狀的雙黃連內(nèi)部含有的多種化學(xué)成分進(jìn)行測(cè)定，在檢測(cè)時(shí)選用的波長(zhǎng)為280nm。結(jié)果：在固定的色譜測(cè)定條件下，對(duì)雙黃連藥品中含有的咖啡酸、綠原酸、連翹苷、瀘定、黃岑素以及黃岑苷進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)論：本次應(yīng)用的雙黃連片質(zhì)量測(cè)定方法較簡(jiǎn)單，但其測(cè)定結(jié)果精準(zhǔn)，方法可行，可以被推廣到雙黃連藥品檢測(cè)工作中。

關(guān)鍵詞：雙黃連片；多組分質(zhì)量；檢測(cè)技術(shù)

雙黃連藥品在我國(guó)的藥品市場(chǎng)中比較常見(jiàn)，屬于常用藥品，其不僅僅可以被制成口服液以及片劑，使患者直接口服，還能是患者通過(guò)注射這種方式接受這種藥品，其經(jīng)常會(huì)被應(yīng)用到治療感冒過(guò)程中，能夠幫助患者消除咽喉腫痛、咳嗽以及發(fā)熱帶來(lái)的痛苦，其主治的感冒類型為外感風(fēng)熱型的感冒，同時(shí)也能夠起到較好的解毒清熱效果。該藥品中含有連翹、黃岑以及金銀花，這幾種成分都能夠使藥品起到清熱解毒以及疏風(fēng)解表的治療效果，在經(jīng)過(guò)體外實(shí)驗(yàn)之后可以了解到該藥品還具有抗病毒以及抑菌的效果。其內(nèi)含成分比較復(fù)雜，不同的成分具有的應(yīng)用效果也不同，因此可知該藥品的成分質(zhì)量的重要性，如果質(zhì)量檢測(cè)方法不合理，成分測(cè)定就會(huì)存在偏差，本文選用梯度洗脫技術(shù)，對(duì)片劑狀態(tài)的藥品進(jìn)開(kāi)展質(zhì)量檢測(cè)，對(duì)其關(guān)鍵成分進(jìn)行測(cè)定，現(xiàn)有檢測(cè)過(guò)程如下：

1 材料和方法

1.1 一般材料

儀器：32色譜工作站，超聲清洗機(jī)，漩渦混合器，離心沉淀機(jī)。

試劑：乙腈、甲醇（HPLC級(jí)），乙酸、乙醇為分析純。

樣品：雙黃連片劑，缺金銀花、黃芩、連翹的雙黃連片劑。對(duì)照品：咖啡酸、黃芩素；綠原酸、蘆丁、黃芩苷、連翹苷購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.2 方法

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：分別精密稱取對(duì)照品置量瓶中，以甲醇為溶劑，配制成單組分標(biāo)準(zhǔn)品溶液，而后配制混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，其中含綠原酸0.2mg·mL-1、咖啡酸0.1mg·mL-1、蘆丁0.05mg·mL-1、連翹苷0.02mg·mL-1、黃芩苷1.3mg·mL-1、黃芩素0.1mg·mL-1。

供試液的制備：取片劑10片，除去薄膜包衣，研細(xì)。精密稱取100mg，置離心管中，加溶劑甲醇-水（1：1）4mL超聲15min，離心后取上清液，殘?jiān)僦貜?fù)操作一次，合并兩次上清液于10mL量瓶中，定容至10mL。

2 結(jié)果

用甲醇-乙酸溶液及乙腈-乙酸溶液兩種溶劑系統(tǒng)，通過(guò)不同的流動(dòng)相配比，對(duì)混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行HPLC等度分析，根據(jù)混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液中6個(gè)組分的保留時(shí)間和系統(tǒng)的死時(shí)間分別計(jì)算出容量因子k'，并作出相應(yīng)的圖像及關(guān)系圖，見(jiàn)圖1。由圖1可知，在任一個(gè)等度分析中，或是兩個(gè)組分的k'相同，或是k'值相差很大。結(jié)果表明很難用等度一次完成6個(gè)組分的快速分離分析，其中甲醇-乙酸溶液系統(tǒng)情況更差。

取混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液分別進(jìn)樣，按確定的色譜條件進(jìn)樣，記錄峰面積與進(jìn)樣量，計(jì)算回歸方程，結(jié)果見(jiàn)表1。

取同一批號(hào)雙黃連片劑10片，除去薄膜包衣，研細(xì)，精密稱取5份，每份100mg，按供試液的制備方法處理，進(jìn)行HPLC分析，結(jié)果表明6種所測(cè)成分的RSD均小于2%。

3 討論

在對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行限定時(shí)，為了給藥品測(cè)定工作創(chuàng)造最優(yōu)的測(cè)定條件，對(duì)多種溶劑測(cè)定藥品進(jìn)行了篩選，對(duì)甲醇與水之間的比例進(jìn)行了調(diào)整，最后發(fā)現(xiàn)水與甲醇的配置比例為1：1時(shí)，提取工作相對(duì)比較安全。在用提取方法時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員選用的方法為熱回流提取法，這種方法比較適合提取雙黃連藥品的關(guān)鍵成分，將在不同時(shí)間中開(kāi)設(shè)的超聲提取法與這種方法進(jìn)行對(duì)比之后確定熱回流活動(dòng)在3h時(shí)與兩次超聲振蕩提取活動(dòng)獲取的實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較接近，一次超聲振蕩工作需要15min，兩種提取方法均可以達(dá)到完全提取的目的，因此實(shí)驗(yàn)選用了合適的溶劑開(kāi)展了兩次提取活動(dòng)。

本次藥品質(zhì)量研究實(shí)驗(yàn)除了測(cè)定藥品的不同成分具有的質(zhì)量之外，還對(duì)分離藥品組分的效果進(jìn)行了測(cè)定，主要對(duì)影響分離效果的元素展開(kāi)了分析，酸度不同時(shí)，分離情況也有所不同，對(duì)比不含酸的流動(dòng)相與含有酸的流動(dòng)相之后，發(fā)現(xiàn)兩種流動(dòng)相的分離差異極為明顯，但是乙酸含有數(shù)值對(duì)于流動(dòng)相不會(huì)給成分分離工作帶去過(guò)多的影響，但是完全不含有乙酸成分的流動(dòng)相的洗脫需求卻無(wú)法被有效滿足。

在考察流速對(duì)分離成分是否有影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，流速并不會(huì)直接影響到最終的藥品分離效果，但是影響組分的出峰時(shí)間。

雙黃連作為一種復(fù)方型的重要制劑，具有成分復(fù)雜的主要特點(diǎn)，其成分之間存在著極性差距，如果僅僅只應(yīng)用等度洗脫方法是難以使其各種成分均獲得有效分析，甚至無(wú)法滿足分離的基本需求，因此本文對(duì)常用的雙黃連藥品的成分分離工作進(jìn)行了分析，并在常用分離方法的基礎(chǔ)上添加了全新的梯度設(shè)計(jì)內(nèi)容，將預(yù)試環(huán)節(jié)消耗的分離時(shí)間減少，可以通過(guò)一次進(jìn)樣就將雙黃連藥品中的6種組份有效分析，不需要過(guò)多繁瑣的操作，對(duì)該種質(zhì)量檢測(cè)方式進(jìn)行進(jìn)一步改進(jìn)之后，還能將其推廣到其他復(fù)方型中藥質(zhì)量檢測(cè)工作之中。

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