◎ 郭航宏，王雪丹，張念潔，陶曉杰

（延邊朝鮮族自治州產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)所，吉林 延吉 133000）

黑參是指將鮮人參通過(guò)蒸汽或其他方法蒸熟后晾干，呈淡黑褐色或黑茶褐色的人參。黑參以其有稀有皂甙含量高而聞名，然而黑參特殊的制作工藝[1]使得苯并芘的檢測(cè)成為檢測(cè)人參中非常必要的一個(gè)指標(biāo)。苯并芘[2]（Benzopyrene）是苯與芘稠合而成的一類(lèi)多環(huán)芳烴。最常見(jiàn)的苯并芘是苯并[a]芘。它是一種致癌物質(zhì)和突變?cè)?。目前，?guó)內(nèi)外對(duì)苯并[a]芘含量測(cè)定方法報(bào)道熒光分析法、氣質(zhì)聯(lián)用、高效液相法[3]、液質(zhì)聯(lián)用儀、酶聯(lián)免疫吸附法等。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

日本島津LC-10AT型高效液相色譜儀；SPD-10AD紫外可見(jiàn)檢測(cè)器；SIL-10AD自動(dòng)進(jìn)樣器；SCL-10A系統(tǒng)監(jiān)控器；乙腈（色譜純）；水（一級(jí)去離子水）；標(biāo)準(zhǔn)溶液：乙腈配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液（1 mg/mL）；乙腈稀釋相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。對(duì)照品：苯并[a]芘（＞99%），天津一方科技有限公司提供；苯并[a]芘專(zhuān)用凈化柱（維泰克科技公司）。

1.2 色譜分析條件

液相色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)色譜柱為Diamonsil C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動(dòng)相為乙腈∶水（80∶20），流速為1.0 mL/min，熒光檢測(cè)激發(fā)波長(zhǎng)為384 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為406 nm。色譜圖如圖1所示。

圖1 色譜圖

1.3 對(duì)照品的制備

精密移取苯并[a]芘對(duì)照品，置于10 mL量瓶中，用乙腈溶解稀釋至刻度，搖勻，得苯并[a]芘對(duì)照品溶液作為儲(chǔ)備液。

1.4 樣品的前處理

精密稱(chēng)取黑參1 g，加入5 mL正己烷，超聲提取離心5 min，轉(zhuǎn)移出上清液。正己烷重復(fù)提取一次。合并上清液，過(guò)柱子凈化，濃縮至近干，加入乙腈定容。過(guò)0.45 μL濾膜，進(jìn)樣。供液相色譜測(cè)定用。

2 結(jié)果與討論

2.1 線(xiàn)性方程、方法檢測(cè)限和精密度

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：精密吸取苯并[a]芘對(duì)照品2.0、4.0、6.0、8.0 mL。分別置10 mL量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，分別吸取20 μL，注入液相色譜儀，按照1.2項(xiàng)下的方法測(cè)定，取其中一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)測(cè)定6次，以峰面積與質(zhì)量濃度進(jìn)行一元線(xiàn)性回歸分析，計(jì)算峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，進(jìn)行線(xiàn)性關(guān)系、線(xiàn)性范圍、檢測(cè)限和精密度的測(cè)定。苯并[a]芘在較寬的濃度范圍內(nèi)均具有良好地線(xiàn)性、相關(guān)系數(shù)都大于0.999，精密度較好，Y=150 2.5X，最低檢測(cè)限0.01 μg/kg，最低檢出限以信噪比為3：1計(jì)算峰面積RSD為1.10%。

2.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

樣品溶液，按照1.2項(xiàng)下的方法在0、2、4、8、16和24 h分別進(jìn)樣20 μL，測(cè)定峰面積，結(jié)果表明樣品溶液在24 h內(nèi)保持穩(wěn)定。RSD為1.85%。

2.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取同一批樣品6份，按1.2項(xiàng)方法測(cè)定峰面積，RSD為1.12%。

2.4 加樣回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱(chēng)取人參樣品1 g，分別加入一定量的（3個(gè)梯度濃度）苯并[a]芘混合對(duì)照品溶液，按1.4的制備方法及1.2項(xiàng)條件方法進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)樣分析，每個(gè)平行6次平行測(cè)定，平均回收率94.59%。

2.5 樣品的含量測(cè)定

取樣品按照1.2項(xiàng)下的方法測(cè)定6種樣品，每個(gè)平行3次平行測(cè)定，樣品含量分別為0.240、0.238、0.236、0.232、0.244μg/kg和0.242 μg/kg，RSD為1.87%。

3 結(jié)論

苯并[a]芘是在黑參蒸制和干燥的過(guò)程中的產(chǎn)物，所以檢測(cè)苯并[a]芘是衡量黑參品質(zhì)的一個(gè)至關(guān)重要的檢查指標(biāo)。此方法前處理簡(jiǎn)單，易提取，為以后的黑參及黑參相關(guān)產(chǎn)品制定標(biāo)準(zhǔn)具有一定的參考價(jià)值。

[1]趙天琦，趙 巖，郜玉鋼，等.黑參的研究進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥，2016，18（1）：123-125.

[2]馮亞凈.食品中苯并芘的來(lái)源及減控方法的研究[J].糧食與油脂，2017，30（2）：72-75.

[3]曾露露.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定黑參中4種稀有人參皂苷的含量[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2017，52（12）：1069-1072.