王玉梅，王幼明，王曉亮，馬 龍，尹 才，張成蓮，李莉娟，張學(xué)軍，周海寧，李 杰，沙湧波

（1. 寧夏回族自治區(qū)動物疾病預(yù)防控制中心，寧夏銀川 750011；2. 中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032）

口蹄疫（Foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是一種危害哺乳動物的高度接觸性傳染病，由口蹄疫病毒（FMDV）引起，對偶蹄動物具有嚴(yán)重的潛在經(jīng)濟危害。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報告動物疫病，我國認(rèn)定其為一類動物傳染病[1]。典型FMD病例的特征是在蹄部、口腔黏膜部位，以及雌性動物乳房上出現(xiàn)水泡[2]。

2018年1月17日，寧夏農(nóng)牧廳獸醫(yī)局接到來自銀川市興慶區(qū)養(yǎng)殖戶羅某某報告，稱其飼養(yǎng)的6頭牛出現(xiàn)不同程度的精神沉郁，以及流涎、口腔水泡、蹄殼松動等癥狀，懷疑為FMD。為了解病例的具體情況，確診疫情，確定疫情可能擴散的范圍，分析可能的風(fēng)險因素，以便及時提出有效的控制措施，寧夏動物疾病預(yù)防控制中心組建工作組，赴現(xiàn)場開展了調(diào)查工作。

1 方法

1.1 病例定義

1.1.1 疑似病例 自2017年12月21日至本次暴發(fā)調(diào)查結(jié)束，在寧夏銀川市興慶區(qū)月牙湖鄉(xiāng)小塘村出現(xiàn)以下癥狀之一的牛羊：（1）精神沉郁，呆立流涎或跛行；（2）唇部、舌面、齒齦、鼻鏡、蹄踵、蹄叉、乳房等部位出現(xiàn)水泡；（3）水泡破潰，結(jié)痂，或者蹄殼松動脫落；（4）突然死亡。

1.1.2 確診病例 實驗室病原學(xué)檢測為陽性的疑似病例。

1.2 調(diào)查方式

1.2.1 問卷調(diào)查與訪談 通過問卷調(diào)查和訪談，了解當(dāng)?shù)嘏Ｑ虻酿B(yǎng)殖情況，發(fā)病養(yǎng)殖戶的地理分布、周邊環(huán)境、養(yǎng)殖模式、生產(chǎn)和免疫狀況，以及疫病發(fā)生經(jīng)過，現(xiàn)場觀察發(fā)病牛的臨床癥狀，并對小塘村所有養(yǎng)殖戶養(yǎng)殖的牛羊進(jìn)行病例搜索排查（圖1）。

圖1 現(xiàn)場調(diào)查

1.2.2 實驗室檢測 對病原樣品，采用蘇州天隆科技有限公司生產(chǎn)的核酸提取試劑盒（批號E0117120181）和北京世紀(jì)元亨有限公司生產(chǎn)的口蹄疫病毒通用型實時熒光RT-PCR檢測試劑盒（批號FMD20170614P）進(jìn)行熒光RT-PCR病原學(xué)檢測；對血清樣品，用中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的口蹄疫液相阻斷ELISA試劑盒（批號O型20171011101-7，A型20170906103-4，亞Ⅰ型20171013102-1）分別進(jìn)行O、A、亞Ⅰ型抗體ELISA檢測。

1.2.2.1 病原學(xué)檢測 現(xiàn)場采集疑似發(fā)病牛血樣9份、水皰皮3份、O-P液5份進(jìn)行FMD病原學(xué)檢測（圖2）。

圖2 現(xiàn)場采樣

1.2.2.2 血清學(xué)檢測 對疫區(qū)和受威脅區(qū)進(jìn)行FMD免疫抗體緊急檢測。群體大小為牛1 598頭、羊3 072只。根據(jù)簡單隨機抽樣原則，按95%的置信水平，50%的預(yù)估流行率，5%的可接受誤差，計算抽樣檢測數(shù)量。采集牛血樣品386份，涉及75個養(yǎng)殖場（戶）；采集羊血樣品340份，涉及69個養(yǎng)殖場（戶）。

1.3 數(shù)據(jù)來源與分析

通過現(xiàn)場問卷調(diào)查與實驗室檢測，對疫病進(jìn)行時間、空間和群間分布描述，探討可能存在的風(fēng)險因素。應(yīng)用Excel與Epi infoTM7，對收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 疫點概況

疫點位于銀川市興慶區(qū)月牙湖鄉(xiāng)小塘村。月牙湖鄉(xiāng)是銀川市較大的一個生態(tài)移民安置區(qū)，現(xiàn)轄12個行政村。小塘村毗鄰大塘北村、大塘南村和塘南村（圖3）。截止到2017年10月，4個村共存欄牛1 598頭、羊3 072只。小塘村是一個回民移民村，現(xiàn)有5個隊，養(yǎng)殖牛272頭、羊572只。

圖3 銀川市興慶區(qū)月牙湖鄉(xiāng)行政村布局

首個報告病例的養(yǎng)殖戶羅某某屬于小塘村3隊，2008年開始養(yǎng)羊，2014年開始養(yǎng)牛，目前共養(yǎng)羊9只、牛6頭。飼養(yǎng)方式為連續(xù)飼養(yǎng)。畜舍簡易，衛(wèi)生狀況較差，無相應(yīng)防疫和生物安全設(shè)施（圖4）。

圖4 養(yǎng)殖戶羅某某的牛羊養(yǎng)殖舍

2.2 發(fā)病情況

排查發(fā)現(xiàn)，共有4個養(yǎng)殖戶的肉牛出現(xiàn)不同程度的流涎，口吐白沫，口腔、蹄部出現(xiàn)水皰等臨床癥狀（表1）。

據(jù)調(diào)查，首發(fā)病例（即指示病例）可能出現(xiàn)在2017年12月28日。調(diào)查起始時間從首發(fā)病例向前推7 d（FMD潛伏期一般為7 d）即2017年12月21日；2018年1月17日接到報告后介入調(diào)查，1月18日診斷為疑似FMD疫情；隨后立即封鎖疫區(qū)，啟動應(yīng)急預(yù)案，并實施相應(yīng)的控制措施；2018年2月1日解除封鎖。此次疫情的流行曲線見圖5。

表1 興慶區(qū)小塘村疫情排查養(yǎng)殖戶調(diào)查情況

此次發(fā)病的4個養(yǎng)殖戶位置相對集中，且圍繞一清真寺分布，而清真寺斜對面有一個牛羊屠宰點（圖6）。4個養(yǎng)殖戶中發(fā)病的均為黃牛，養(yǎng)殖的羊均無異常；發(fā)病牛中除1頭是7月齡幼牛外，其它均為成年牛。

圖5 疫情流行曲線

圖6 4個養(yǎng)殖戶的空間分布

2.3 疫情追蹤與追溯

在調(diào)查養(yǎng)殖戶羅某某與馬某某時，獲悉附近養(yǎng)殖戶楊某某于2017年12月下旬，將1頭發(fā)病牛屠宰賣出，但在調(diào)查時未能確認(rèn)?，F(xiàn)場觀察其養(yǎng)殖的3頭牛也無任何臨床癥狀。馬某某因其飼養(yǎng)的病牛為此次調(diào)查的指示病例，成為此次疫情追蹤溯源的調(diào)查重點，但在調(diào)查中未發(fā)現(xiàn)任何有效信息。

養(yǎng)殖戶楊某某和馬某某周邊50 m內(nèi)，有一處牛羊屠宰點。該屠宰點每日至少屠宰1頭牛、4～5只羊。屠宰的牛羊主要是月牙湖鄉(xiāng)本地飼養(yǎng)的，少數(shù)來自其他地區(qū)。2017年12月以來，每天均有外地牛羊在此處被屠宰?，F(xiàn)場看到，屠宰點在屠宰后并未及時清理消毒（圖7）；販運車上沾染了動物糞便，也未經(jīng)常清洗消毒。

圖7 小塘村三隊屠宰點現(xiàn)場

此外，調(diào)查中還了解到，2018年1月8日有兩名牛販運人在小塘村各養(yǎng)殖戶進(jìn)出，但未能明確兩名牛販運人的具體信息。

2.4 實驗室檢測

2.4.1 病原學(xué)檢測 3份水皰皮與5份O-P液均采自羅某某養(yǎng)殖戶。經(jīng)熒光RT-PCR檢測，5份為O型FMD陽性。9份牛血清的液相阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測結(jié)果見表2。根據(jù)病例臨床表現(xiàn)和寧夏動物疾病預(yù)防控制中心實驗室病原學(xué)檢測結(jié)果，判定本次疫情為疑似FMD疫情。2018年1月18日將相關(guān)病料送往國家口蹄疫參考實驗室進(jìn)行檢測確認(rèn)；1月26日確診為Mya-98系O型FMD。

2.4.2 血清學(xué)檢測 對疫區(qū)及周邊地區(qū)進(jìn)行了O型、A型免疫抗體水平檢測。檢測結(jié)果見表3。

2.5 可能來源及潛在風(fēng)險因素分析

患病動物和潛伏期內(nèi)攜帶病毒動物是FMD的主要傳染源。FMDV主要通過直接接觸、間接接觸和空氣傳播[3]。根據(jù)現(xiàn)場緊急流行病學(xué)調(diào)查，對可能引起該起疫情的來源及潛在風(fēng)險因素進(jìn)行了簡單風(fēng)險等級定性劃分，認(rèn)為“私屠濫宰患病或潛伏期內(nèi)牛羊，屠宰點調(diào)運車輛攜帶病原”導(dǎo)致病原傳入的風(fēng)險高（表4）。

表2 寧夏動物疾病預(yù)防控制中心實驗室ELISA檢測結(jié)果

表3 疫區(qū)周圍FMD免疫抗體檢測結(jié)果

2.6 疫情處置

疫情確診后，興慶區(qū)政府立即啟動了應(yīng)急預(yù)案，及時發(fā)布了封鎖令；根據(jù)《口蹄疫防治技術(shù)規(guī)范》要求，嚴(yán)格劃定疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)，同步進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查、撲殺、消毒、緊急免疫、監(jiān)測等工作。在疫區(qū)小塘村周邊共設(shè)立了4個哨卡，撲殺與無害化處理牛14頭、羊21只。該起疫情得到了有效控制。

3 分析與討論

3.1 檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性

經(jīng)寧夏動物疾病預(yù)防控制中心實驗室進(jìn)行液相阻斷ELISA檢測，發(fā)現(xiàn)羅某某戶的1份牛血清A型、亞Ⅰ型抗體檢測結(jié)果均為陽性，同批檢測的其它樣品均為陰性；經(jīng)病原學(xué)檢測，無A型、亞Ⅰ型陽性，因而排除混合感染情況?？紤]到中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所液相阻斷ELISA檢測試劑盒的敏感性與特異性均為90%，推斷這份A型、亞Ⅰ型抗體陽性可能是假陽性。

表4 疫情可能來源及定性風(fēng)險評估

3.2 藥物治療對疫情發(fā)展的影響

調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，發(fā)病的4個養(yǎng)殖戶中有3戶進(jìn)行了藥物治療。用藥情況大體相同，但治療效果不一致。主要原因可能是養(yǎng)殖戶的心態(tài)與目的不同。羅某某的牛未經(jīng)免疫且主動報告疫情，調(diào)查中可能有夸大或虛報的情況，而其他兩戶均報告進(jìn)行了常規(guī)免疫，且為被動調(diào)查，有回避相關(guān)情況的可能。

3.3 調(diào)查的局限性

一是疫情報告滯后，不能明確指示病例，這對疫情的追蹤溯源帶來了困難；二是調(diào)查中獲取的諸多信息都是養(yǎng)殖戶的回憶性信息，其準(zhǔn)確性不能確定；三是部分信息沒有得到進(jìn)一步證實，這為疫情發(fā)生原因的假設(shè)帶來了困難；四是調(diào)查中判斷屠宰點是一個高風(fēng)險場所，但由于屠宰點相關(guān)樣品流動性大，來源復(fù)雜，同時調(diào)查時已失去了最佳時間點，這為驗證假設(shè)帶來了挑戰(zhàn)。

4 防控建議

4.1 規(guī)范牛羊定點屠宰監(jiān)管

規(guī)范屠宰加工點經(jīng)營許可，將動物防疫條件和無害化處理等作為日常監(jiān)管的重要內(nèi)容，加強法律法規(guī)宣傳和責(zé)任義務(wù)告知，監(jiān)督業(yè)主保持環(huán)境衛(wèi)生，指導(dǎo)其改善動物防疫和安全生產(chǎn)條件。

4.2 嚴(yán)格活畜調(diào)運監(jiān)管

加強動物產(chǎn)地檢疫和流通監(jiān)管，防止疫情跨地區(qū)傳播。

4.3 加強FMD免疫與監(jiān)測

切實做好FMD強制免疫與補免工作，避免漏免。同時加強免疫抗體監(jiān)測，根據(jù)監(jiān)測數(shù)據(jù)實時調(diào)整防控策略。

4.4 加強FMD防控的宣傳教育

對轄區(qū)內(nèi)群眾加強FMD防控相關(guān)知識的宣傳與指導(dǎo)，提高養(yǎng)殖戶疫病防治意識與疫情報告意識，盡早的將疫情控制在可控范圍內(nèi)。

5 結(jié)論

調(diào)查確認(rèn)，此次暴發(fā)是一起牛Mya-98系O型FMD疫情；疫情波及范圍小并得到有效控制。本次疫情發(fā)生與牛羊的私屠濫宰、人員和車輛的流動控制和消毒不嚴(yán)有關(guān)。牛O型、A型，羊O型、羊A型FMD免疫合格率分別達(dá)到89.9%、88.6%、91.5%、93.2%，說明免疫工作確實，因而為阻止疫情擴散建立了有效的免疫屏障。建議進(jìn)一步規(guī)范牛羊定點屠宰監(jiān)管，嚴(yán)格活畜調(diào)運監(jiān)管，提高免疫與監(jiān)測力度，加強相關(guān)防控知識的宣傳教育。

[1] 趙柏林，杜建，辛盛鵬. 印度口蹄疫疫情的風(fēng)險分析與評價[J]. 畜牧與獸醫(yī)，2017（9）：140-143.

[2] 李克斌. 口蹄疫流行近況與防控注意事項[J]. 獸醫(yī)導(dǎo)刊，2017（17）：14-16.

[3] 任陽陽. 口蹄疫的診斷和防治措施[J]. 甘肅畜牧獸醫(yī)，2017（12）：44.