貢 嘎，王一飛，益西措姆，索朗斯珠

（西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，西藏林芝 860000）

戊型肝炎由戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus， HEV）引起。HEV為單股正鏈RNA病毒，屬戊型肝炎病毒科（Hepeviridae）戊型肝炎病毒屬（Hepevirus），基因組全長(zhǎng)約7.2 kb，存在3個(gè)開(kāi)放閱讀框（Open reading frame，ORF），其中ORF1是非結(jié)構(gòu)基因編碼區(qū)，ORF2編碼結(jié)構(gòu)蛋白和衣殼蛋白，ORF3編碼特異性的免疫反應(yīng)抗原。HEV主要有4個(gè)基因型（HEV 1～4），其中1型和2型只感染人，主要由水源污染傳播，3型和4型為人獸共患[1-2]。HEV對(duì)孕婦和胎兒危害尤為嚴(yán)重，極易造成孕婦早產(chǎn)、流產(chǎn)和產(chǎn)死胎，妊娠晚期感染HEV后，胎兒死亡率高達(dá)25%[3-6]。

我國(guó)流行的HEV主要為基因1、3和4型?；?型主要分布在新疆和北京地區(qū)；3型主要分布在上海及江蘇等地；4型是優(yōu)勢(shì)基因型，地理分布廣泛，主要分布于東北、華中、西北和華東等地區(qū)，其中4a、4d和4h是優(yōu)勢(shì)亞型[7]。豬是HEV的主要傳播宿主。人食用HEV感染的生豬肉和生豬肝可導(dǎo)致感染[8-11]。文獻(xiàn)[12]報(bào)道，我國(guó)豬HEV血清抗體陽(yáng)性率在59.5%～84.3%之間。但目前有關(guān)西藏地區(qū)這方面的研究報(bào)道較少。

藏豬養(yǎng)殖是西藏地區(qū)主要的支柱產(chǎn)業(yè)，目前仍以傳統(tǒng)的放牧飼養(yǎng)為主。當(dāng)?shù)鼐用裣彩嘲肷ɑ蛏┤?、生肝，且?dāng)?shù)匦l(wèi)生條件較差，因此藏豬HEV檢測(cè)具有重要的公共衛(wèi)生意義。2016年11月—2017年3月，從西藏不同地區(qū)隨機(jī)采集未接種戊型肝炎疫苗的藏豬血清，采用ELISA方法檢測(cè)HEV抗體（HEV Ab），從而了解西藏不同地區(qū)的感染現(xiàn)狀，為該病防控提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

2016年11月—2017年3月，在拉薩、林芝、日喀則、山南、昌都等5個(gè)市，隨機(jī)采集藏豬血清各61份，共計(jì)305份，–20 ℃保存，待檢。

1.2 試劑

豬戊型肝炎病毒抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒：購(gòu)自上海泛柯實(shí)業(yè)有限公司，批號(hào)F15142-A。

1.3 主要儀器

恒溫恒濕培養(yǎng)箱：上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司，型號(hào)GNP-9050；多功能酶標(biāo)分析儀：深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司，型號(hào)RT-2100C。

1.4 檢測(cè)方法與結(jié)果判定

1.4.1 檢測(cè)方法 按照豬戊型肝炎病毒抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.4.2 結(jié)果判定 試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00，陰性對(duì)照平均值≤0.10。臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15。陰性判定：樣品OD 值＜臨界值（CUT OFF）者為HEV Ab陰性。陽(yáng)性判定：樣品OD 值≥臨界值（CUT OFF）者為 HEV Ab陽(yáng)性。空白孔調(diào)零，當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD值≥0.80，陰性對(duì)照孔平均OD值（NC）＋0.21。若樣品OD值≥臨界值，判定為HEV Ab陽(yáng)性；若樣品OD值＜臨界值，則判定為陰性。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

通過(guò)卡方檢驗(yàn)（SPSS 21.0），對(duì)不同性別和不同采樣地之間的HEV抗體陽(yáng)性率進(jìn)行顯著性差異分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地區(qū)

5個(gè)市305份藏豬血清的HEV Ab總陽(yáng)性率為26.6%（81/305），其中拉薩和林芝的陽(yáng)性率最高，均為32.8%（20/61），其次是昌都、日喀則和山南，陽(yáng)性率分別為29.5%（18/61）、26.2%（16/61）和11.5%（7/61）。利用SPSS 21.0方法，對(duì)不同地區(qū)陽(yáng)性率進(jìn)行顯著性差異分析，發(fā)現(xiàn)山南市陽(yáng)性率與拉薩、昌都、林芝、日喀則市相比差異顯著（P＜0.05，表1）。

表1 西藏不同地區(qū)藏豬HEV Ab陽(yáng)性率差異對(duì)比分析

2.2 不同性別

分析不同性別藏豬的抗體檢測(cè)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)母豬血清中的HEV Ab陽(yáng)性率為29.7%（46/155），公豬為23.3%（35/150）。利用SPSS 21.0方法進(jìn)行顯著性差異分析，發(fā)現(xiàn)無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

戊型肝炎是一種自限性的急性病毒性肝炎[13]。世界衛(wèi)生組織（WHO）估計(jì)，全球每年約有5萬(wàn)余人死于HEV感染[14]，因此該病是一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題。由于西藏特殊的地理環(huán)境，在一些地區(qū)至今還延續(xù)著食用生或半生豬肉和豬肝的習(xí)俗，并且部分地方仍直接飲用不經(jīng)任何消毒處理的露天生水，而“糞-口”途徑是導(dǎo)致HEV傳播感染的最主要方式。本調(diào)查利用ELISA方法，對(duì)西藏5個(gè)地區(qū)采集的305份藏豬血清進(jìn)行了HEV Ab檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)每個(gè)地區(qū)均有陽(yáng)性樣品被檢出，總陽(yáng)性率為26.6%（81/305），初步表明西藏5個(gè)地區(qū)存在不同程度的藏豬HEV感染。

時(shí)新春等[15]2013年在西藏林芝縣、米林縣檢測(cè)HEV血清抗體，發(fā)現(xiàn)總陽(yáng)性率為48.46%，其中公豬為52.63%，母豬為47.89%。唐建華等[16]2015年檢測(cè)的藏豬HEV Ab陽(yáng)性率為41.32%。本次調(diào)查顯示，拉薩、林芝兩地抗體陽(yáng)性率最高，均為32.8%，山南最低，為11.5%，顯示西藏各地都有不同程度的HEV流行，應(yīng)引起相關(guān)部門的足夠重視。從性別上看，母豬抗體陽(yáng)性率為29.7%，公豬為23.3%，無(wú)顯著差異。這與時(shí)新春等[17]的差異分析結(jié)果一致，但與唐建華等[18]的結(jié)果相反。這可能與樣品數(shù)量有關(guān)。

據(jù)文獻(xiàn)[17-19]報(bào)道，國(guó)外HEV Ab陽(yáng)性率研究中，意大利、英國(guó)、丹麥等國(guó)家的陽(yáng)性率較高，分別為87.0%、85.5%、73.2%，丹麥較低（31.0%）；國(guó)內(nèi)平原地區(qū)HEV Ab陽(yáng)性率也有較大差別，最高為湖南?。?4.3%），其次為廣西（77.5%）、福建?。?6.7%）、北京市（62.1%）、云南昆明市（59.5%），均高于本次檢測(cè)結(jié)果。這可能與每個(gè)地區(qū)的生豬飼養(yǎng)環(huán)境和管理有一定的關(guān)聯(lián)。

4 結(jié)論

綜上所述，我國(guó)西藏地區(qū)藏豬中存在HEV感染。雖然HEV血清陽(yáng)性率與國(guó)內(nèi)外其它地區(qū)相比并不高，但鑒于當(dāng)?shù)匦l(wèi)生條件較差，以及喜食半生或生豬肉和豬肝的習(xí)俗，西藏相關(guān)部門應(yīng)高度重視，采取適當(dāng)?shù)姆乐未胧缱龊梦煨透窝紫嚓P(guān)專業(yè)知識(shí)宣傳，倡導(dǎo)健康飲食，加強(qiáng)高發(fā)區(qū)牲畜檢測(cè)和衛(wèi)生消毒等，以控制HEV流行。

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