□ 賀志喬 濱州市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心

食品安全問題是最基本的民生問題，日益得到人們關(guān)注和重視。我國作為畜產(chǎn)品的生產(chǎn)和消費(fèi)大國，更應(yīng)該提高畜產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。而近年來，畜產(chǎn)品的獸藥殘留問題仍然突出，主要表現(xiàn)在抗生素類、β-腎上腺素能受體阻斷劑等方面[1]。其中，β-受體激動(dòng)劑又稱“瘦肉精”，是一類具有腎上腺受體激動(dòng)作用的藥物，其在畜肉中的殘留通過食物鏈進(jìn)入人體，可引起慢性或急性中毒，嚴(yán)重影響消費(fèi)者的身心健康[2]。本文將從β-受體激動(dòng)劑的危害、檢測(cè)方法及QuEChERS方法在前處理中的應(yīng)用等方面作介紹。

1 β-受體激動(dòng)劑的危害

β-受體激動(dòng)劑是一類人工合成的藥物，母體結(jié)構(gòu)為苯乙胺醇[3]。農(nóng)業(yè)部及食安辦相關(guān)公告中列出的β-受體激動(dòng)劑有10余種，常見的種類有克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、西馬特羅、特布他林等。最初，此類藥物在醫(yī)學(xué)上被用作治療心律失常、心絞痛、哮喘和支氣管痙攣，其藥理為松弛平滑肌。20世紀(jì)80年代，被發(fā)現(xiàn)在動(dòng)物體內(nèi)有促進(jìn)脂肪的轉(zhuǎn)化和分解，增加蛋白質(zhì)的合成以提高瘦肉率的功效，進(jìn)而作為獸藥用于動(dòng)物飼料中。但達(dá)到減少脂肪沉淀提高瘦肉率的效果，使用量需遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過治療劑量方可，因此導(dǎo)致“瘦肉精”的濫用和大劑量殘留[2]。通過食物鏈進(jìn)入人體的“瘦肉精”，易引起肌肉震顫、酸痛、心動(dòng)過速、惡心、失眠等癥狀，有致染色體畸變、誘發(fā)腫瘤和致畸的可能性。過量攝入會(huì)引起急性中毒，甚至導(dǎo)致心腦血管系統(tǒng)疾病患者死亡[3][4]。

2 β-受體激動(dòng)劑的檢測(cè)方法

我國明令禁止在飼料和畜牧生產(chǎn)中使用β-受體激動(dòng)劑類藥物，在動(dòng)物源性食品中，此類藥物的限量為不得檢出[5]。目前，常見的檢測(cè)方法主要有色譜法、免疫分析法、生物傳感技術(shù)、快速檢測(cè)技術(shù)等[6]。其中，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法因其檢測(cè)靈敏度高、準(zhǔn)確度高、無假陽性、檢出限低、無需衍生等特點(diǎn)，為檢驗(yàn)檢測(cè)部門常用的方法。如國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 22286-2008為液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定豬肝和豬肉中11種β-受體激動(dòng)劑殘留的方法，農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告-18-2008為液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定豬肝、豬肉、牛奶和雞蛋中的9種β-受體激動(dòng)劑殘留的方法；其原理均為樣品經(jīng)酶解，酸調(diào)pH沉降蛋白后，用有機(jī)試劑提取，再經(jīng)陽離子交換固相萃取柱凈化；定量限均為 0.5 μg/kg[7][8]。

以上檢測(cè)方法采用酶解、提取、固相萃取柱凈化等步驟，存在操作過程繁瑣，前處理時(shí)間長(zhǎng)，使用試劑較多，成本昂貴，回收率不理想，需采用同位素內(nèi)標(biāo)或基質(zhì)加標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)校正曲線的方法來確保準(zhǔn)確度和回收率等方面的缺點(diǎn)，使得檢測(cè)工作耗時(shí)長(zhǎng)，對(duì)操作人員要求較高。首先被應(yīng)用于農(nóng)藥殘留領(lǐng)域的QuEChERS方法，近年來也被改良并應(yīng)用于獸藥殘留檢測(cè)方法的前處理中，提高了獸藥殘留檢測(cè)的效率。

3 QuEChERS方法在β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

QuEChERS方法以其快速（quick）、簡(jiǎn)單（easy）、便宜（cheap）、高效（effective）、耐用（rugged）、安全（safe）的特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥多殘留檢測(cè)的前處理方法中[9]。針對(duì)于獸藥殘留檢測(cè)中β-受體激動(dòng)劑復(fù)雜的前處理步驟，QuEChERS方法也日益得到研究和應(yīng)用，見表1。

前處理方法中，肌肉或內(nèi)臟組織中的β-受體激動(dòng)劑需用β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶進(jìn)行酶解，實(shí)驗(yàn)者多采用乙酸銨緩沖溶液作為酶解的溶液環(huán)境。基于樣品基質(zhì)不同，李婧妍等[10]采用0.1 mol/L的EDTA-Mcllvaine緩沖溶液對(duì)液態(tài)乳中的β-受體激動(dòng)劑進(jìn)行提?。粚?duì)于蝦肉中的萊克多巴胺和沙丁胺醇，卜明楠等[11]采用均質(zhì)提取的辦法使之成為游離態(tài)。提取試劑多使用乙腈或添加一定量的有機(jī)酸，因相較而言，乙腈可以更好地沉淀蛋白，且不易引入極性基質(zhì)干擾物；加入一定的有機(jī)酸可優(yōu)化目標(biāo)物的分離度。

表1 QuEChERS方法在動(dòng)物源性樣品中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)的應(yīng)用

常見的QuEChERS凈化劑PSA、C18和NH2可以吸附基質(zhì)中的脂肪酸、色素和糖類等，得到澄清干凈的提取液。無水硫酸鈉或硫酸鎂起到吸水的作用，氯化鈉起到鹽析的作用，使水相和有機(jī)相分層，便于濃縮。曲斌等、李磊等[12]則采用新型QuEChERS凈化劑，即EMR-Lipid對(duì)于動(dòng)物組織樣品進(jìn)行凈化。EMR-Lipid是一種除脂產(chǎn)品，能夠選擇性地去除樣品萃取物中的主要脂類而不會(huì)造成目標(biāo)物的損失。曲斌等對(duì)比了使用EMR-Lipid凈化劑與MCX固相萃取柱兩種方法的回收率，前者的加標(biāo)回收率得到了提高。

4 結(jié)語

β-受體激動(dòng)劑及其他獸藥的使用，給消費(fèi)者身心健康帶來嚴(yán)重影響，獸藥殘留問題不容忽視。傳統(tǒng)的檢驗(yàn)檢測(cè)方法步驟繁瑣、成本高、耗時(shí)長(zhǎng)，不能快速有效地得到可靠的結(jié)果。QuEChERS方法的快速、簡(jiǎn)便、高效等優(yōu)點(diǎn)，使得檢測(cè)過程中的前處理步驟得到簡(jiǎn)化，時(shí)間成本和人力成本得到降低。對(duì)于面臨大量檢測(cè)任務(wù)的食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)來說，不失為好的選擇。

[1]陳一資,胡濱.動(dòng)物性食品中獸藥殘留的危害及其原因分析[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào),2009(2):162-166.

[2]田曉靜,陸會(huì)寧,劉麗霞.“瘦肉精”殘留的危害與檢測(cè)方法分析[J].Meat Industry,2011(6):34-36.

[3]曲斌,耿士偉,陸桂萍,等.新型QuEChERS方法結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定豬肝中β-受體激動(dòng)劑殘留[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2015(12):4747-4754.

[4]姜光麗,何小琴,郗存顯,等.QuEChERS/超高液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定飼料中6種β-阻斷劑類藥物[J].中國飼料,2015(12):33-36.

[5]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局.中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第235號(hào)[Z].2008.

[6]劉超，郭又春.瘦肉精的檢測(cè)方法及其監(jiān)管措施[J].質(zhì)量安全,2013,3:67-68.

[7] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局,中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).動(dòng)物源性食品中多種β-受體激動(dòng)劑殘留量的測(cè)定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法:GB/T 22286-2008[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2008.

[8]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.動(dòng)物源性食品中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè) 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法:農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告-18-2008[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2008.

[9]曲斌.QuEChERS在動(dòng)物源性食品獸藥殘留檢測(cè)中的研究進(jìn)展[J].食品科學(xué),2013(5):327-331.

[10]李婧妍,郭春峰,崔立輝,等.QuEChERS-HPLC-MS/MS法檢測(cè)液態(tài)乳中9種β2-受體激動(dòng)劑殘留量[J].中國乳品工業(yè),2016(11):49-52.

[11]卜明楠,石志紅,康健,等.QuEChERS結(jié)合LC-MS/MS同時(shí)測(cè)定蝦肉中72種獸藥殘留[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào),2012(5):552-558

[12]李磊,李海暢,高婧,等.QuEChERS EMR-Lipid-LC/MS/MS測(cè) 定8種β-受體激動(dòng)劑[J].食品研究與開發(fā),2016(9):178-182.