李蘭海 陳麗玲,2 游金明* 賀 琴 盧亞飛 郭曉波 楊 晉

(1.江西農業(yè)大學，江西省動物營養(yǎng)重點實驗室，江西省營養(yǎng)飼料開發(fā)工程中心，南昌 330045；2.江西中醫(yī)藥大學，南昌 330004)

仔豬早期斷奶技術已成為現(xiàn)代化養(yǎng)豬生產(chǎn)中重要的技術之一，該技術能夠提高母豬的年生產(chǎn)力、豬場的經(jīng)濟效益等[1]。但仔豬斷奶時由于環(huán)境、飼料等突然變化，加上斷奶時仔豬免疫、消化功能尚未完全發(fā)育，胃酸分泌不足和腸道微生物區(qū)系不平衡等諸多因素，易引發(fā)“仔豬早期斷奶綜合征”[2-4]?！白胸i早期斷奶綜合征”一直是阻礙養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的原因之一，對養(yǎng)豬業(yè)造成極大的經(jīng)濟損失[5]。飼糧中添加抗生素能夠提高斷奶仔豬的抗病力、生長性能，增加經(jīng)濟效益，因此被廣泛用于畜禽生產(chǎn)[6-7]。然而，抗生素的長期亂用、濫用導致畜產(chǎn)品藥物殘留、環(huán)境污染等現(xiàn)象[8-9]。在“飼料禁抗”的大環(huán)境下，尋求合適的抗生素替代品和替代方案是當務之急。目前，抗生素替代品的研究主在要集中在酸化劑、益生素和植物提取物等產(chǎn)品上，且酸化劑、植物提取物已被證實能夠提高仔豬的生長性能和免疫能力。Henry等[10]研究表明，飼糧中添加酸化劑可以提高仔豬生長性能，降低腹瀉率。而飼糧中添加牛至油可以預防和治療仔豬腸道感染，降低腹瀉率，提高生長性能[11]。雖然酸化劑、植物提取物種類繁多，卻沒有統(tǒng)一的使用標準，且酸化劑和植物提取物聯(lián)合使用是否能夠促進仔豬的生長、改善仔豬腸道微生物區(qū)系的研究鮮有報道。在實際生產(chǎn)應用中，豬場一般采用酸化劑和硫酸黏桿菌素一起使用來預防疾病，而隨著硫酸黏桿菌素被禁用后，急需尋找替代硫酸黏桿菌素的方案。因此，本試驗旨在研究用0.15%酸化劑或0.15%酸化劑+0.03%牛至油替代硫酸黏桿菌素對斷奶仔豬生長性能、腹瀉率和盲腸微生物的影響，為酸化劑和牛至油在斷奶仔豬中的合理應用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

硫酸黏桿菌素(10%)購自于市場，酸化劑(甲酸≥28.0%、丙酸≥14.0%)、牛至油均由英國安彭利(上海)生物科技有限公司提供。

1.2 試驗動物和分組設計

選用胎次和體重相近的26日齡斷奶仔豬120頭，隨機分為3個組，每組5個重復，每個重復8頭仔豬。各組中均含75 mg/kg金霉素+10 mg/kg恩拉霉素，此外，3個組分別飼喂添加0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素、0.15%酸化劑和0.15%酸化劑+0.03%牛至油的試驗飼糧。試驗期14 d。

1.3 試驗飼糧和飼養(yǎng)管理

仔豬飼喂玉米-豆粕型基礎飼糧。飼糧配方參照NRC(2012)和我國《豬飼養(yǎng)標準》(NY/T 65—2004)配制，試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗豬采用群飼，自由采食，自由飲水。衛(wèi)生、消毒和免疫程序按豬場常規(guī)方法進行。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

續(xù)表1項目Items含量Contents0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組0.10%acidifier+0.10%colistinsulfategroup0.15%酸化劑組0.15%acidifiergroup0.15%酸化劑+0.03%牛至油組0.15%acidifier+0.03%oreganooilgroup賴氨酸Lys1.381.381.38蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys0.870.870.87蘇氨酸Thr1.081.081.08鈣Ca0.800.800.80總磷TP0.640.640.64有效磷AP0.440.440.44

1)預混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of diet：Fe 180 mg，Mn 40 mg，Zn 125 mg，Se 0.28 mg，Co 1.5 mg，I 0.3 mg，Cu 10 mg，VA 17 500 IU，VD36 000 IU，VE 220 mg，VK 12 mg，VB15 mg，VB218 mg，VB69 mg，D-泛酸鈣D-pantothenic acid 70 mg，膽堿 choline 5 000 mg，D-生物素D-biotin 1.5 mg，VB110.3 mg，VB120.024 mg，葉酸 folic acid 10 mg，金霉素 chlortetracycline and 75 mg，恩拉霉素 enramycin 10 mg。

2)營養(yǎng)水平為計算值。Nutrient levels were calculated values.

1.4 樣品采集及處理

在試驗第14天時，從每個重復隨機選1頭仔豬屠宰后，立即取盲腸中段腸管樣品6 cm左右，兩端雙線結扎，錫箔紙包被，再用保鮮膜連同棉線一端裹好，另一端貼好標簽紙，待測。

1.5 測定指標

1.5.1 生長性能的測定

正式試驗開始后，觀察并記錄每一天仔豬數(shù)和采食量，淘汰或者死亡仔豬應及時稱重并做好記錄。于試驗第1、14天清晨對仔豬進行空腹個體稱重，并以組為單位記錄相應的飼料消耗量。計算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)。

1.5.2 腹瀉率的測定

記錄仔豬腹瀉情況，每天上、下午喂料之前記錄每窩拉稀的份數(shù)。

腹瀉率(%)=[總腹瀉次數(shù)/(總只數(shù)×
試驗天數(shù))]×100。

1.5.3 盲腸微生物數(shù)量的測定

無菌稱取盲腸內容物0.5 g于青霉素瓶，加入5 mL生理鹽水，旋渦振蕩器振蕩3～5 min，用微量移液槍準確吸取0.5 mL稀釋液至盛有4.5 mL生理鹽水的青霉素瓶中，振蕩1～2 min，依次稀釋10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。分別將盲腸內容物稀釋液接種于相應的培養(yǎng)基平皿上，每種指標檢測5個稀釋梯度，每個梯度設3個重復，37 ℃培養(yǎng)24 h后進行菌落計數(shù)。細菌接種培養(yǎng)基見表2。

表2 細菌接種培養(yǎng)基

1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)用Excel 2013軟件進行處理后，采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，Duncan氏法進行多重比較，結果用平均值±標準誤表示，以P<0.05為差異顯著，0.05≤P≤0.10為差異有顯著趨勢。

2 結 果

2.1 酸化劑和牛至油對斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響

由表3可知，各組仔豬ADG、ADFI和F/G均無顯著差異(P>0.05)。與0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組相比，0.15%酸化劑組和0.15%酸化劑+0.03%牛至油組仔豬ADFI有增加趨勢(P=0.066)，且分別比0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組提高了10.94%和3.56%。各組之間仔豬腹瀉率差異不顯著(P>0.05)，但0.15%酸化劑組、0.15%酸化劑+0.03%牛至油組腹瀉率分別比0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組降低了22.04%和20.10%。

表3 酸化劑和牛至油對斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響

同行數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 酸化劑和牛至油對斷奶仔豬盲腸微生物數(shù)量的影響

由表4可知，0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組盲腸沙門氏菌的數(shù)量顯著低于0.15%酸化劑組(P<0.05)。0.15%酸化劑+0.03%牛至油組盲腸雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量均顯著高于0.15%酸化劑組(P<0.05)，但0.15%酸化劑+0.03%牛至油組和0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組之間差異不顯著(P>0.05)。各組之間盲腸大腸桿菌、總需氧菌的數(shù)量差異不顯著(P>0.05)。

3 討 論

3.1 酸化劑和牛至油對斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響

仔豬“早期斷奶綜合征”給養(yǎng)殖者帶來重大的經(jīng)濟損失，抗生素雖然在提高生長性能和防治疾病等方面具有很好的效果，但藥物殘留和細菌耐藥性問題較為嚴重[12-13]。研究顯示，酸化劑和植物提取物在抗病促生長上具有抗生素的同等功效，可用于替代抗生素[14-15]。Wang等[16]用竹醋替代抗生素飼喂斷奶仔豬，結果發(fā)現(xiàn)竹醋組仔豬末重、ADFI、ADG和F/G與抗生素組相比無顯著差異。研究表明，酸化劑對斷奶仔豬的影響主要在斷奶后2周，因為在斷奶早期仔豬胃酸分泌不足，而斷奶后4～5周才恢復正常[17]。Hahn等[18]研究也得到相似的結果，即飼糧中添加乳酸能夠提高斷奶1～3周后仔豬的ADG和ADFI，顯著降低斷奶2周后仔豬胃、十二指腸、空腸和回腸pH。張旭暉等[19]研究發(fā)現(xiàn)，有機酸或有機酸+仙人掌提取物均能提高仔豬F/G，降低腹瀉率，提高仔豬的生長性能。進一步證實了酸化劑和植物提取物聯(lián)用對仔豬生長有一定的促進作用。牛至油是從植物牛至中提取的，具有良好的抗菌和促生長作用，畜禽服用后無藥物殘留，是環(huán)保、安全的綠色添加劑。黃國清等[20]研究了用牛至油替代抗生素對仔豬生長性能的影響，結果表明牛至油組與金霉素組相比，仔豬F/G和腹瀉率降低。

本試驗中，0.15%酸化劑組和0.15%酸化劑+0.03%牛至油組斷奶仔豬F/G與0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組相比分別降低了2.02%和3.53%；而斷奶仔豬腹瀉率分別比0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組降低了22.04%各20.10%。這說明酸化劑或酸化劑+牛至油對降低斷奶仔豬F/G和腹瀉率上有一定的促進作用。Giannenas[21]研究也發(fā)現(xiàn)，甲酸對仔豬的生長性能有促進效果。盧娜[22]在飼糧中添加0.4%的酸化劑，結果發(fā)現(xiàn)仔豬ADG和粗蛋白質表觀消化率顯著提高，且F/G顯著降低。F/G是生產(chǎn)中的重要指標之一，其關系著整個豬場的經(jīng)濟效益。本試驗中0.15%酸化劑+0.03%牛至油組F/G低于其他各組，效果最好。綜合生長性能的數(shù)據(jù)可知，飼糧中在添加75 mg/kg金霉素+10 mg/kg恩拉霉素的基礎上，0.15%酸化劑組或0.15%酸化劑+0.03%牛至油組斷奶仔豬的生長性能與0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組相似，甚至優(yōu)于0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組，酸化劑或酸化劑+牛至油可替代硫酸黏桿菌素應用于斷奶仔豬飼糧中。

3.2 酸化劑和牛至油對斷奶仔豬盲腸微生物數(shù)量的影響

畜禽腸道內生存著種類繁多、數(shù)量巨大的微生物群，畜禽腸道的健康是保證其正常生長的關鍵，而腸道微生物菌群的穩(wěn)定和平衡又是腸道健康的重要保障之一。仔豬早期斷奶，腸道微生物區(qū)系不穩(wěn)定，而生理、環(huán)境、營養(yǎng)等斷奶應激條件都會導致仔豬腸道微生物菌群失衡，這是引起仔豬腹瀉的重要原因之一[23-24]。豬盲腸體積大而且有較多食糜停留，因此寄居的細菌群落數(shù)量最大、種類最多。乳酸桿菌、雙歧桿菌為有益菌，沙門氏菌為有害菌，大腸桿菌為兼性菌。在機體正常情況下，大腸桿菌保持動態(tài)平衡，不會對機體產(chǎn)生不良影響。但當機體處于應激或者免疫力下降等狀態(tài)時，大腸桿菌是導致仔豬腹瀉的重要因素[25]。飼用抗生素能夠抑制或殺滅特異性微生物，在一定程度上改善仔豬腹瀉。腸道微生物還受腸道酸度的影響，添加酸化劑可以調節(jié)腸道微生物的平衡。有研究指出，酸化劑提高飼料轉化率、體重和仔豬氮平衡的作用可能與胃腸道中的有害細菌數(shù)量降低有關[26]。Blomberg等[27]發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加甲酸和乳酸顯著降低了仔豬腸道中大腸桿菌數(shù)量。研究還發(fā)現(xiàn)，緩釋復合酸化劑與抗生素聯(lián)合使用可顯著降低仔豬腸道大腸桿菌數(shù)量，增加乳酸桿菌數(shù)量，并且作用效果優(yōu)于單獨添加酸化劑或抗生素[28]。

牛至油的活性成分具有較強的表面活性和脂溶性，能迅速穿透病原微生物的細胞膜，使內容物流失，并有效阻止線粒體內的呼吸氧化過程，使病原微生物喪失能量而死亡，對大腸桿菌、沙門氏菌等革蘭氏陰性菌具有較強的殺滅作用，有效地減少腸道內有害細菌數(shù)量，同時顯著地提高雙歧桿菌和乳酸菌等有益菌的數(shù)量[29-30]，從而有效地降低仔豬的腹瀉率與死亡率[31]。

從本試驗的研究結果來看，0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組與0.15%酸化劑組相比，顯著降低了盲腸沙門氏菌的數(shù)量；0.15%酸化劑+0.03%牛至油組與0.15%酸化劑組相比，顯著增加了盲腸乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量。這可能與牛至油本身就具有很強的殺滅或抑制有害菌的作用有關，加上酸化劑對腸道的作用，起到了雙重的效果[15]?？傮w來看，飼糧中在添加75 mg/kg金霉素+10 mg/kg恩拉霉素的基礎上，0.15%酸化劑+0.03%牛至油組對斷奶仔豬盲腸微生物的影響與0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組的效果相當，甚至略優(yōu)于0.10%酸化劑+0.10%硫酸黏桿菌素組，說明酸化劑+牛至油可替代硫酸黏桿菌素在仔豬飼糧中添加。

4 結 論

飼糧中在添加75 mg/kg金霉素+10 mg/kg恩拉霉素的基礎上：

① 用0.15%酸化劑或0.15%酸化劑+0.03%牛至油替代0.10%硫酸黏桿菌素菌后，仔豬的生產(chǎn)性能有一定程度的改善，腹瀉率降低。

② 0.15%酸化劑+0.03%牛至油能夠提高仔豬盲腸有益菌數(shù)量，降低有害菌數(shù)量，作用效果與0.10%硫酸黏桿菌素相似。酸化劑+牛至油可以替代硫酸黏桿菌素在斷奶仔豬飼糧中添加。

參考文獻：

[1] LI D F,NELSSEN J L,REDDY P G,et al.Transient hypersensitivity to soybean meal in the early-weaned pig[J].Journal of Animal Science,1990,68(6):1790-1799.

[2] TSILOYIANNIS V K,KYRIAKIS S C,VLEMMAS J,et al.The effect of organic acids on the control of porcine post-weaning diarrhoea[J].Research in Veterinary Science,2001,70(3):287-293.

[3] 劉文輝.復合酸化劑對斷奶仔豬生長性能、抗氧化功能及內分泌功能等的影響[D].碩士學位論文.福州:福建農林大學,2013.

[4] 錢仲倉.控釋型丁酸的制備及其對早期斷奶仔豬腸屏障影響的研究[D].碩士學位論文.杭州:浙江大學,2010.

[5] DENG Z Y,ZHANG J W,WU G Y,et al.Dietary supplementation with polysaccharides fromSemencassiaeenhances immunoglobulin production and interleukin gene expression in early-weaned piglets[J].Journal of the Science of Food and Agriculture,2007,87(10):1868-1873.

[6] GOMES F E,FONTES D O,SALIBA E O S,et al.cido fumrico e sua combina?o com oscidos butírico ou fórmico em dietas de leit?es recém desmamados[J].Arquivo Brasileiro De Medicina Veterinria E Zootecnia,2007,59(5):1270-1277.

[7] 賀琴,王自蕊,游金明,等.酵母壁多糖對斷奶仔豬生長性能和小腸黏膜形態(tài)結構的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2016,28(11):3536-3541.

[8] SALISBURY J G,NICHOLLS T J,LAMMERDING A M,et al.A risk analysis framework for the long-term management of antibiotic resistance in food-producing animals[J].International Journal of Antimicrobial Agents,2002,20(3):153-164.

[9] 韓慶功,宋云義,崔艷紅,等.牛至油對仔豬生產(chǎn)性能、抗體水平及糞便微生物的影響[J].河南農業(yè)科學,2016,45(7):113-117.

[10] HENRY R W,PICKARD D W,HUGHES P E.Citric acid and fumaric acid as food additives for early-weaned piglets[J].Animal Production,1985,40(3):505-509.

[11] 曹建國,潘正偉,陳正華,等.牛至油在仔豬飼料中的抗菌促生長效果[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊,2004(1):24-25.

[12] GHEISARI A A,HEIDARI M,KERMANSHAHI R K,et al.Effect of dietary supplementation of protected organic acids on ileal microflora and protein digestibility in broiler chickens[C]//Proceedings of the 16th European Symposium on Poultry Nutrition.Strasbourg：[s.n.],2007:519-522.

[13] PARTANEN K,SILJANDER-RASI H,PENTIKINEN J,et al.Effects of weaning age and formic acid-based feed additives on pigs from weaning to slaughter[J].Archives of Animal Nutrition,2007,61(5):336-356.

[14] FALKOWSKI J F,AHERNE F X.Fumaric and citric acid as feed additives in starter pig nutrition[J].Journal of Animal Science,1984,58(4):935-938.

[15] 楊世紅,李美玉,戰(zhàn)欣梅.牛至油替代抗生素對斷奶仔豬生產(chǎn)性能及抗病力的影響[J].山東畜牧獸醫(yī),2009,30(7):5-6.

[16] WANG H F,GAO K,WANG C,et al.Effects of feeding bamboo vinegar and acidifier as an antibiotic substitute on the growth performance and intestinal bacterial communities of weaned piglets[J].Acta Agriculturae Scandinavica,Section A:Animal Science,2013,63(3):143-150.

[17] CRANWELL P D,DE NOAKES E,HILL K J.Gastric secretion and fermentation in the suckling pig[J].British Journal of Nutrition,1976,36(1):71.

[18] HAHN T W,LOHAKARE J D,LEE S L,et al.Effects of supplementation of β-glucans on growth performance, nutrient digestibility, and immunity in weanling pigs[J].Journal of Animal Science,2006,84(6):1422-1428.

[19] 張旭暉,王恬,冀鳳杰,等.有機酸化劑對斷奶仔豬生長性能和腸道健康的影響[J].動物營養(yǎng)學報,2012,24(3):507-514.

[20] 黃國清,付水廣.用牛至油替代抗生素對仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].糧食與飼料工業(yè),2006(10):35-36.

[21] GIANNENAS I A.Organic acids in pig and poultry nutrition[J].Feed Additives,2006,57(1):51-62.

[22] 盧娜.日糧中添加不同酸化劑對斷奶仔豬的應用研究[D].碩士學位論文.烏魯木齊:新疆農業(yè)大學,2008.

[23] 孔祥杰,姜海龍,蔡維北,等.黃芪莖葉對斷奶仔豬盲腸微生物區(qū)系的影響[J].中國畜牧雜志,2017,53(3):117-120,124.

[24] 鄭蘭,李亞雄.抗生素及其替代物在畜禽腸道內的作用及其對腸道微生物和形態(tài)結構的影響[J].國外畜牧學(豬與禽),2017,37(1):50-55.

[25] 許叢叢,陳小連,朱麗慧,等.復合抗氧化劑對早期斷奶仔豬腸道主要菌群的影響[J].飼料研究,2012(4):4-7.

[26] WANG H F,WANG J L,WANG C,et al.Effect of bamboo vinegar as an antibiotic alternative on growth performance and fecal bacterial communities of weaned piglets[J].Livestock Science,2012,144(1/2):173-180.

[27] BLOMBERG L,HENRIKSSON A,CONWAY P L.Inhibition of adhesion ofEscherichiacoliK88 to piglet ileal mucus byLactobacillusspp.[J].Applied and Environmental Microbiology,1993,59(1):34-39.

[28] 晏家友,賈剛,王康寧,等.緩釋復合酸化劑對斷奶仔豬消化道酸度及腸道功能的影響[J].畜牧獸醫(yī)學報,2009,40(12):1747-1754.

[29] 廖三賽,袁海春.晶綠福(牛至油)與抗生素對仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].養(yǎng)殖與飼料,2003(7):6-7.

[30] 陳會良,袁向陽,黃磊,等.牛至油對仔豬腸道微生物菌群的影響[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2005,24(6):32-33.

[31] 邱楚武.牛至油在仔豬飼料中的應用試驗[J].糧食與飼料工業(yè),2003(7):32.