柴

(安陽(yáng)市第三人民醫(yī)院，河南 安陽(yáng) 455000)

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，在我國(guó)居于婦科惡性腫瘤的第2位。很多宮頸癌患者就診時(shí)已處于中晚期，治療效果很差，治療以后的5 a生存率比較低。而早期宮頸癌患者治療的效果明顯優(yōu)于中晚期，5 a生存率也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于中晚期。因此，對(duì)于早期宮頸癌的發(fā)病機(jī)制的研究非常重要。如果能夠發(fā)現(xiàn)有效的指標(biāo)用于早期宮頸癌的診斷，其臨床意義將非常重大。本文擬檢測(cè)P15和Survivin在早期宮頸癌組織中的表達(dá)，探討兩者在宮頸癌發(fā)生過程中的作用及其相互關(guān)系。

1 材料與方法

1.1材料入組安陽(yáng)市第三人民醫(yī)院的30例早期宮頸癌和30例正常宮頸黏膜標(biāo)本。宮頸癌的組織學(xué)類型均為鱗癌。所有標(biāo)本均按照常規(guī)處理，免疫組化試劑盒和抗體均購(gòu)自北京中杉金橋生物工程有限公司。

1.2方法應(yīng)用免疫組化S-P法檢測(cè)P15和Survivin的表達(dá)。標(biāo)本常規(guī)脫蠟，水化，高壓抗原熱修復(fù)，依次滴加各種抗體，顯色。P15的抗體稀釋度為1120，Survivin的抗體稀釋度為1100。陽(yáng)性對(duì)照切片用試劑盒中的陽(yáng)性對(duì)照宮頸癌切片。陰性對(duì)照用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的PBS代替一抗。

1.3結(jié)果判定細(xì)胞核或細(xì)胞漿內(nèi)見均勻一致的棕黃色顆粒為陽(yáng)性，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行結(jié)果判定：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<5%為陰性，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥5%以上為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 14.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，比較用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析用Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

P15在早期宮頸癌和正常宮頸黏膜組織中的陽(yáng)性率分別為66.7%(20/30)和100.0%(30/30)，早期宮頸癌組織中P15的表達(dá)低于正常宮頸黏膜組織(P<0.05)。Survivin在早期宮頸癌和正常宮頸黏膜組織中的陽(yáng)性率分別為70.0%(21/30)和0.0%(0/30)，早期宮頸癌組織中P15的表達(dá)高于正常宮頸黏膜組織(P<0.05)。早期宮頸癌組織中P15和Survivin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(rS=？，P<0.05)。見表1、2。

表1 不同宮頸組織中P15的表達(dá)

注：2組陽(yáng)性率比較，P<0.05

表2 不同宮頸組織中Survivin的表達(dá)

注：2組陽(yáng)性率比較，P<0.05

3 討論

P15屬于抑制細(xì)胞周期的多腫瘤抑癌基因之一。P15作用于細(xì)胞周期素依賴激酶4/6和細(xì)胞周期蛋白D的復(fù)合物，抑制激酶激活，使細(xì)胞停留在G1期，防止癌變的發(fā)生。如果P15基因發(fā)生突變，其本來的抑制腫瘤發(fā)生的作用消失，則可能導(dǎo)致癌變的發(fā)生。P15基因異常還與其他疾病，如漿細(xì)胞疾病、癌前病變等發(fā)生有一定的關(guān)系。人體許多腫瘤，包括食管癌、肺癌[1]、肝癌[2]等，都已發(fā)現(xiàn)p15基因的突變。

Survivin位于17q25，該基因全長(zhǎng)14 700 bp。Survivin參與了細(xì)胞凋亡的過程，具有抑制細(xì)胞凋亡的作用。有學(xué)者研究了Survivin基因在鼻型NK/T細(xì)胞淋巴瘤中的表達(dá)及其與p53、bcl-2蛋白表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)其表達(dá)上調(diào)，并與p53高表達(dá)密切相關(guān)，但與bcl-2蛋白無明顯關(guān)聯(lián)。研究發(fā)現(xiàn)，食管癌、結(jié)腸癌、胃癌[3]、白血病[4]等多種腫瘤中都有Survivin基因表達(dá)的增高。

在本研究中，早期宮頸癌組織中P15的表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而Survivin在早期宮頸癌組織中的表達(dá)增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這些提示P15和Survivin參與了宮頸癌的早期發(fā)生，他們的表達(dá)異常在宮頸癌的發(fā)生過程中可能起重要作用。兩者的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，提示P15和Survivin兩者的表達(dá)異?？赡芄餐瑓⑴c了宮頸癌的癌變過程。Zhang等[5]也做過相關(guān)研究，結(jié)論和本研究類似，研究結(jié)果都提示，P15和Survivin參與了宮頸癌的發(fā)生過程。

下一步我們將對(duì)這2種基因的具體作用機(jī)制應(yīng)用其他方法，進(jìn)行更加深入的研究，另外還有其他哪些基因參與了宮頸癌的癌變過程，他們之間的關(guān)系如何，這些都需要進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[2] ZHANG JC, GAO B, YU ZT, et al.Promoter hypermethylation of p14 (ARF) , RB, and INK4 gene family in hepatocellular carcinoma with hepatitis B virus infection[J].Tumour Biol,2014,35(3):2795-2802.

[3] PANDEY A, VISHNOI K, MAHATA S,et al. Berberine and Curcumin Target Survivin and STAT3 in Gastric Cancer Cells and Synergize Actions of Standard Chemotherapeutic 5-Fluorouracil[J].Nutr Cancer,2015,67(8):1293-1304.

[4] 王留霞.Survivin和Livin在初診急性白血病患兒中的表達(dá)[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2015, 28(3):200-202.

[5] ZHANG Y, GUO L, XING P,et al.Increased expression of oncogene-induced senescence markers during cervical squamous cell cancer development[J].Int J Clin Exp Pathol，2014，7(12):8911-8916.