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        川產(chǎn)天竺桂葉揮發(fā)成分的GC-MS分析

        2018-05-10 01:18:48趙春超楊學(xué)兵莫開林
        四川林業(yè)科技 2018年2期
        關(guān)鍵詞:無溶劑天竺水蒸氣

        趙春超,楊學(xué)兵,徐 明,楊 磊,莫開林*

        (1. 東北林業(yè)大學(xué)森林植物生態(tài)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,黑龍江 哈爾濱 150040; 2. 四川省林業(yè)科學(xué)研究院,四川 成都 610081)

        天竺桂(Cinnamomumpedunculatum)為樟科樟屬植物,又名大葉天竺桂、山肉桂、土桂,竺香,樹葉和樹皮可做調(diào)料也可做藥[1-3]。常綠喬木,葉可常年采摘研究,廉價(jià)易得,產(chǎn)于我國四川、湖北、安徽、湖南、福建等地,朝鮮和日本也有種植[4-5]。天竺桂全株含精油,散發(fā)清新香氣,常被用作綠化樹和觀賞樹,研究表明其精油具有抗癲癇、抗菌、殺蟲等活性[6-9]。在已報(bào)道的揮發(fā)油提取方法中,水蒸氣蒸餾法應(yīng)用最為廣泛[10],但整個(gè)提取過程時(shí)間較長,消耗能量大,不利于熱不穩(wěn)定物質(zhì)的萃取, 而且長時(shí)間高溫提取易引起不飽和化合物或者酯類化合物的分解[11]。微波無溶劑提取法對新鮮材料進(jìn)行微波輻射加熱,使植物細(xì)胞內(nèi)部溫度快速升高、壓力逐漸增大及水分快速氣化,導(dǎo)致細(xì)胞膨脹破裂使揮發(fā)性成分隨著水蒸氣一起出來[12],具有速度快、操作簡單、節(jié)約能源、無污染等優(yōu)點(diǎn)[13]。到目前為止,還沒有使用微波無溶劑提取裝置對川產(chǎn)天竺桂葉揮發(fā)油進(jìn)行提取的相關(guān)報(bào)道。因此本實(shí)驗(yàn)采用微波無溶劑法提取天竺桂葉揮發(fā)油成分,并和傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法相比較,用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)分析鑒定,并用峰面積歸一化法確定天竺桂揮發(fā)油各成分的相對百分含量,為川產(chǎn)天竺桂的深入研究提供方法及相應(yīng)數(shù)據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 原料與試劑

        供試天竺桂葉2016年9月采自四川省樂山市,經(jīng)東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院谷會(huì)巖副教授進(jìn)行品種鑒定。采摘后當(dāng)日空運(yùn)至實(shí)驗(yàn)場所,剪成4 mm~7 mm方塊,測得初始含水率為56%,存于-18℃冰箱內(nèi)。分析純正己烷購自德州市富凱化工有限公司,無水硫酸鈉購自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司。

        1.2 儀器

        試驗(yàn)中用到的儀器有:廣東格蘭仕集團(tuán)有限公司生產(chǎn)的WP700TL23-K5型微波爐、鄭州長城科工貿(mào)有限公司生產(chǎn)的SHB-IV雙A循環(huán)水式多用真空泵和美國安捷倫公司生產(chǎn)的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。

        1.3 精油制備

        1.3.1 微波無溶劑提取

        準(zhǔn)確取鮮葉225 g置于連有揮發(fā)油提取裝置的圓底燒瓶(1L)中,微波540 W功率下輻射提取,直到收集器中揮發(fā)油產(chǎn)量不再增多,計(jì)算揮發(fā)油得率。

        1.3.2 水蒸氣蒸餾

        準(zhǔn)確取鮮葉225 g置于連有揮發(fā)油提取裝置的圓底燒瓶(1L)中,加入475 mL蒸餾水,電熱套540 W加熱提取, 直到收集器中揮發(fā)油產(chǎn)量不再增多,計(jì)算揮發(fā)油得率。

        上述所得揮發(fā)油均存放于4 ℃冰箱內(nèi)。GC-MS檢測前用正己烷稀釋及無水硫酸鈉干燥。

        1.4 GC-MS分析

        測試儀器為 Agilent 6890GC和5973MS系統(tǒng),彈性石英毛細(xì)柱型號(hào)為HP-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm)。升溫程序:柱溫從50 ℃保持5 min,以5 ℃·min-1升溫至260 ℃,保持5 min;最后以15 ℃·min-1升至280 ℃,保持10 min。色譜參數(shù):氦為載氣,柱內(nèi)流速1.0 Ml·min-1,進(jìn)樣口溫度270 ℃,進(jìn)樣量1 μL,分流進(jìn)樣,分流比80∶1。質(zhì)譜條件:電子轟擊能量70 eV,離子源溫度230 ℃,掃描質(zhì)量范圍(m/z)15 amu ~500 amu。采用WileyNIST0標(biāo)準(zhǔn)譜庫進(jìn)行檢索,面積歸一法計(jì)算各組分的相對含量。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 揮發(fā)油提取率及理化常數(shù)

        所得揮發(fā)油經(jīng)無水硫酸鈉干燥后,得到淡黃色、濃郁香味的液態(tài)精油。不同提取方法對天竺桂葉揮發(fā)油進(jìn)行提取的時(shí)間動(dòng)力學(xué)及揮發(fā)油得率見圖1。

        圖1 微波無溶劑提取法和水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油得率

        由圖1可知,隨著時(shí)間的延長,兩種提取方法所得精油得率逐漸增多。水蒸氣蒸餾法提取天竺桂揮發(fā)油約200 min可基本提取完全,精油得率5.46 mL·kg-1;微波無溶劑提取法在40 min左右即可提取完全,精油得率6.50 mL·kg-1。這是因?yàn)樗魵庹麴s法的長時(shí)間加熱使精油中熱不穩(wěn)定成分氧化、水解降低產(chǎn)量;而微波無溶劑提取法通過微波輻射加熱可使葉子內(nèi)水分快速氣化,進(jìn)而將內(nèi)部揮發(fā)油成分帶出,所得精油產(chǎn)量高,品質(zhì)好[14]。

        2.2 天竺桂葉精油的化學(xué)成分分析

        通過GC-MS分析所得揮發(fā)油,圖2和圖3分別是微波無溶劑提取法和水蒸氣蒸餾法提取的天竺桂葉揮發(fā)油的總離子流圖,各組分的相對含量及定性分析結(jié)果見表1。

        圖2 微波無溶劑提取法提取的川產(chǎn)天竺桂葉揮發(fā)油的總離子流色譜圖

        圖3 水蒸氣蒸餾法提取的天竺桂葉揮發(fā)油的總離子流色譜圖

        表1 GC-MS分析微波無溶劑法和水蒸氣蒸餾法提取的川產(chǎn)天竺桂葉揮發(fā)性成分

        注:“—”表示未檢出

        由圖2和圖3可知,兩種不同的提取方法所得川產(chǎn)天竺桂葉揮發(fā)油的主要組成成分相似,各組分相對含量略有不同。

        由表1可知,兩種方法所得精油共檢測出44種化合物,其中主要組分相似,各組分含量略有不同。微波無溶劑提取法提取所得揮發(fā)油中共檢測出42個(gè)化學(xué)成分,占總揮發(fā)油的90.86%,其中以冰片為主要成分,占41.91%,其它相對含量較高的依次為乙酸肉桂酯(17.97%)、乙酸龍腦酯(5.21%)、桉葉油素(4.48%)、石竹烯(4.43%)、γ-欖香烯(3.93%)、α-松油醇(2.52%)、松油烯-4-醇(1.44%)、愈創(chuàng)醇(1.30%)等。

        水蒸氣蒸餾法所得揮發(fā)油共檢測出34種化學(xué)成分,占總揮發(fā)油的83.61%,也是以冰片為主要成分,占36.15%;其它相對含量較高的依次為乙酸肉桂酯(10.91%)、桉葉油素(10.13%)、石竹烯(5.33%)、乙酸龍腦酯(4.89%)、γ-欖香烯(3.09%)、α-松油醇(2.39%)、松油烯-4-醇(1.88%)、α-蒎烯(1.14%)等。

        3 結(jié)論與討論

        使用GC-MS技術(shù)對微波無溶劑和水蒸氣蒸餾法提取的川產(chǎn)天竺桂葉揮發(fā)油進(jìn)行分析,結(jié)果表明:采用微波無溶劑提取法提取揮發(fā)油需40min,得率為6.50 mL·kg-1,鑒定出42種化合物;采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油需200 min,得率為5.46 mL·kg-1,鑒定出34種化合物?;瘜W(xué)成分均以萜類及其衍生物為主,含量最高的是冰片,其它相對含量較高的是醋酸肉桂酯、桉葉油素、石竹烯、γ-欖香烯等。

        對目標(biāo)產(chǎn)物揮發(fā)油來說,兩種提取方法得到的揮發(fā)油的組分基本相同。但微波無溶劑提取法是利用鮮葉內(nèi)的水分實(shí)現(xiàn)揮發(fā)油的完全萃取,即除天竺桂鮮葉外, 沒有添加其它溶劑,具有提取速度快、節(jié)約能源、易操作、無污染等優(yōu)點(diǎn)。該方法也可用于其它新鮮植物中揮發(fā)油的提取。

        參考文獻(xiàn):

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