李 鑫 李武良 李 萍

胃癌是國(guó)際上最常見的惡性腫瘤之一，同時(shí)也是我國(guó)十大癌癥之一。Chen等[1]研究結(jié)果表明，2015年我國(guó)新增429.2萬癌癥病例，281.4萬人因癌癥死亡，其中胃癌是癌癥死亡的主要原因。幽門螺桿菌（Helicobacter pylori,H.pylori）為消化道常見菌群，我國(guó)H.pylori感染率為47%～66%[2]。研究表明，70%左右的胃癌病患由H.pylori引起，另外研究表明近90%的胃癌患者被確認(rèn)與H.pylori感染相關(guān)[3-4]。目前，常用的H.pylori檢測(cè)手段主要有組織活檢、細(xì)菌培養(yǎng)、PCR基因診斷、13C或14C-尿素呼氣檢驗(yàn)（14CUrea Breath test，14C-UBT）[5-8]。 由于14C-UBT 簡(jiǎn)單快捷且準(zhǔn)確度及敏感度較高，被廣泛應(yīng)用。同時(shí)，14C-UBT可對(duì)胃黏膜H.pylori密度進(jìn)行定量評(píng)估，有效減少因H.pylori在胃內(nèi)病灶非均勻性分布所致的取樣誤差[9]。P53抑癌基因是機(jī)體內(nèi)一種抑制細(xì)胞癌變的基因，正常情況下，細(xì)胞或器官中P53蛋白含量極低，較難檢測(cè)。當(dāng)細(xì)胞DNA受到損傷并無法修復(fù)時(shí)P53蛋白大量表達(dá)，抑制癌變細(xì)胞[15-17]。骨橋蛋白（osteopontin,OPN）廣泛存在于細(xì)胞、組織、器官中，參與組織修復(fù)，與細(xì)胞黏附、遷移及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)[18]。本研究通過14C-UBT檢測(cè)不同TNM分期胃癌患者H.pylori感染狀況及OPN的表達(dá)，旨在揭示不同TNM分期胃癌患者H.pylori的感染情況與胃癌進(jìn)展的相關(guān)性。

資料與方法

一、一般資料

選取2014年5至2017年5月在我院經(jīng)胃鏡及病理檢查確診的胃癌患者105例，其中男60例，女45例；通過14C-UBT檢測(cè)[10]確診，其中H.pylori陽性74例，H.pylori陰性31例。根據(jù)TNM分期Ⅰ期25例，其中男 15例，女 10例，平均年齡（48.26±11.37）歲；Ⅱ期25例，其中男14例，女11例，平均年齡（47.82±10.96）歲；Ⅲ期 30例，其中男 17例，女13例，平均年齡（47.67±11.96）歲；Ⅳ期 25例，其中男15例，女10例，平均年齡 （47.82±10.96歲）。不同TNM分期胃癌患者的臨床病理指標(biāo)見表1。

表1 不同TNM分期胃癌患者的臨床病理指標(biāo) （n）

二、方法

1.14C-UBT

所有患者檢測(cè)前4周禁止使用抗生素及H.pylori敏感藥物，患者空腹服用1粒14C膠囊，靜坐25 min后引導(dǎo)患者向CO2吸收瓶勻速吹氣1～4 min，使瓶?jī)?nèi)CO2吸收劑由紫紅色變?yōu)闊o色，H.pylori液體閃爍計(jì)數(shù)儀測(cè)定3～5 min，DPM≥100視為陽性，DPM＜100為陰性（根據(jù)測(cè)定儀器說明書）。

2.OPN及P53的檢測(cè)

采用免疫組化SP檢測(cè)患者胃癌組織中OPN和P53的表達(dá)，OPN及P53單克隆抗體、免疫組化SP試劑盒購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司，檢測(cè)按照試劑盒說明書操作。

三、數(shù)據(jù)分析

本研究使用SPSS 22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用Spearman進(jìn)行相關(guān)性分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、胃癌患者H.pylori檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果顯示，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期感染率分別為52.0%（13/25），68.0%（17/25）、76.7%（23/30）、84.0%（21/25）；隨著胃癌患者病情的發(fā)展H.pylori的感染率顯著升高（χ2=27.450，P=0.000）。

二、H.pylori感染與不同TNM分期胃癌患者P53表達(dá)的關(guān)系

Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori陽性胃癌患者的P53表達(dá)率均顯著高于H.pylori陰性患者 （P＜0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori陽性率與P53表達(dá)率呈正相關(guān)，Ⅳ期胃癌患者H.pylori陽性與P53表達(dá)率相關(guān)系數(shù)為0.752，見表2。

表2 不同TNM分期胃癌組織中P53表達(dá)分析 [n（%）]

三、H.pylori感染與不同TNM分期胃癌患者OPN表達(dá)的關(guān)系

Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori陽性胃癌患者的OPN表達(dá)率均顯著高于H.pylori陰性患者 （P＜0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori陽性與OPN表達(dá)率呈正相關(guān)，且隨著胃癌病情加重相關(guān)性明顯，見表3。

表3 不同TNM分期胃癌組織中骨橋蛋白（OPN）的表達(dá)分析 [n（%）]

討 論

目前，國(guó)際癌癥研究中心（International Agency for Research on Cancer,IARC）已經(jīng)將H.pylori列為Ⅰ類致癌因子[11]。胃癌是我國(guó)最常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，研究表明胃癌病死率占癌癥病死率的24%左右，為癌癥死亡率首要因素。H.pylori通過感染損傷胃黏膜，促使胃細(xì)胞更新速度加快，增加了細(xì)胞更新時(shí)DNA復(fù)制錯(cuò)誤機(jī)率，最終導(dǎo)致DNA損傷[12]。H.pylori可導(dǎo)致機(jī)體釋放過多的超氧自由基導(dǎo)致胃細(xì)胞過氧化損傷，引發(fā)癌癥[13]。H.pylori感染的檢測(cè)手段主要有組織活檢、細(xì)菌培養(yǎng)、血清及非血清H.pylori檢測(cè)、13C-UBT或14C-UBT[5-8]。本研究采用14C-UBT檢測(cè)不同TNM胃癌分期患者H.pylori的感染狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期感染率分別為52.0%，68.0%、76.7%、84.0%，與石玲[15]在 H.pylori感染與原發(fā)性肝癌的相關(guān)性研究結(jié)果相似，提示H.pylori感染率隨著癌癥病情的發(fā)展顯著升高，這一觀點(diǎn)在胃癌、肝癌等癌癥研究中得到支持。

P53抑癌基因是機(jī)體內(nèi)一種抑制細(xì)胞癌變的基因，正常情況下，細(xì)胞或器官中P53蛋白含量極低，較難檢測(cè)。當(dāng)細(xì)胞DNA受到損傷并無法修復(fù)時(shí)P53蛋白大量表達(dá)，抑制癌變細(xì)胞[16-18]。骨橋蛋白廣泛存在于細(xì)胞、組織、器官中，參與組織修復(fù)，與細(xì)胞黏附、遷移及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)[19]。研究表明，骨橋蛋白在肺癌、胃癌、肝癌等原發(fā)性腫瘤及其淋巴轉(zhuǎn)移瘤組織中過量表達(dá)，可能參與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移[20-22]。本研究中Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori陽性胃癌患者的P53和OPN表達(dá)率均顯著高于H.pylori陰性患者（P ＜ 0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者 H.pylori陽性與P53和OPN表達(dá)率呈正相關(guān)，并且隨著患者病情的加重胃癌患者H.pylori陽性與P53和OPN表達(dá)率的相關(guān)性越密切。提示P53和OPN可能參與H.pylori通過感染引發(fā)癌癥的機(jī)制。

綜上所述，胃癌晚期即Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori感染率顯著升高，且H.pylori感染與OPN表達(dá)率和P53表達(dá)率呈正相關(guān)，并隨著胃癌病情的加深相關(guān)越緊密。

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