楊喜永 劉雅文 趙小燕 王珍 鄭錫銘

新生兒機(jī)體免疫功能不全，易受病原菌侵襲而發(fā)生各種感染，尤以新生兒感染性肺炎多見[1]。新生兒感染性肺炎發(fā)病快，潛伏期短，是新生兒死亡的重要原因，及時(shí)、準(zhǔn)確的臨床診療及疾病監(jiān)測對(duì)新生兒的救治非常重要[2]。各種病原體感染肺臟后可引起全身炎癥反應(yīng)及抗炎反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致多器官衰竭甚至死亡，研究表明患兒發(fā)病時(shí)細(xì)胞因子變化的程度與預(yù)后關(guān)系密切[3]。輔助性T細(xì)胞17（Th17） 細(xì)胞作為一種新發(fā)現(xiàn)的免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞，能夠分泌IL-17、IL-22，在機(jī)體炎性反應(yīng)中具有重要意義。IL-23能夠聯(lián)合IL-6刺激Th0細(xì)胞向Th17細(xì)胞轉(zhuǎn)化，進(jìn)而分泌IL-17、IL-22等促炎因子。本研究采用ELISA法對(duì)我院新生兒科2015年1月～2016年12月收治的116例新生兒感染性肺炎住院患兒血清細(xì)胞因子水平進(jìn)行檢測，以探討Th17細(xì)胞相關(guān)炎性細(xì)胞因子表達(dá)水平的變化及其臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1研究對(duì)象選擇2015年1月～2016年12月我院新生兒科收治的新生兒感染性肺炎患兒116例，全部患兒均符合感染性新生兒肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，其中重癥患兒56例（重癥組），輕癥患兒60例（輕癥組）；男62例，女54例；早產(chǎn)兒17例，足月兒99例；年齡 1～28d，平均（12.23±2.12）d；體重 1.83～5.47kg，平均（3.86±0.28）kg。選擇我院同期健康新生兒30例作為對(duì)照組，男15例，女15例，年齡1～28d，平均（15.54±3.78）d；體重 2.65～6.22kg，平均（4.78±0.52）kg；排除患有心血管疾病、其他急性疾病史患兒。兩組新生兒年齡、性別、體重等一般資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），具有可比性。研究獲得新生兒家長同意及我院醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法清晨采集空腹肝素抗凝靜脈血3ml，1 500min離心10min，留取血清于-80℃冰箱中冷凍保存，統(tǒng)一待檢。肺炎恢復(fù)期（一般在病程的2～3周，患兒臨床癥狀明顯好轉(zhuǎn)，肺部體征消失）患兒重新留取血清待檢。采用ELISA法檢測血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)水平，檢測試劑盒由北京全式金生物技術(shù)有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；Pearson相關(guān)系數(shù)分析各檢測指標(biāo)之間的相關(guān)性；各檢測指標(biāo)與疾病嚴(yán)重程度及活動(dòng)度的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)水平較對(duì)照組升高（P＜0.05）；重癥組顯著高于輕癥組，并且高于對(duì)照組（P＜0.05），見表 1。

表 1 患兒血清 IL-17、IL-22 和 IL-23 的表達(dá)（±s，ng/L）

表 1 患兒血清 IL-17、IL-22 和 IL-23 的表達(dá)（±s，ng/L）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與輕癥組比較，△P＜0.05

組別 n IL-17 IL-22 IL-23對(duì)照組 30 67.98±7.55 124.15±8.27 86.54±6.71患兒組 116 88.75±15.31* 151.94±14.51* 110.04±10.99*輕癥組 60 83.76±10.94* 146.04±9.65* 106.01±8.46*重癥組 56 94.11±16.47△*158.26±16.18△*114.35±11.80△*

2.2恢復(fù)期患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)經(jīng)臨床治療后，恢復(fù)期患兒IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)水平較急性期有所降低，但其表達(dá)水平仍高于對(duì)照組，恢復(fù)期IL-22的降低差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 恢復(fù)期患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)（±s，ng/L）

表2 恢復(fù)期患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)（±s，ng/L）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與患兒組比較，△P＜0.05

對(duì)照組 30 67.98±7.55 124.15±8.27 86.54±6.71患兒組 116 88.75±15.31 151.94±14.51 110.04±10.99恢復(fù)期 116 73.73±1.72△ 141.79±14.49*96.46±10.59*△

2.3患兒血清IL-17、IL-22和IL-23相關(guān)性分析患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)之間存在顯著正相關(guān)（r=0.677、0.632、0.740，P=0.000），相關(guān)性分析見圖1。

2.4患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)與肺炎嚴(yán)重程度及活動(dòng)度相關(guān)性分析Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血清IL-17、IL-22和IL-23表達(dá)水平與肺炎嚴(yán)重程度存在正相關(guān)（r=0.675、0.538、0.523，P＜0.05）。血清中IL-17、IL-22和IL-23表達(dá)水平與患兒血清CRP、ESR表達(dá)水平存在正相關(guān)（r=0.437、0.358、0.561、0.539、0.521、0.411，P＜0.05），見表 3。

圖1 患兒血清IL-17、IL-22、IL-23相關(guān)性分析

表3 患兒血清IL-17、IL-22和IL-23與肺炎的相關(guān)性分析

3 討論

新生兒感染性肺炎的免疫學(xué)病理生理變化機(jī)制十分復(fù)雜，患兒對(duì)不同病原體可產(chǎn)生不同的免疫應(yīng)答。感染性肺炎患兒體內(nèi)存在免疫功能紊亂，特異性抗體對(duì)疾病恢復(fù)起一定作用，但過度的免疫反應(yīng)往往引起更加嚴(yán)重的臨床癥狀及肺損傷[4]。因此患兒肺炎的發(fā)生除與嚴(yán)重的病原體感染有關(guān)外，在整個(gè)致病過程中起重要作用的是人體防御機(jī)制的過度激活和炎性細(xì)胞因子的大量釋放。

IL-17、IL-22作為Th17細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子，在機(jī)體炎性反應(yīng)中具有重要意義。IL-17、IL-22可以促進(jìn)T 細(xì)胞的活化，同時(shí)刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞產(chǎn)生如IL-6、IL-8、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞刺激因子（GM-CSF）和化學(xué)增活素及細(xì)胞黏附分子 1（cellular adhesion molecule 1，CAM-1）等多種細(xì)胞因子，從而導(dǎo)致炎癥的產(chǎn)生[5，6]。同時(shí)IL-17是T細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)早期啟動(dòng)因子，可以通過促進(jìn)釋放前炎性細(xì)胞因子來放大炎癥反應(yīng)。IL-17與受體結(jié)合后，可通過MAPK 激酶途徑和NF-kB途徑發(fā)揮其生物學(xué)作用[7，8]。IL-23作為IL-12家族的新成員，通過形成IL-23/IL-17信號(hào)通路可以促進(jìn)CD4+T細(xì)胞向輔助性T細(xì)胞17（Th17）細(xì)胞分化，維持Th17細(xì)胞穩(wěn)定和促進(jìn)Th17細(xì)胞增殖、分化，維持及促進(jìn)Th17 細(xì)胞生成 IL-17、IL-17F、IL-22、IL-6、腫瘤壞死因子-α及趨化因子C-C motif等，參與及放大炎癥性疾病的發(fā)生和發(fā)展；同時(shí)IL-23通過自分泌方式作用于樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生多種促炎因子[9～14]。

本研究中新生兒感染性肺炎患兒血清IL-17、IL-22和IL-23表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組；尤其是重癥患兒組顯著高于對(duì)照組，與輕癥患兒組比較也明顯升高?；純航?jīng)治療后，恢復(fù)期血清IL-17、IL-22和IL-23表達(dá)水平較急性期降低，雖然IL-22表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但表明血清IL-17、IL-22和IL-23 的表達(dá)水平與患兒病情有關(guān)。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，患兒血清IL-17、IL-22和IL-23相互之間存在顯著正相關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果相一致[11]，表明在患兒肺炎的發(fā)生發(fā)展過程中Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子存在相互作用，可以同時(shí)促進(jìn)機(jī)體的炎癥反應(yīng)。Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)患兒血清IL-17、IL-22、IL-23的表達(dá)水平與患兒肺炎嚴(yán)重程度存在正相關(guān)。同時(shí)，患兒血清IL-17、IL-22和IL-23表達(dá)水平與患兒血清CRP及ESR的表達(dá)水平也存在一定的正相關(guān)，血清CRP及ESR的表達(dá)水平與疾病活動(dòng)度密切相關(guān)，表明患兒血清IL-17、IL-22和IL-23的表達(dá)水平與患兒肺炎疾病活動(dòng)度存在正相關(guān)。

綜上所述，Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子（IL-17、IL-22和IL-23）在新生兒感染性肺炎患兒血清中存在差異表達(dá)，可做為患兒肺炎嚴(yán)重程度及疾病活動(dòng)度的臨床監(jiān)測指標(biāo)，但其具體免疫機(jī)制尚不明確，有待進(jìn)一步研究。

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