蔣會(huì)婷 鄭蘭紫 王婭瓊 耿利彬 張巍巍 馮寶立

呼吸道病毒感染是兒童急性呼吸道感染最常見的原因［1］，為了解北京市密云區(qū)兒童呼吸道傳染病的流行動(dòng)態(tài)和呼吸道病毒的感染狀況，現(xiàn)對(duì)2014年9月－2016年8月患病兒童的咽拭子樣本，進(jìn)行了8種呼吸道病毒的檢測(cè)，結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 樣本采集 2014年9月－2016年8月，因呼吸道感染到密云區(qū)醫(yī)院就診的患兒，包括急性上呼吸道感染病例，肺炎病例及重癥肺炎病例，三種類型病例的樣本比例為1∶2∶1。病例定義參照北京市呼吸道傳染病病原學(xué)監(jiān)測(cè)工作方案。每月隨機(jī)采集10件樣本，每周均衡分布，共采集了240件咽拭子樣本。

1.2 試劑與材料 呼吸道病毒采樣管為友康基業(yè)生物科技(北京)有限公司產(chǎn)品。病毒RNA提取試劑羅氏MagNA Pure LC2.0核酸提取試劑盒為Roche公司產(chǎn)品。呼吸道病毒核酸多重聯(lián)檢試劑盒為江蘇和創(chuàng)生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.3 核酸提取 取50 μL樣本，使用羅氏 MagNA Pure LC2.0型全自動(dòng)核酸提取儀提取病毒RNA，提取物用100 μL洗脫液溶解，立即置－70℃保存?zhèn)溆?，操作方法按照儀器使用說(shuō)明書。

1.4 實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè) 用PCR的方法檢測(cè)8種常見呼吸道病毒核酸，包括流感病毒(甲型流感病毒、乙型流感病毒)、副流感病毒、腺病毒、冠狀病毒、呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒、鼻病毒、博卡病毒。按照和創(chuàng)呼吸道病毒核酸多重聯(lián)檢試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行PCR體系配制。使用Roche 480型實(shí)時(shí)熒光PCR儀進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增，根據(jù)試劑盒4組16個(gè)檢測(cè)指標(biāo)熒光集團(tuán)信號(hào)的設(shè)定［2］，進(jìn)行結(jié)果判斷。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。所得數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道病毒病原譜檢出情況 在240份兒童呼吸道感染病例樣本中，99份樣本檢出呼吸道病毒，陽(yáng)性率為41.25%。其中流感病毒檢出陽(yáng)性率最高為9.58%，其次為副流感病毒和鼻病毒，檢出陽(yáng)性率為7.92%。還出現(xiàn)兩種病毒的混合感染共11例。分別出現(xiàn)人偏肺病毒和副流感病毒混合感染1例，鼻病毒和腺病毒混合感染4例，流感病毒和副流感病毒混合感染2例，鼻病毒和副流感病毒混合感染4例(表1)。

表1 2014年9月－2016年8月密云區(qū)呼吸道患兒呼吸道病毒病檢出情況(n=240)

2.2 不同季節(jié)檢出情況 對(duì)所檢測(cè)的呼吸道病毒的總體陽(yáng)性率而言，春季檢出陽(yáng)性率最高，為50.00%，夏季最低，為28.17%。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，不同季節(jié)陽(yáng)性檢出率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。其中，流感病毒檢出陽(yáng)性率在冬季(18.33%)和春季(16.67%)較高，副流感病毒檢出陽(yáng)性率在夏季(12.68%)和秋季(14.29%)較高。腺病毒檢出陽(yáng)性率最高的季節(jié)是秋季(6.12%)，冠狀病毒檢出陽(yáng)性率最高的季節(jié)是冬季(3.33%)，呼吸道合胞病毒檢出陽(yáng)性率最高的季節(jié)是冬季(13.33%)，人偏肺病毒檢出陽(yáng)性率最高的季節(jié)是春季(8.33%)，鼻病毒檢出陽(yáng)性率最高的季節(jié)是春季(10.00%)和秋季(14.29%，表2和3)。

表2 兒童呼吸道病毒感染的流行特征

2.3 不同年齡組患兒呼吸道病毒檢出陽(yáng)性率比較依據(jù)患兒年齡，分為0～、4～、7～14歲3個(gè)年齡組對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示0～歲年齡組呼吸道病毒檢出陽(yáng)性率最高，為43.81%，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，不同年齡組檢出陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，表2)。其中，4～歲組流感病毒檢出陽(yáng)性率最高，為14.08%;0～歲年齡組副流感病毒檢出陽(yáng)性率最高，為9.52%;7～14歲組鼻病毒檢出陽(yáng)性率最高，為7.81%，其中博卡病毒只在0～歲組有檢出。

表3 不同季節(jié)8種呼吸道病毒檢出情況

表4 不同年齡組8種呼吸道病毒檢出情況

2.4 不同性別患兒病毒檢出情況 男童檢出陽(yáng)性率為34.62%(45/130)，女童檢出陽(yáng)性率為49.09%(54/110)。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，性別之間檢出陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，表2)。

3 討論

3.1 調(diào)查表明，密云區(qū)兒童呼吸道病毒檢出陽(yáng)性率與文獻(xiàn)報(bào)道的北京地區(qū)兒童呼吸道病毒檢出陽(yáng)性率基本一致［3］。其中檢出陽(yáng)性率較高的是流感病毒、副流感病毒和鼻病毒，這與石偉先等［3］、荊紅波等［4］研究結(jié)果一致。

3.2 本研究發(fā)現(xiàn)，兒童呼吸道病毒檢出存在明顯的季節(jié)性，秋季和春季是檢出陽(yáng)性率較高的季節(jié)，這與北京地區(qū)春秋寒冷，氣溫晝夜溫差較大，大氣污染有關(guān)［5］，李權(quán)恒等［6］研究顯示，呼吸道病毒陽(yáng)性率與空氣質(zhì)量指數(shù)、PM2.5、NO2和SO2等空氣污染物有關(guān)。在春季中流感病毒、鼻病毒和人偏肺病毒檢出陽(yáng)性率高，夏季中副流感病毒檢出陽(yáng)性率高，秋季中副流感和鼻病毒檢出陽(yáng)性率高，冬季中流感病毒和呼吸道合胞病毒檢出陽(yáng)性率高，與有關(guān)研究結(jié)果一致［7－11］。整體趨勢(shì)是冬春季為兒童呼吸道傳染病流行高峰，與既往研究結(jié)果一致［11］。對(duì)于不同年齡組，呼吸道病毒檢出率無(wú)差異，這與有關(guān)研究結(jié)果不一致［12，13］。流感病毒，副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒和鼻病毒在各年齡組都有檢出，說(shuō)明各年齡段兒童對(duì)呼吸道病毒都易感，因?yàn)閮和牡挚沽?、免疫力較低，所以應(yīng)做好兒童呼吸道傳染病防病工作。呼吸道病毒檢出率與也性別有關(guān)，女童較男童易感，這與有關(guān)報(bào)道不同［13，14］，可能與檢測(cè)樣本數(shù)量有限以及本地區(qū)的一些未知因素有關(guān)，在以后要增加樣本量并進(jìn)行多層面的研究分析。

綜上所述，本研究對(duì)密云區(qū)兒童呼吸道傳染病病毒流行特征有一定的認(rèn)識(shí)。但是由于樣本量較少，也只檢測(cè)了病毒類病原，存在一定局限性。此外對(duì)于住院患兒也只檢測(cè)了上呼吸道樣本，對(duì)病毒的檢出勢(shì)必存在一定影響，今后應(yīng)該增加對(duì)下呼吸道樣本的采集和分析。

［1］俞曉燕，呂建新，譚文杰.呼吸道病毒感染核酸檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用進(jìn)展［J］.生物技術(shù)通訊，2011，22(5):743－746.

［2］李愛華，張鐵鋼，石偉先，等.三種呼吸道病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法比較［J］.中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2013，33(7):541－544.

［3］石偉先，彭曉旻，韓莉莉，等.北京地區(qū)兒童急性上呼吸道感染病毒病原學(xué)調(diào)查［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18(7):1263－1265.

［4］荊紅波，張爽，王鵬，等.九種呼吸道病毒在北京市順義地區(qū)人群中的流行特征分析［J］.國(guó)際病毒學(xué)雜志，2015，22(4):240 －244.

［5］陳玲，羅琳華，蔡建興.兒童呼吸道感染七項(xiàng)常見病毒病原學(xué)分析［J］.中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育，2016，8(2):50 －51.

［6］李權(quán)恒，高文杰，李金英，等.空氣污染與兒童急性呼吸道病毒感染的相關(guān)性研究［J］.中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2016，19(11):1259－1262.

［7］張愛榮，范秋霞，許青霞.2776例兒童急性呼吸道感染病原學(xué)檢測(cè)［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2016，26(8):1084－1086.

［8］王維，林書祥，李勝英，等.天津地區(qū)兒童急性呼吸道感染病毒病原檢測(cè)分析［J］.天津醫(yī)藥，2012，40(6):625－627.

［9］馬廣源，凌霞，鮑靜，等.2011－2014年無(wú)錫地區(qū)兒童急性呼吸道病毒感染病原譜研究［J］.中華產(chǎn)染病雜志，2016，34(3):170 －173.

［10］陸敏，曾玫，陸權(quán)，等.上海地區(qū)小兒急性病毒性下呼吸道感染臨床流行病學(xué)特征［J］.中國(guó)抗感染化療雜志，2005，5(3):152 －155.

［11］胡興文，王偉鵬.不同呼吸道病毒在武漢地區(qū)兒童中的流行特征分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2014，11(6):770－772.

［12］徐淼玲，陸灶其，梁大立，等.兒童呼吸道感染7種呼吸道病毒抗原檢測(cè)結(jié)果分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2016，13(6):813－815.

［13］朱以軍，包云光，王香梅，等.小兒經(jīng)濟(jì)積極性系呼吸道病毒感染的臨床流行病學(xué)特征［J］.國(guó)際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志，2015，42(3):170 －173.

［14］鐘慶濤，李靜媚，陳應(yīng)堅(jiān)，等.深圳市龍崗區(qū)0～14歲人群流感樣病例常見呼吸道病毒監(jiān)測(cè)學(xué)分析［J］.中國(guó)初級(jí)衛(wèi)生保健，2015，29(3):56 －58.