劉初銘 羅剛

【摘要】 目的 觀察膿毒癥患者的血清中MicroRNA-122的表達(dá)量在病程中的動(dòng)態(tài)變化情況， 并且對(duì)此變化情況與膿毒癥的發(fā)病程度之間關(guān)系進(jìn)行探討。方法 選取88例膿毒癥患者作為觀察組， 其中一般膿毒癥患者40例作為一般膿毒癥組、重癥膿毒癥患者48例作為重癥膿毒癥組;另選同期88例體檢健康人作為對(duì)照組， 采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）對(duì)對(duì)照組入組時(shí)及觀察組入組第1、3、5、7、14天血清中MicroRNA-122的表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)， 觀察所有研究對(duì)象MicroRNA-122表達(dá)情況， 并比較觀察組中不同組別的臨床資料差異。結(jié)果 重癥膿毒癥組序貫器官衰竭評(píng)定量表（SOFA）評(píng)分（9.7±

3.4）分、急性生理學(xué)與慢性健康狀況評(píng)估Ⅱ（APECHEⅡ）評(píng)分（18.9±6.5）分明顯高于一般膿毒癥組的（7.1±2.0）、（13.9±5.2）分， 慢性腎臟疾病發(fā)生率37.50%明顯高于一般膿毒癥組的12.50%， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。同時(shí)間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達(dá)量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 血清中MicroRNA-122的表達(dá)量可以作為膿毒癥診斷的特異性標(biāo)志物， 還能夠?qū)δ摱景Y患者的疾病嚴(yán)重程度做出預(yù)警， 具有推廣應(yīng)用的價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 血清MicroRNA-122;膿毒癥;診斷特異性標(biāo)志物;研究

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.024

膿毒癥是一種由于受到一些微生物感染所導(dǎo)致的臨床綜合癥， 如果不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)， 及時(shí)治療， 就有可能發(fā)展成膿毒癥休克， 甚至?xí)够颊叩亩鄠€(gè)器官出現(xiàn)功能性障礙[1， 2]。所

以， 作者選擇了對(duì)膿毒癥患者血清中MicroRNA-122的表達(dá)量的動(dòng)態(tài)變化情況進(jìn)行觀察， 從而進(jìn)一步探討了此變化情況與膿毒癥的發(fā)病程度之間的關(guān)系。具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2015年10月～2017年10月在本院進(jìn)行治療的88例膿毒癥患者作為觀察組， 其中一般膿毒癥患者40例作為一般膿毒癥組、重癥膿毒癥患者48例作為重癥膿毒癥組;另選同期88例體檢健康人作為對(duì)照組。觀察組年齡19～85歲， 平均年齡（55.4±18.6）歲。對(duì)照組年齡22～81歲，

平均年齡（57.2±17.1）歲。觀察組與對(duì)照組年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 實(shí)驗(yàn)主要儀器與試劑 儀器：MJ-Mini梯度PCR儀;試劑：mir Vana miRNA提取試劑盒、miRccute miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒、熒光定量檢測(cè)試劑盒;系統(tǒng)：實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)系統(tǒng) [3]。

1. 2. 2 數(shù)據(jù)采集 對(duì)觀察組患者的姓名、年齡、性別、病史等做好詳細(xì)的記錄?；颊呷朐汉蟮牡?天對(duì)患者的具體病情進(jìn)行估計(jì)并且做出評(píng)分[2]。將對(duì)照組的姓名、性別、年齡等基本信息也做好詳細(xì)記錄。

1. 2. 3 PNA提取和逆轉(zhuǎn)錄（RT）-PCR 對(duì)所有研究對(duì)象采靜脈外周血， 其中對(duì)照組入組時(shí)采血， 觀察組入組第1、3、5、7、14天采血。將血液中血清分離出來(lái)放在-80℃的冰箱內(nèi)保存， 等待測(cè)量。按照mirVana miRNA試劑盒對(duì)血清中的總RNA進(jìn)行提取。對(duì)提取出來(lái)的總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄， 隨后對(duì)RT的反應(yīng)體系進(jìn)行配制， 將配制好的反應(yīng)體系搖勻后再反轉(zhuǎn)錄（具體操作步驟可以參照試劑盒的使用說(shuō)明書(shū)）。根據(jù)PCR試劑盒的說(shuō)明書(shū)對(duì)PCR的反應(yīng)體系進(jìn)行確定 [4]。

1. 3 觀察指標(biāo) ①比較觀察組中不同組別的臨床資料差異， 指標(biāo)包括SOFA評(píng)分、APECHEⅡ評(píng)分、慢性腎臟病發(fā)生

情況。②比較對(duì)照組與觀察組不同時(shí)間血清MicroRNA-122表達(dá)情況的差異。③一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組相同時(shí)間點(diǎn)血清MicroRNA-122表達(dá)情況的差異。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正太分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);非正態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)（四分位數(shù)）表示， 采用Mann-Whitney U檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組臨床資料比較 重癥膿毒癥組SOFA評(píng)分（9.7±3.4）分、APECHEⅡ評(píng)分（18.9±

6.5）分明顯高于一般膿毒癥組的（7.1±2.0）、（13.9±5.2）分， 慢性腎臟疾病發(fā)生率37.50%明顯高于一般膿毒癥組的12.50%， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2. 2 觀察組與對(duì)照組血清miRNA-122表達(dá)量比較 觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2. 3 一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組血清miRNA-122表達(dá)量比較 同時(shí)間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達(dá)量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

膿毒癥是一種由于感染而引起的極其復(fù)雜的炎性反應(yīng)， 其造成的病死率是非常高的， 所以對(duì)膿毒癥的早期診斷和預(yù)后都極為重要。miRNA是一種極其微小的分子RNA， 其可以對(duì)蛋白碼的基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)[5-9]。蘇明環(huán)等[10]通過(guò)多年的研究證實(shí)了miRNA-122可以作為膿毒癥患者的血清標(biāo)志物。在本次研究中， 通過(guò)對(duì)不同程度膿毒癥患者和健康人的血清miRNA-122的表達(dá)量進(jìn)行觀察后發(fā)現(xiàn)， 一般膿毒癥組和重癥膿毒癥組SOFA評(píng)分、APECHEⅡ評(píng)分、慢性腎臟疾病發(fā)生情況比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達(dá)量均明顯低于對(duì)照組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這也進(jìn)一步說(shuō)明了血清miRNA-122可以作為早期膿毒癥的特異性診斷標(biāo)志物。另外， 同時(shí)間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達(dá)量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 也就間接的說(shuō)明了血清miRNA-122的表達(dá)量在對(duì)膿毒癥患者疾病的嚴(yán)重程度進(jìn)行預(yù)警方面具有非常重要的意義， 但本文未對(duì)其在膿毒癥中的功能機(jī)制做進(jìn)一步研究。

綜上所述， 血清中MicroRNA-122的表達(dá)量可以作為膿毒癥診斷的特異性標(biāo)志物， 還能夠?qū)δ摱景Y患者的疾病嚴(yán)重程度做出預(yù)警， 具有推廣應(yīng)用的價(jià)值。

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[收稿日期：2017-11-28]