李海歐 ，陳 琪 ，林英華 ，雷雯樸 ，孫 耀 ，段鵬飛 ，陳治宇 ，盛 華 ，金 蓉 ，賽 那

（1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110；2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110）

獨(dú)活是傘形科植物重齒毛當(dāng)歸（Angelica pubescens）的干燥根。秋末莖、葉枯萎或春初苗剛發(fā)芽時(shí)采挖，除掉須根以及泥沙，用烘干機(jī)烘至半干，放置2～3 d，待發(fā)軟后再烘至全干狀態(tài)。根莖略呈圓柱形，下部分2～3個(gè)分枝或者更多，長10～30cm。根頭部膨大，呈圓錐狀，多有橫皺紋，直徑1.5～3.0 cm，頂端有莖、葉的殘基或者凹陷，表面呈灰褐色或棕褐色，具有縱皺紋，有隆起的橫長皮孔以及稍突起的細(xì)根痕。質(zhì)地較硬，受潮則會變軟，斷面皮部顯灰白色，具有多數(shù)散在的棕色油室，木部灰黃色至黃棕色，從而形成層環(huán)棕色。具有特異香氣，味苦辛、微麻舌。獨(dú)活始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品，具有祛風(fēng)除濕、通痹止痛的功效，自古以來為治療風(fēng)濕痹痛的要藥。據(jù)《中國藥典》記載，獨(dú)活性味微溫，主要用于治療風(fēng)寒濕痹、腰膝疼痛、少陰伏風(fēng)頭痛等癥［1］。眾醫(yī)家又對獨(dú)活進(jìn)行了深入研究，輔以其他藥味制成了復(fù)方，應(yīng)用十分廣泛。隨著現(xiàn)代藥理學(xué)研究的深入，獨(dú)活的主要功效已經(jīng)逐步地體現(xiàn)在某一類成分，甚至精細(xì)到某種成分上。

目前，我國藥用獨(dú)活因產(chǎn)地不同而形成不同的商品，著名的有川獨(dú)活、資丘獨(dú)活、恩施獨(dú)活、巴東獨(dú)活、浙獨(dú)活等［2］。從古今多部本草學(xué)論著來看，獨(dú)活的原植物是有多種的，大多數(shù)屬于傘形科當(dāng)歸屬和獨(dú)活屬植物，也有五加科樟木屬植物，所以其混淆品很多［3-5］。獨(dú)活的主要成分主要包括香豆素類和揮發(fā)油類，還有少量甾醇和糖類成分，其中，香豆素類主要包括甲氧基歐芹素、香柑內(nèi)酯、花椒毒素、傘形花內(nèi)酯、佛手酚、歐芹烯酚、當(dāng)歸醇A、當(dāng)歸醇 B 等［6-9］；揮發(fā)油類主要包括樅油烯、葎草烯、α-蒎烯、α-雪松烯、β-雪松烯、百里香酚、對甲基苯酚等［10-11］。其抗腫瘤活性成分主要是甲氧基歐芹素、補(bǔ)骨脂素、香柑內(nèi)酯、花椒毒素、傘形花內(nèi)酯、異歐前胡素。

獨(dú)活油具有特異性氣味，難溶于水，具有較強(qiáng)的揮發(fā)性，穩(wěn)定性較差，對光敏感，且因其為液體而不利于進(jìn)一步制備制劑。近年來，環(huán)糊精包合技術(shù)在藥學(xué)中應(yīng)用逐漸廣泛。將藥物制成環(huán)糊精包合物后，可以使液體藥物粉末化從而防止揮發(fā)，還可掩蓋藥物的不良?xì)馕杜c刺激性，且可防止其藥物有效成分氧化分解。該研究采用正交試驗(yàn)法和綜合評分法對獨(dú)活揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合工藝進(jìn)行優(yōu)化，以期為提高獨(dú)活有效成分的利用效率提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 藥材及試劑：獨(dú)活，產(chǎn)地四川，購自呼和浩特市某藥店。 β-環(huán)糊精（β-CD）。

1.1.2 儀器及設(shè)備：揮發(fā)油提取器，循環(huán)水式真空泵，數(shù)控超聲波清洗器，電子天平，恒溫箱。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 包合方法：取β-CD 8.0 g，與60 mL蒸餾水混合加熱至40℃，于40 kHz超聲波下緩慢滴加揮發(fā)油乙醇溶液（1∶1，各 0.5 mL）1.0 mL，超聲 60 min，冷藏24 h后抽濾，加入少量石油醚洗去未包合的揮發(fā)油，低溫真空干燥4 h，得到白色塊狀包合物。

1.2.2 包合物評價(jià)指標(biāo)的測定：取獨(dú)活揮發(fā)油0.5 mL置于圓底燒瓶中，加入蒸餾水50 mL，水蒸氣蒸餾法提取至油量不再增加，讀取揮發(fā)油體積，按公式1計(jì)算揮發(fā)油空白回收率。以獨(dú)活揮發(fā)油的包合率（按公式2計(jì)算）和包合物收率（按公式3計(jì)算）為指標(biāo)，評價(jià)包合工藝的效果。

1.2.3 包合工藝的綜合評價(jià)指標(biāo)：包合率越高，揮發(fā)油包合效果越好，權(quán)重系數(shù)定為0.8。收率越高，損耗越低，權(quán)重系數(shù)定為0.2。按公式4計(jì)算包合工藝的綜合評分。

1.2.4 正交試驗(yàn)：選取3個(gè)影響包合工藝效果的關(guān)鍵因素，即超聲時(shí)間（A）、揮發(fā)油與β-CD的比例（B）、水與 β-CD 的比例（C），每個(gè)因素設(shè)置 3個(gè)水平，采用3因素3水平正交設(shè)計(jì)法進(jìn)行正交試驗(yàn)，篩選最佳包合工藝條件組合。包合工藝考察因素及水平見表1。

表1 包合工藝考察因素及水平

2 結(jié)果與分析

獨(dú)活揮發(fā)油的包合工藝正交試驗(yàn)結(jié)果見表2。 比較 3個(gè)因素的均值 K1、K2、K3可知，最佳的包合工藝條件為A1B3C3，即超聲時(shí)間為30 min，揮發(fā)油與 β-CD 的比例為 1∶10（mL∶g），水與 β-CD 的比例為 11∶1（mL∶g）。 方差分析結(jié)果表明（見表 3），各因素沒有顯著性差異，故以直觀分析結(jié)果確定最佳包合工藝為A1B3C3。

3 討論

獨(dú)活揮發(fā)油因具有難溶于水、生物利用度差、味苦、不宜口服等特點(diǎn)，限制了其在臨床中的應(yīng)用。在傳統(tǒng)的制劑工藝中，經(jīng)常將提取的揮發(fā)油溶于少量乙醇等溶劑稀釋后，噴灑到顆粒中，但在生產(chǎn)和儲存過程中極易揮發(fā)損失。而β-CD分子是7個(gè)葡萄糖以1，4-糖苷鍵連接的筒狀結(jié)構(gòu)，筒內(nèi)壁空腔直徑為0.6～1.0 nm。由于葡萄糖的羥基分布在筒的兩端并在外部，糖苷鍵原子位于筒的中部并在筒內(nèi)，故β-CD的兩端和外部為親水性，而筒的內(nèi)部為疏水性，可借助范德華力將大小和形狀合適的藥物分子包合于環(huán)狀結(jié)構(gòu)中，從而形成超微囊狀包合物（又稱分子膠囊）。而且，β-CD與藥物包合是一種物理過程，不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，可使藥物保持其原有性質(zhì)和作用；揮發(fā)油嵌入環(huán)狀中空的圓筒型分子中被包合后，可以增加藥物的穩(wěn)定性。因此，對獨(dú)活揮發(fā)油進(jìn)行包合，可使液體粉末化，矯臭矯味，有效減少揮發(fā)油的揮發(fā)，并可增強(qiáng)其穩(wěn)定性，增大水溶性，提高生物利用度，從而提高療效。在制備獨(dú)活揮發(fā)油β-CD的過程中，主成分的投入量對包合效果有較大影響。主分子投入量的增加在一定范圍內(nèi)可提高包合效果，但過于提高主分子的投入量反而會降低包合物的含油率。

表2 揮發(fā)油的包合工藝正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 方差分析結(jié)果

4 結(jié)論

獨(dú)活揮發(fā)油β-環(huán)糊精最佳包合工藝條件為：超聲時(shí)間 30 min，揮發(fā)油：β-CD 為 1∶10（mL∶g），水∶β-CD 為 11∶1（mL∶g）。

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