溫宗華，周秀堅 （廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院病理科，廣西 南寧 530021）

Survivin是一種凋亡抑制蛋白，在腫瘤組織中的過表達(dá)與生存期縮短、預(yù)后不良、對治療抵抗和加速復(fù)發(fā)有關(guān)［1］。βcatenin是Wnt／β-catenin信號通路的關(guān)鍵分子，與多種腫瘤惡性進(jìn)展密切相關(guān)［2］。最近有研究結(jié)果表明β-catenin和Survivin在促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中具有協(xié)同促進(jìn)作用［3-4］，而β-catenin和Survivin在鼻咽癌中的表達(dá)及其相關(guān)性研究較少。本研究采用免疫組化法檢測β-catenin和Survivin在鼻咽癌組織中的表達(dá)，并分析兩者在鼻咽癌組織表達(dá)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集我院病理科2016年～2017年存檔的鼻咽癌石蠟組織標(biāo)本94例，均經(jīng)臨床病理診斷為未分化非角化性癌，均未合并其他惡性腫瘤，另選取正常鼻咽黏膜石蠟組織標(biāo)本40例作為對照組。

1.2 研究方法：免疫組織化學(xué)染色采用EnVision兩步法，檢測抗體包括β-catenin和Survivin，均購自北京中杉金橋生物技術(shù)公司，根據(jù)抗體說明書及實驗室規(guī)范進(jìn)行操作，常規(guī)設(shè)立陽性和陰性對照。

1.3 觀察指標(biāo)以兩組研究對象的β-catenin和Survivin蛋白表達(dá)情況為觀察指標(biāo)，β-catenin表達(dá)位于胞膜，并呈連續(xù)棕褐色線性為正常表達(dá)，胞膜不連續(xù)和胞質(zhì)染色或胞質(zhì)、胞核同時染色或不著色均為異位表達(dá)，Survivin以細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)明顯的棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞標(biāo)志。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，各組間蛋白表達(dá)差異采用χ2檢驗，Spearman相關(guān)分析β-catenin和Survivin蛋白的相關(guān)性，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 β-catenin和Survivin在鼻咽癌及正常組織中的表達(dá)情況：94例NPC組織β-catenin異位表達(dá)率為72.3%（68／94），40例正常鼻咽黏膜的陽性表達(dá)率為12.5%（5／40），NPC患者中β-catenin的異位表達(dá)率明顯高于正常鼻咽黏膜，兩者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。Survivin主要定位于細(xì)胞核內(nèi)，94例NPC組織Survivin的陽性表達(dá)率為68.1%（64／94），40例正常鼻咽黏膜的陽性表達(dá)率為17.5%（7／40），NPC患者中Survivin的陽性表達(dá)率明顯高于正常鼻咽黏膜，兩者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1。

2.2 β-catenin和Survivin在鼻咽癌中表達(dá)的相關(guān)性：β-catenin異位表達(dá)率和Survivin陽性表達(dá)在鼻咽癌呈正相關(guān)，兩者共陽性53例，共陰性15例，僅Survivin陽性11例，僅β-catenin陽性15例，r＝0.342，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

圖1 （A）正常鼻咽黏膜上皮表達(dá)β-catenin，呈細(xì)胞膜的連續(xù)棕褐色線性染色EnVision法高倍放大；（B）鼻咽癌瘤細(xì)胞異位表達(dá)β-catenin，呈胞膜不連續(xù)和胞質(zhì)染色 EnVision法高倍放大；（C）正常鼻咽黏膜上皮Survivin呈陰性表達(dá)EnVision法 高倍放大；（D）鼻咽癌瘤細(xì)胞Survivin陽性表達(dá)，呈胞膜胞核染色EnVision法高倍放大

3 討論

鼻咽癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制尚未完全闡明。有研究發(fā)現(xiàn)Wnt／β-catenin信號通路的激活參與了鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展［5］，β-catenin在鼻咽癌組織存在異位表達(dá)［6］。Wnt信號通路是決定細(xì)胞增殖和凋亡的關(guān)鍵通路，它的閉合決定著細(xì)胞的增殖分化以及惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的過程。β-catenin是Wnt信號通路的關(guān)鍵調(diào)控因子，其胞質(zhì)積聚并核轉(zhuǎn)位是通路的關(guān)鍵步驟。Wnt信號激活時，β-catenin在胞質(zhì)中大量增殖和核轉(zhuǎn)位，啟動相應(yīng)靶基因的轉(zhuǎn)錄，在細(xì)胞的增殖、分化、轉(zhuǎn)移和凋亡中起重要作用［7］。Survivin是凋亡抑制蛋白（IAP）家族中的成員之一，于1997年由耶魯大學(xué)的Altieri等人首次在人類基因組庫中篩選分離出來，Survivin蛋白分子量在IAP家族中最小，僅為16.5kDa，但其具有強(qiáng)大的抗凋亡作用，是經(jīng)典Wnt信號通路的下游靶基因［8］。已有大量文獻(xiàn)證實Survivin作為協(xié)同基因參與了Wnt／β-catenin信號通路［3-4］，也有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)它在鼻咽癌存在高表達(dá)［9］。鼻咽癌中Survivin是否也和其他腫瘤一樣，參與了Wnt／β-catenin信號通路，未見報道。因此本研究采用免疫組織化學(xué)法檢測94例鼻咽癌及正常黏膜組織中Survivin和β-catenin蛋白表達(dá)情況。結(jié)果顯示，鼻咽癌組織Survivin的陽性表達(dá)率明顯高于正常黏膜組織，兩者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），鼻咽癌組織β-catenin的異位表達(dá)率明顯高于正常黏膜組織，兩者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。鼻咽癌組織Survivin表達(dá)和β-catenin異位表達(dá)在呈正相關(guān)（r＝0.342，P＜0.05）。以上結(jié)果表明，Survivin和β-catenin在鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展中起到協(xié)同促進(jìn)作用，這一結(jié)果與其他作者在其他類型腫瘤的研究結(jié)果一致［10-11］，但具體的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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