和月生

在病理檢查的過程中, 臨床的診斷結(jié)果會受到組織染色質(zhì)量的影響, 而診斷的結(jié)果會對臨床治療方案產(chǎn)生影響, 從而對臨床治療的有效率以及安全性造成影響［1］。作為臨床疾病診斷的“金標準”, 病理診斷因具有較高的準確率而成為臨床常用的疾病診斷方式。病理診斷的準確性除了與病理醫(yī)師的診斷水平有關(guān)之外, 對病理組織切片的處理效果和染色效果也會對病理診斷的準確率造成一定的影響, 如果操作人員的技術(shù)掌握程度較低, 且對病理組織切片處理不當, 則會嚴重影響到病理診斷的準確程度［2］。在對病理組織進行制片處理的過程中, 染色處理是關(guān)鍵環(huán)節(jié), 染色質(zhì)量的高低會影響到病理診斷結(jié)果的準確性。目前病理診斷存在標本固定時間不規(guī)范、試劑濃度不合理、組織脫水不足等諸多弊端,導(dǎo)致制片質(zhì)量較差, 增加診斷難度, 影響病理診斷的準確性,因此, 改進染色技術(shù)顯得尤為重要。本文就HE染色技術(shù)在臨床病理診斷中的應(yīng)用價值展開研究, 現(xiàn)將具體的研究內(nèi)容分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院病理科2016年5月～2017年5月60張宮頸組織的石蠟切片作為研究對象, 其中30張為HE染色改進前的石蠟切片, 30張為HE染色改進后的石蠟切片,HE染色處理均在相關(guān)操作標準下嚴格進行。

1.2 方法

1.2.1 HE染色方法 采用人工染色方法, 要求技術(shù)人員在取材的過程中保證嚴格按照相關(guān)標準進行操作。要求技術(shù)人員在小標本制片的過程中盡量縮短標本的脫水時間和固定時間。技術(shù)人員按照宮頸組織切片染色SOP文件進行染色,采用二甲苯脫蠟3缸, 5 min/缸。過無水乙醇2缸, 5 min/缸,95%乙醇1缸3 min, 90%乙醇1缸3 min、85%乙醇1缸1 min,隨后再用蒸餾水洗3 min。用蘇木精染色3～5 min后, 采用濃度為1%的鹽酸酒精分化5～10 s, 用蒸餾水清洗2 min, 再用稀氨水反藍。技術(shù)人員應(yīng)注意對細胞核染色深度進行觀察,根據(jù)顏色深淺, 進行再次分化或再染色操作。用醇溶性伊紅液染色10～20 s, 可根據(jù)情況適當調(diào)整染色時間, 再梯度酒精脫水, 85%乙醇1缸10 s, 90%乙醇1缸20 s, 95%乙醇1缸30 min, 無水乙醇2缸, 3 min/缸, 隨后用二苯甲透明3缸,3 min/缸, 中性樹膠封片, 并粘貼標簽。

1.2.2 HE染色技術(shù)改進方法 針對不同大小的宮頸組織標本的特點分別進行相應(yīng)脫水、固定以及染色等操作, 染色時確保細胞核變成藍色。細胞間質(zhì)的顏色為粉紅或桃紅, 紅血球為橘紅色, 彈力纖維為亮粉紅色, 嗜酸性顆粒為鮮紅色,蛋白性液體為粉紅色, 膠原纖維為淡粉紅色。為了降低組織脫落的發(fā)生率, 對宮頸組織進行烤片處理, 完成后將烤片的溫度降低到與室溫相同的水平, 再對宮頸組織進行染色處理。在染色的過程中蘇木精多次被稀釋, pH(氫離子濃度)發(fā)生改變, 因此, 在染色架經(jīng)水瀝干20 s后放入蘇木精缸中, 再滴入2滴冰醋酸, 使酸堿中和, 使染色具有一致性。

1.3 觀察指標 比較HE染色技術(shù)改進前和HE染色技術(shù)改進后染色標準率。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

HE染色技術(shù)改進前染色標準率為73.33%, HE染色技術(shù)改進后染色標準率為93.33%, HE染色技術(shù)改進前后染色標準率比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 HE染色技術(shù)改進前和改進后染色標準率比較［n(%)］

3 討論

染色質(zhì)量對臨床病理檢查的診斷結(jié)果有很大的影響, 可對疾病治療的方案產(chǎn)生影響, 進而影響患者的治療效果。而取材操作、時間等和組織HE染色的質(zhì)量有很大的關(guān)系, 因此,進行組織染色時, 技術(shù)人員應(yīng)在相關(guān)操作標準的指導(dǎo)下進行染色操作［3］。由于HE染色操作是在物理和化學共同作用下進行的工作, 組織細胞的取材、脫水、固定以及切片的質(zhì)量等多種因素均會對HE染色的結(jié)果造成影響, 因此技術(shù)人員應(yīng)加強對HE染色涉及到的相關(guān)理化學知識的重視, 對不同大小的標本進行針對性處理, 根據(jù)標本的大小和厚薄制定合理的固定以及脫水時間［4,5］。本研究中的宮頸組織內(nèi)部有大量的細微小孔, 染料滲透后和組織牢固結(jié)合, 染料被組織吸收, 逐漸溶解和擴散。

切片組織的結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜, 技術(shù)人員在使用染色劑后,應(yīng)在較短的時間內(nèi)使染色劑和組織充分結(jié)合, 從而確保各組織都能徹底染色。病理細胞存在酸性分子, 而酸性分子會與染色劑中的陽離子結(jié)合, 從而形成固定分子；而病理細胞中含有的堿性分子可以與染色劑中的陰離子結(jié)合, 會使固定作用得以強化, 從而保持細胞活性平穩(wěn), 并維持組織結(jié)構(gòu),將其與活體組織之間存在的誤差降低, 從而提高檢查的準確性［6,7］。本次研究結(jié)果顯示, 改進病理技術(shù)HE染色后, 染色標準率顯著高于技術(shù)改進前(93.33% VS 73.33%), 差異具有統(tǒng)計學意義 (P＜0.05)。

綜上所述, 病理技術(shù)中的HE染色技術(shù)在病理診斷中的意義重大, 技術(shù)人員應(yīng)不斷提高和改進HE染色的操作技術(shù),根據(jù)組織類型進行相對應(yīng)的固定、脫水、切片、染色等操作,從而提高切片質(zhì)量, 提高染色標準率, 進而促進病理診斷準確性的提升, 最終保證臨床治療效果。

［1］ 馬峰, 劉仲祥.病理技術(shù)HE染色用于病理診斷中的價值分析.中國實驗診斷學, 2015, 19(12):2103-2104.

［2］ 邢菲菲.分析HE染色技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用.世界最新醫(yī)學信息文摘, 2017, 17(31):8-9.

［3］ 鄭樣貞.分析HE染色技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用.中國社區(qū)醫(yī)師, 2016, 32(17):109, 111.

［4］ 鄭菲, 陳培瓊, 王玉環(huán).HE染色在臨床病理診斷中的應(yīng)用研究.中外醫(yī)療, 2016, 35(30):17-18, 21.

［5］ 段成兵.探討病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用.世界最新醫(yī)學信息文摘, 2017, 17(16):148.

［6］ 王朝暉.病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用效果觀察.醫(yī)藥前沿, 2016, 6(13):37-38.

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