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        食品中沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

        2018-04-21 11:41:20趙粒岑
        科學(xué)與財(cái)富 2017年36期
        關(guān)鍵詞:沙門氏菌食品檢測(cè)

        趙粒岑

        摘 要:食品安全檢測(cè)一直是國(guó)家發(fā)展中關(guān)注的重點(diǎn),它與人們的生命安全有著密切的聯(lián)系。在近幾年的發(fā)展中,相關(guān)食品檢測(cè)部門逐漸提高了對(duì)食品中沙門氏菌檢測(cè)的重視。一方面是由于傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)不能滿足現(xiàn)階段檢測(cè)工作的需要,如果不能對(duì)相應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行創(chuàng)新,那么就會(huì)影響食品檢測(cè)的效率和質(zhì)量。另一方面是由于沙門氏菌檢測(cè)技術(shù)具有一定的專業(yè)性和復(fù)雜性,需要檢測(cè)團(tuán)隊(duì)能夠全面的了解與掌握檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用方式。本文就食品中沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù)方面的內(nèi)容進(jìn)行簡(jiǎn)單的論述,僅供參考。

        關(guān)鍵詞:沙門氏菌;食品;檢測(cè)

        隨著國(guó)家整體實(shí)力的提升與進(jìn)步,大量先進(jìn)的技術(shù)手段被應(yīng)用到了各行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展中,為國(guó)家建設(shè)與發(fā)展提供有利條件的同時(shí),為技術(shù)性工作的開展奠定良好的基礎(chǔ)。食品安全質(zhì)量檢測(cè)工作在國(guó)家發(fā)展中扮演著重要的角色,近年來相關(guān)科研團(tuán)隊(duì)也對(duì)相應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行研究與探討。沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù)就對(duì)食品安全質(zhì)量檢測(cè)工作有著重要的意義和影響,需要相關(guān)工作團(tuán)隊(duì)能夠全面的了解與掌握檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用要點(diǎn)和注意事項(xiàng)。

        一、沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值

        沙門氏菌主要寄居在人類或動(dòng)物的腸道中,具有抵抗外界能力強(qiáng)以及耐膽鹽等特點(diǎn)。當(dāng)人們或動(dòng)物感染沙門氏菌之后,會(huì)出現(xiàn)腸胃炎以及敗血癥等情況,而且病菌的傳染性也較高,對(duì)人體有著嚴(yán)重的傷害。由于人們使用的食品中經(jīng)常攜帶沙門氏菌病毒,如果相關(guān)食品檢測(cè)團(tuán)隊(duì)沒有按照規(guī)范的流程步驟或者技術(shù)對(duì)其其進(jìn)行檢測(cè),導(dǎo)致攜帶沙門氏菌的食品流入人們的生活中,那么就會(huì)嚴(yán)重威脅人們的生命安全。

        所以采用快速檢測(cè)技術(shù)對(duì)沙門氏菌進(jìn)行檢測(cè),不僅能夠及時(shí)的發(fā)現(xiàn)與處理帶有沙門氏菌的食品,還能在很大程度上降低人們受到傷害的風(fēng)險(xiǎn)。在近幾年的發(fā)展中,國(guó)家相關(guān)部門不斷提高對(duì)食品中沙門氏菌檢測(cè)的重視,并對(duì)相應(yīng)快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用要點(diǎn)和原理等進(jìn)行了深入的研究。對(duì)于食品檢測(cè)團(tuán)隊(duì)而言,提高快速檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用的培訓(xùn)與指導(dǎo),對(duì)相關(guān)工作的開展也有著重要的意義和影響。

        另外,沙門菌就從數(shù)量上來說是世界上比較常見的細(xì)菌種類之一,在我國(guó),食物中毒問題中首要的也是由于沙門菌而產(chǎn)生的中毒問題,人類受到細(xì)菌感染的主要的來源也是受到沙門菌污染的相關(guān)食品,如:肉和奶等,因此食品、醫(yī)療衛(wèi)生以及商檢等部門對(duì)沙門菌的檢測(cè)是相當(dāng)嚴(yán)格。沙門氏菌中毒常常是大面積的,致病速度快,給人類健康帶來極大威脅。繁雜的各類生化反應(yīng)型,使常規(guī)檢驗(yàn)程序復(fù)雜繁瑣、耗時(shí)費(fèi)力,不僅給檢驗(yàn)部門帶來沉重的負(fù)擔(dān),而且還使產(chǎn)品運(yùn)轉(zhuǎn)和倉(cāng)貯的時(shí)間延長(zhǎng),費(fèi)用增加。

        提高檢測(cè)技術(shù)是有效控制該菌的重要手段,尤其是大面積普查時(shí)更需要快速簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法。沙門菌污染的快速檢測(cè),一方面有利于減少食物中毒和保證食品衛(wèi)生,另一方面有利于及早地發(fā)現(xiàn)傳染源,并有效的阻斷其傳播途徑。目前對(duì)沙門氏菌的治療為大量使用或?yàn)E用抗生素,從而忽視了對(duì)傳染源和傳播途徑的綜合防控,因此對(duì)沙門氏菌分離株耐藥性的監(jiān)測(cè)是意義重大的。

        二、沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用原理

        檢測(cè)食品中沙門氏菌的方式有很多,食品安全質(zhì)量檢測(cè)部門要想提高食品中沙門氏菌的檢測(cè)效率和質(zhì)量,那么就要對(duì)快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用原理進(jìn)行全面的了解與掌握。對(duì)于不同類型的快速檢測(cè)技術(shù),相關(guān)檢測(cè)團(tuán)隊(duì)也要對(duì)其進(jìn)行深入的研究與探討。

        1、Transia法

        沙門氏菌,最快的速度,操作時(shí)間可以縮短每個(gè)檢測(cè)。它是基于雙抗體夾心ELISA法中,使用的抗體的混合物,以確保所有沙門氏菌血清型的檢測(cè)。固態(tài)反應(yīng)是一種微量反應(yīng)板的有形或無形的條紋。特異的單克隆抗體用于沙門氏菌,收拾鎖孔。小在第一階段(沙門氏菌特異的單克隆抗體及多克隆抗體的混合物)與復(fù)雜的樣品和抗體。延時(shí),沙門氏菌抗原和抗體包被的,以形成復(fù)合材料接頭組件:?jiǎn)慰寺】贵w沙門氏菌抗原-抗體。洗滌后,每孔為底物溶液和顯色溶液,以顯示復(fù)合酶催化氧化顯色,藍(lán)色。加入反應(yīng)終止液終止催化反應(yīng)后,將反應(yīng)混合物酸化,從藍(lán)色到黃色的顏色變化。

        ELISA方法可用于選擇性富集和熱沖擊的效果,沙門氏菌抗原特異的食品和環(huán)境樣品的釋放。如使用李Zhaogun的樣品制備方法,可大大縮短檢測(cè)時(shí)間,此方法可以在沒有酶標(biāo)儀在實(shí)驗(yàn)室條件下,從這個(gè)角度來看,ELISA微孔板Transia沙門氏菌板檢測(cè)方法的LiZhaogun免疫反應(yīng)卡。

        2、夾心免疫反應(yīng)檢測(cè)方法

        膜帶固相反應(yīng),包括抗沙門氏菌抗體染色染料共軛墊浸泡,抗沙門氏菌抗體固定膜反應(yīng)區(qū)。濃縮,濃縮液移樣孔管,其吸收,如沙門氏菌抗原的存在的樣品,它們的效果和偶聯(lián)物,抗體,然后移動(dòng)到膜的結(jié)合被固定在膜反應(yīng)區(qū),顯示在響應(yīng)窗口的色帶。最后,結(jié)果可以讀取在5-7分鐘。該方法也適用于非酶標(biāo)記儀器實(shí)驗(yàn)室。樣品的制備方法,例如作為使用李Zhaogun,可以縮短檢測(cè)時(shí)間,可以在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行。

        3、實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)

        實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是近年來廣泛應(yīng)用于沙門氏菌快速檢測(cè)的一種方法。采用TaqManPCR擴(kuò)增沙門氏菌D型菌株特有的sefA基因,使用該方法與常規(guī)培養(yǎng)法對(duì)經(jīng)過同質(zhì)加工處理的雞蛋樣本進(jìn)行檢測(cè),其結(jié)果與常規(guī)培養(yǎng)法獲得的結(jié)果100%一致。但是該方法只需要2天,而常規(guī)方法需要5天,而且在雞蛋樣本中的靈敏度為1CFU/600g,大大提高了低樣本量檢測(cè)效率。

        國(guó)內(nèi),相關(guān)科研人員等建立了快速、敏感、特異以及準(zhǔn)確定量檢測(cè)沙門氏菌的FQ.PCR方法。采用沙門氏菌高度保守序列fimY,設(shè)計(jì)特異性引物和探針,通過對(duì)反應(yīng)體系和條件的優(yōu)化,然后進(jìn)行特異性和適用性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明用FQ.PCR方法和國(guó)標(biāo)法檢出的陽(yáng)性樣本數(shù)和檢出率基本一致,準(zhǔn)確率達(dá)99.17%。該FQ.PCR檢測(cè)試劑可應(yīng)用于食品衛(wèi)生監(jiān)管、商品檢驗(yàn)檢疫以及臨床診斷等領(lǐng)域。建立的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法耗時(shí)約2h,是一種快速的檢測(cè)方法。

        通過檢測(cè)患者肛拭子標(biāo)本,發(fā)現(xiàn)該方法對(duì)沒有經(jīng)過增菌的標(biāo)本檢測(cè)效率和經(jīng)過增菌的檢測(cè)效率完全一致,而且靈敏度較高,在減少標(biāo)本增菌時(shí)能明顯提高檢測(cè)陽(yáng)性率。這一方法可以大大縮短報(bào)告結(jié)果的時(shí)間,快速鑒定突發(fā)性食物中毒事件中的病原體。基于inv基因簇設(shè)計(jì)的引物具屬特異性,可用于鑒別沙門菌,盡管與極少數(shù)沙門菌菌株缺少invA基因的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有矛盾,但通過檢查invA基因來確定沙門菌的存在已經(jīng)成為共識(shí)。

        三、結(jié)束語(yǔ)

        如今,相關(guān)食品安全檢測(cè)部門已經(jīng)能在實(shí)際工作中,科學(xué)合理的應(yīng)用沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù),一些科研團(tuán)隊(duì)還會(huì)對(duì)快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用原理和理念進(jìn)行深入的研究,從而對(duì)檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步的創(chuàng)新,從而為日后食品檢測(cè)工作的開展提供有利條件。對(duì)于沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用過程中存在的難點(diǎn)問題,相關(guān)食品檢測(cè)團(tuán)隊(duì)也會(huì)根據(jù)實(shí)際情況,對(duì)問題產(chǎn)生的原因進(jìn)行相應(yīng)的分析,從而找到有效的控制方式,提高快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值和效果。相信在未來的發(fā)展中,食品安全問題會(huì)得到進(jìn)一步的環(huán)節(jié),越來越多先進(jìn)的技術(shù)手段也會(huì)被應(yīng)用到食品安全檢測(cè)工作中,為人們健康與安全提供保障。

        參考文獻(xiàn):

        [1]羅榮, 任秀, 崔生輝. 食品中沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào), 2016, 7(4):1468-1472.

        [2]章偉帆. 沙門氏菌快速檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 臺(tái)灣農(nóng)業(yè)探索, 2013, 123(4):66-70.

        [3]李杰, 丁承超, 翟續(xù)昭,等. 沙門氏菌檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 微生物學(xué)雜志, 2017, 37(4).

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