李雪明

摘要：隨著研究的深入全自動(dòng)生化分析儀的應(yīng)用有效提升了檢驗(yàn)速度和質(zhì)量，因此分析儀各項(xiàng)參數(shù)的設(shè)置直接影響檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，因此本文著重討論自動(dòng)生化分析儀的參數(shù)設(shè)置，以此提高生活檢測(cè)效率，減輕工作人員的勞動(dòng)強(qiáng)度。

關(guān)鍵詞：自動(dòng)生化分析儀 參數(shù)設(shè)置

全自動(dòng)生化分析儀通過(guò)儀器自動(dòng)完成檢測(cè)的整個(gè)流程，通過(guò)試劑的添加、加樣、測(cè)定、清洗、結(jié)果處理等流程，得到最終的檢測(cè)數(shù)據(jù)，從而減少傳統(tǒng)檢測(cè)主觀誤差的弊端，其分析方法多樣且具有良好的靈敏度，具備自檢功能以提升分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。

一、全自動(dòng)生化分析儀應(yīng)用

全自動(dòng)生化分析以已廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域，逐步涌現(xiàn)各種商品化的試劑盒，其中主要分為單一試劑及雙試劑兩種，與之對(duì)應(yīng)的不同類型的測(cè)定程序，其中一種以樣品啟動(dòng)反應(yīng)為測(cè)定程序的初始狀態(tài)，多使用單一符合試劑的工作溶液，另一種則是以試劑啟動(dòng)反應(yīng)為測(cè)定程序初始的，多采用雙試劑。

作為自動(dòng)分析測(cè)試操作程序而言，使用相比于二步法雙試劑而言選擇單一試劑肯定比較方便簡(jiǎn)單，但如果針對(duì)測(cè)試結(jié)果而言二步測(cè)定程序具備明顯的優(yōu)點(diǎn)的情況下，應(yīng)需要選擇雙試劑，需要充分考慮其穩(wěn)定性和酶預(yù)活化的需要采取樣品空白測(cè)試的方法有效降低或消除可能的干擾。

二、全自動(dòng)生化分析儀的參數(shù)設(shè)置

（一）方法類型的設(shè)置。全自動(dòng)生化分析儀可根據(jù)試劑盒的類型、要求、反應(yīng)原理進(jìn)行設(shè)置，針對(duì)傳統(tǒng)的生化分析儀參數(shù)設(shè)置終點(diǎn)法智能進(jìn)行一點(diǎn)終點(diǎn)法而言，選有的設(shè)備可以根據(jù)試劑類型進(jìn)行選擇，單試劑則對(duì)應(yīng)一點(diǎn)終點(diǎn)法，雙試劑對(duì)應(yīng)的兩點(diǎn)終點(diǎn)法，例如對(duì)大多數(shù)酶測(cè)定是選擇使用速率法，而尿素氦和肌酐的測(cè)定選用兩點(diǎn)法進(jìn)行。

（二）測(cè)定波長(zhǎng)的選擇。測(cè)定波長(zhǎng)的選擇首選收集3個(gè)條件數(shù)據(jù)，首先需要對(duì)待測(cè)物質(zhì)在指定波長(zhǎng)下的光吸收做出判定，充分考慮常見(jiàn)干擾物對(duì)該波長(zhǎng)下光吸收對(duì)的影響，確保其吸收的峰值較寬且鈍。重視試劑盒標(biāo)明和提供的波長(zhǎng)參數(shù)范圍，部分全自動(dòng)生化分析儀收濾光片數(shù)量的限制，在使用過(guò)程中以就近原則進(jìn)行選擇。

（三）溫度的設(shè)置。與傳統(tǒng)的半自動(dòng)生化儀不同，目前全自動(dòng)生化分析儀的測(cè)定未定都固定在37攝氏度，沒(méi)有原有的室溫、25、30、37攝氏度溫度的設(shè)定。對(duì)于終點(diǎn)法而言測(cè)定均在機(jī)外進(jìn)行，將溫度設(shè)定為室溫能夠減少調(diào)整時(shí)間，有效提高工作效率。如果選擇速率法或兩點(diǎn)法則將溫度設(shè)定在37攝氏度比較合適。

（四）設(shè)定樣品體積分?jǐn)?shù)。將樣品體積與反應(yīng)液總體積的比值稱為樣品體積分?jǐn)?shù)，在酶活力的特定中，將全自動(dòng)生活分析儀的總體積比例控制在10%的范圍下。通常情況下待測(cè)物質(zhì)在樣品中的勝利波動(dòng)范圍較大且含量較低，這就需要加大樣品用量。在測(cè)定膽固醇及血清葡萄糖數(shù)值是需要將樣品試劑的比值控制在1：100的范圍，如果測(cè)定高密度脂蛋白膽固醇或血尿酸數(shù)值是則調(diào)整為1：50，根據(jù)試劑情況進(jìn)行參數(shù)設(shè)置。在全自動(dòng)生化分析儀的參數(shù)設(shè)置方面均已試劑的說(shuō)明為主，根據(jù)最終反應(yīng)液量計(jì)算試劑量和樣本量，不輕易進(jìn)行改動(dòng)。

（五）吸液量的測(cè)定。無(wú)論是傳統(tǒng)的半自動(dòng)生化分析儀或全自動(dòng)洗液量均針對(duì)流動(dòng)比色進(jìn)行設(shè)定，原則上吸入量的參數(shù)設(shè)置控制在反應(yīng)液總體積數(shù)值一下，避免導(dǎo)致出現(xiàn)比色池氣泡，同時(shí)注意留100～200μl的吸入量余地。

（六）延遲時(shí)間參數(shù)設(shè)置。試劑與樣品混合后監(jiān)測(cè)開(kāi)始之間的時(shí)間稱之為延遲時(shí)間，針對(duì)延遲時(shí)間的參數(shù)設(shè)置依據(jù)被測(cè)樣品的濃度或酶活性的大小。酶促反應(yīng)的級(jí)數(shù)、樣品中所含干擾物消除所需時(shí)間及反應(yīng)速度的快慢等，例如在檢測(cè)CHE活性是需要20-30秒的時(shí)間，ALT則需要40-60秒、對(duì)于傳統(tǒng)的半自動(dòng)生化儀中酶活性的連續(xù)檢測(cè)需要重視延遲時(shí)間的設(shè)定，對(duì)單一樣品進(jìn)行逐一測(cè)定，并將延遲時(shí)間全部設(shè)置在儀器內(nèi)，延遲加監(jiān)測(cè)的時(shí)間至少需要1分鐘左右，造成守候時(shí)間較長(zhǎng)的情況發(fā)生。全自動(dòng)生化分析儀將控溫、加樣、讀數(shù)、實(shí)際特點(diǎn)、室溫情況等參數(shù)考慮在內(nèi)，將部分延遲時(shí)間移除在設(shè)備外，確保機(jī)內(nèi)延遲時(shí)間不進(jìn)入結(jié)果數(shù)據(jù)的線性反應(yīng)期，限制延遲、監(jiān)測(cè)、反應(yīng)時(shí)間的影響，有效減少測(cè)定樣品反應(yīng)的線性范圍，避免發(fā)生底物耗盡的情況。

針對(duì)酶促反應(yīng)的延遲時(shí)間，在過(guò)量底物存在的情況下全自動(dòng)生化分析儀反應(yīng)速率加快以至于到達(dá)反應(yīng)速率穩(wěn)的階段，使得酶促反應(yīng)的速率保持恒定，不受反應(yīng)液濃度的影響，這個(gè)階段稱之為線性反應(yīng)期或零級(jí)反應(yīng)期，全自動(dòng)生化分析儀的檢測(cè)時(shí)間就在這個(gè)時(shí)期。以酶監(jiān)測(cè)為例采用連續(xù)檢測(cè)法至少保持在90-120秒的范圍內(nèi)，或者至少有4個(gè)點(diǎn)的△A，否則不能計(jì)算其線性度。如果檢測(cè)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)則會(huì)造成底物耗盡的情況，可測(cè)范圍也會(huì)相應(yīng)的變窄。

（七）設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)的確定。針對(duì)終點(diǎn)法和兩點(diǎn)法而言必須設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于全自動(dòng)生化分析儀而言設(shè)置合適的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)于測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性尤為重要。部分試劑盒內(nèi)配有標(biāo)準(zhǔn)液但存在定標(biāo)偏差較大的問(wèn)題，例如使用干粉復(fù)合羅氏校準(zhǔn)液，如果復(fù)溶則采用分裝冷凍的方式保存，確保水質(zhì)的質(zhì)量，避免反復(fù)凍融對(duì)測(cè)試和校準(zhǔn)結(jié)果造成影響。在實(shí)際使用中注意校準(zhǔn)液的獲取發(fā)放，根據(jù)不同的方法與之對(duì)應(yīng)的耙值存在差異，不可簡(jiǎn)單套用。

（八）吸光度的參數(shù)設(shè)置。針對(duì)全自動(dòng)生化分析儀而言吸光度的上下限參數(shù)需要進(jìn)行設(shè)置，用以檢測(cè)試劑的質(zhì)量，但試劑的吸光度上下線不是試劑質(zhì)量的唯一指標(biāo)，需要校準(zhǔn)頻率和室內(nèi)質(zhì)控對(duì)質(zhì)量進(jìn)行保證，例如在入場(chǎng)的酶活力測(cè)定時(shí)試劑的空白數(shù)據(jù)在規(guī)定限值內(nèi)如果質(zhì)控物測(cè)定見(jiàn)過(guò)持續(xù)偏低，則難以判斷最終數(shù)據(jù)。

三、結(jié)束語(yǔ)

在使用全自動(dòng)生化分析儀時(shí)為了確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性需要對(duì)上機(jī)參數(shù)進(jìn)行設(shè)定，充分考慮試劑之間的相互影響因素，避免測(cè)試項(xiàng)目中使用的試劑成分對(duì)下一個(gè)測(cè)定項(xiàng)目或成分造成影響。注意將PH數(shù)值不同或差異較大的試劑分開(kāi)測(cè)定，避免相互干擾影響最終的測(cè)試結(jié)果。重視樣本測(cè)試完畢后的清潔工作，選用無(wú)水乙醇作為擦洗試劑，避免對(duì)后續(xù)的檢測(cè)造成誤差。