袁 博（南陽市第一人民醫(yī)院腫瘤血液科，河南473000）

化療是指通過使用化學(xué)治療藥物殺滅癌細(xì)胞的一種治療方法，對于潛在轉(zhuǎn)移病灶（癌細(xì)胞已經(jīng)轉(zhuǎn)移但臨床尚未檢測出）和已經(jīng)發(fā)生臨床轉(zhuǎn)移的惡性腫瘤具有較好的療效，是大部分惡性腫瘤手術(shù)后的重要輔助治療方法，也是部分不適宜采用手術(shù)的惡性腫瘤患者的唯一一種治療方法[1]，通過化療不但可以延續(xù)患者的生命周期，還能提高患者的生命質(zhì)量。對外周血T淋巴細(xì)胞亞群的監(jiān)測是觀察化療效果的重要臨床輔助診斷方法，可以通過如免疫熒光法等檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)值的變化來判斷化療的效果及預(yù)后等。為此，作者就晚期惡性腫瘤患者化療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群監(jiān)測及臨床意義進(jìn)行研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年12月至2016年11月在本院接受化療治療的73例晚期惡性腫瘤患者作為研究對象。其中男41例，女32例；年齡49～76歲，平均（65.8±2.6）歲；其中肺癌晚期21例，胃癌晚期15例，乳腺癌晚期13例，腸癌晚期12例，肝癌晚期8例，其他惡性腫瘤晚期4例。所有患者均經(jīng)過前期不同方法治療后正接受后期化療。

1.2 方法 73例患者均采用免疫熒光法進(jìn)行外周血T細(xì)胞亞群指標(biāo)檢測，具體方法如下。

1.2.1 采血 采集患者靜脈血（通常取手臂部位即可，注意在靜脈穿刺部位上方4～6 cm處扎緊止血帶）。在行常規(guī)消毒后取血（注意針頭斜面向上與皮膚成15°～30°，通常抽取5 mL即可），取血后注意壓迫止血。

1.2.2 制樣 將獲得血液注入試管內(nèi)（切勿注入泡沫），并均勻搖晃（可視血液情況添加抗凝劑），并迅速封存待進(jìn)行熒光法分析。

1.2.3 熒光法分析 （1）確定淋巴細(xì)胞區(qū)：在前散射（FSC）和側(cè)散射（SSC）的二維Dot-plot圖中劃出淋巴細(xì)胞區(qū)。（2）熒光強(qiáng)度檢測：對淋巴細(xì)胞作異硫氰酸熒光素（FITC）和藻紅蛋白（PE）強(qiáng)度檢測。選擇濾過片為（530±10）nm帶通熒光Ⅰ（FL1）為FITC進(jìn)行檢測，選擇濾光片為（575±10）nm帶通熒光Ⅱ（FL2）為PE進(jìn)行檢測。

1.2.4 檢查時間 化療前1周及化療結(jié)束后的2周。

1.2.5 評價指標(biāo) 將免疫功能指標(biāo)值（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD3＋/CD8＋）作為評價指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗，計量資料以表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者化療前后的評價指標(biāo)比較 73例患者化療2周后的CD3＋、CD4＋、CD8＋均較化療前有一定改善，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；化療前后的CD3＋/CD8＋比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表 1。

表1 兩組患者化療前后的評價指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組患者化療前后的評價指標(biāo)比較（±s）

階段化療前化療后t P CD3＋（%）55.8±8.7 69.3±9.2 3.17＜0.05 CD4＋（%）28.5±3.7 36.1±4.8 2.25＜0.05 CD8＋（%）23.9±3.1 28.3±3.2 2.38＜0.05 CD3＋/CD8＋2.33±0.32 2.47±0.58 0.94＞0.05

2.2 不同性別患者化療前后的評價指標(biāo)比較 化療前，男性患者的CD8＋和CD3＋/CD8＋與女性患者比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），化療前男、女性患者CD3＋、CD4＋接近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；不同性別化療后的 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD3＋/CD8＋評價指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表 2、3。

表2 不同性別患者化療前相關(guān)評價指標(biāo)比較（±s）

表2 不同性別患者化療前相關(guān)評價指標(biāo)比較（±s）

性別男性女性t P CD3＋（%）54.3±5.2 56.7±4.9 0.83＞0.05 CD4＋（%）28.3±3.1 31.6±3.2 0.95＞0.05 CD8＋（%）23.8±3.9 19.6±2.2 2.38＜0.05 CD3＋/CD8＋2.28±0.32 2.89±0.58 3.94＜0.05

表3 不同性別患者化療后相關(guān)評價指標(biāo)比較（±s）

表3 不同性別患者化療后相關(guān)評價指標(biāo)比較（±s）

性別男性女性t P CD3＋（%）68.2±4.9 70.5±8.1 0.76＞0.05 CD4＋（%）37.1±3.3 35.9±4.2 0.84＞0.05 CD8＋（%）27.9±3.3 28.3±2.9 0.79＞0.05 CD3＋/CD8＋2.44±0.52 2.49±0.27 0.94＞0.05

3 討 論

有研究表明，T細(xì)胞亞群的分布會隨著腫瘤進(jìn)展發(fā)生動態(tài)變化[2]。通過外周血T淋巴細(xì)胞亞群監(jiān)測來觀察晚期惡性腫瘤患者化療的效果已經(jīng)在臨床上得以普遍應(yīng)用，主要方法有免疫熒光法、橋聯(lián)酶免疫檢測法、金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）花環(huán)法、流式細(xì)胞術(shù)等[3]。惡性腫瘤病變間存在著細(xì)胞免疫功能的差異[4]。通過對免疫功能指標(biāo)（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD3＋/CD8＋）的測定不僅可以獲得患者化療后的免疫功能改善情況，還可以為后期的化療提供指導(dǎo)[5]。

本研究中化療前不同性別的CD8＋與CD3＋/CD8＋有一定的差異，這可能與患者的不同腫瘤性質(zhì)有關(guān)系[6]，女性患者以晚期乳腺癌為主要疾癥；而化療后不同性別的指標(biāo)值基本接近，表明針對不同類型的晚期腫瘤，通過化療其免疫指標(biāo)均可得到一定改善；通過化療藥物可以提高 CD3＋、CD4＋、CD8＋的細(xì)胞陽性率，而CD3＋/CD8＋的變化差異較小仍表明免疫細(xì)胞處于抑制狀態(tài)，所以改善效果基本接近，說明化療作為晚期腫瘤患者的治療方法其作用基本接近，這與目前已有的研究結(jié)果也基本吻合[7]?；熆墒拐{(diào)節(jié)性T細(xì)胞占T淋巴細(xì)胞比例降低[8]，從而達(dá)到治療腫瘤的效果。有研究表明，時辰化療在解除腫瘤對機(jī)體的免疫抑制及改善細(xì)胞免疫功能方面明顯優(yōu)于常規(guī)化療，臨床應(yīng)加強(qiáng)研究[9]。

綜上所述，進(jìn)行外周血T淋巴細(xì)胞亞群監(jiān)測可及時了解晚期腫瘤患者免疫指標(biāo)值的改善情況，評估患者免疫功能狀態(tài)[10]，對指導(dǎo)治療和判斷預(yù)后有極高的輔助監(jiān)測臨床意義。

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