程曉雪

（天水中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，甘肅 天水 741020）

麻杏竺膽顆粒是天水市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院的臨床經(jīng)驗(yàn)方，由蜜麻黃、杏仁、膽南星、天竺黃、黃芩、生石膏、郁金等多味中藥材組成。此方具有清熱化痰、理氣止咳的功效，適用于對(duì)存在咳嗽氣喘、咯痰黃稠、氣急嘔惡、煩躁不寧等證候的患者進(jìn)行治療。在本次研究中，筆者采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)法（以干浸膏得率和黃芩苷的提取率為考察指標(biāo)）對(duì)麻杏竺膽顆粒的提取工藝進(jìn)行篩選，并根據(jù)篩選的結(jié)果確定該中成藥的最佳提取工藝。

1　儀器與試劑

本次研究中所用的實(shí)驗(yàn)儀器與試劑主要包括：Agilent 1260高效液相色譜儀（由Agilent科技有限公司生產(chǎn)）；FA2004電子天平（由上海民橋精密儀器有限公司生產(chǎn)）；DV215CD電子天平（由奧豪斯公司生產(chǎn)）；SK8200H型超聲波清洗儀（由上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司生產(chǎn)）；MH-1000型調(diào)溫電熱套（由北京科偉永興儀器有限公司生產(chǎn)）；黃芩苷對(duì)照品（由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供，批號(hào)：1100715-201318）；甲醇為色譜純(由美國(guó)Fisher公司生產(chǎn)),水為重蒸去離子水,其余試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1　提取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)[1-3]

以提取時(shí)間、加水量和提取次數(shù)作為考察因素，每個(gè)因素選取三個(gè)水平進(jìn)行正交試驗(yàn)。詳見(jiàn)表1。

表1　提取工藝正交試驗(yàn)因素水平表

2.2　供試品的處理

按照處方比例稱取各味藥共9份，按表2安排試驗(yàn)。對(duì)上述9份中藥進(jìn)行加水煎煮，并對(duì)藥液進(jìn)行濾過(guò)處理，然后將藥液濃縮至約200ml。將藥液轉(zhuǎn)移至250ml的容量瓶中，加水定容至刻度（作為供試品溶液）。

2.3　干浸膏得率的測(cè)定

精密量取供試品溶液100ml，將其置于已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上濃縮至干，并于105℃下干燥3 h。將蒸發(fā)皿放置于常溫干燥器中30min后，迅速取出并精密稱定其重量，計(jì)算出膏率[4]。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.4　黃芩苷含量的測(cè)定

參照《中國(guó)藥典》（2015年版）[5]中關(guān)于黃芩苷含量的測(cè)定方法對(duì)供試品溶液和對(duì)照品溶液中黃芩苷的含量進(jìn)行測(cè)定。

2.4.1色譜條件 色譜柱：Agilent C18（規(guī)格：4.6 mm×250 mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-0.4%磷酸溶液（42.5：57.5）；檢測(cè)波長(zhǎng)：276 nm；檢測(cè)流速：1.0ml/min；柱溫：25℃。

2.4.2供試品溶液的制備 取正交實(shí)驗(yàn)所選1～9號(hào)濾液各5ml，置于50ml的容量瓶中，加入適量的濃度為50%的乙醇溶液后超聲處理30min，放冷后再加濃度為50%的乙醇溶液至刻度。搖勻，靜置，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.4.3對(duì)照品溶液的制備 精密稱取黃芩苷對(duì)照品5.86 mg，置于100ml的容量瓶中，加濃度為50%的乙醇溶液至刻度，制成每1ml含58.6μg黃芩苷對(duì)照品的溶液（作為對(duì)照品溶液）。

2.4.4測(cè)定方法 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20 μl，注入液相色譜儀中。

2.5　測(cè)定及分析結(jié)果

從干浸膏得率的結(jié)果來(lái)看，各因素影響大小的順序?yàn)镃＞B＞A。其中，因素A為K1＞K2＞K3，因素B為K2＞K3＞K1，因素C為K2＞K3＞K1，直觀分析最佳提取工藝為A1B2C2；從黃芩苷含量的結(jié)果來(lái)看，各因素影響大小的順序?yàn)镃＞B＞A，其中，因素A為K2＞K3＞K1，因素B為K3＞K1＞K2，因素C為K2＞K3＞K1，直觀分析最佳提取工藝為A2B3C2。由于方差分析結(jié)果中各因素對(duì)干浸膏得率和黃芩苷含量均無(wú)顯著影響，且干藥材存在吸水的情況[6]。從經(jīng)濟(jì)學(xué)和可操作性等方面考慮，初步擬定最佳提取工藝為藥材不浸泡，加水提取2次，第一次加8倍水，提取2 h，第二次加6倍水，提取1.5 h。詳細(xì)的測(cè)定及分析結(jié)果見(jiàn)表 2～4。

表2　L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及數(shù)據(jù)分析表

表3　干浸膏得率方差分析結(jié)果

表4　黃芩苷含量方差分析結(jié)果

2.6　最佳提取工藝的驗(yàn)證

以處方比例稱取相應(yīng)的藥材，按擬定工藝條件取3份進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明，3批試驗(yàn)結(jié)果均接近正交試驗(yàn)結(jié)果中的最大值，表明工藝條件穩(wěn)定可靠，并具有良好的重現(xiàn)性。詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表5。

表5　提取工藝驗(yàn)證試驗(yàn)

3　討論

麻杏竺膽顆粒是天水市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院的臨床經(jīng)驗(yàn)方。本次研究采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)法（以干浸膏得率和黃芩苷的提取率為考察指標(biāo)）對(duì)麻杏竺膽顆粒提取工藝中的加水量、煎煮時(shí)間和煎煮次數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，并確定最佳的提取工藝。研究結(jié)果顯示，加水提取2次，第一次加8倍水，提取2 h，第二次加6倍水，提取1.5 h為麻杏竺膽顆粒的最佳提取工藝。經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)證實(shí)，優(yōu)選出的麻杏竺膽顆粒提取工藝的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性均較好。

[1]朱學(xué)明,周道年,宋愛(ài)華.柴術(shù)顆粒制劑提取工藝研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 ,2017,13(8)：47-49.

[2]牛艷艷,仝立國(guó),馮瑪莉,等.健脾寧心膠囊提取工藝的優(yōu)選[J].山西中醫(yī) ,2017,33(1)：40-41,51.

[3]劉燕,陳積,胡姍姍,等.正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選膽石六號(hào)湯提取工藝[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥,2017,19(5)：711-715.

[4]田莉婷,劉雪萍,呂媛,等.加味苓桂術(shù)甘顆粒提取工藝研究[J].陜西中醫(yī) ,2017,38(1)：121-123.

[5]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典(2015年版)[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社 ,2015：522-523.

[6]陳衍斌,張曉紅,劉峰.參梅健胃膠囊制備工藝研究[J].世界中醫(yī)藥 ,2017,12(1)：168-171.