劉　然 　薛茗閣 　李　蕊 　陳　純

1（國家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測天津站，天津300462）2（天津量信檢驗(yàn)認(rèn)證技術(shù)有限公司，天津300462）

苯醚甲環(huán)唑是一種新型的三唑類廣譜殺菌劑，通過抑制細(xì)胞壁甾醇的生物合成而干擾病原真菌生長，對擔(dān)子菌、子囊菌、半知菌等病原菌均有效，常用于防治蔬菜、果樹、禾谷類作物上的葉斑病、黑斑病、白粉病及疫霉病等真菌病害。

目前，有關(guān)苯醚甲環(huán)唑在農(nóng)作物中殘留及消解動(dòng)態(tài)的研究報(bào)道很多。安晶晶等采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對10%苯醚甲環(huán)唑微乳劑在番茄中的殘留進(jìn)行研究，得出苯醚甲環(huán)唑在番茄上降解前期相對較快，后期較慢，最終殘留量為0.158 mg/kg。這些研究普遍采用柱層析、液液分配或固相萃取的方法凈化樣品，具有步驟較繁瑣、處理時(shí)間較長、消耗試劑較多等劣勢，不適用于大批量樣品檢測。本研究采用QuEChERS方法檢測番茄中苯醚甲環(huán)唑殘余量，與傳統(tǒng)前處理方法相比，更加快速、簡便、高效，而GC-MS檢測方法具有高精密度和靈敏度，因此QuEChERS/GC-MS適用于大批量蔬菜水果中農(nóng)藥的檢測。

1　材料與方法

1.1　儀器與試劑

儀器：PerkinElmera Clarus 500氣相色譜-質(zhì)譜儀，PerkinElmera公司；DB-5色譜柱，30 m×0.32 m×0.25 μm，Thermo公司；N-EVAP 112氮吹濃縮儀，Organomation公司；高速冷凍離心機(jī)，湖南湘儀離心機(jī)廠；渦旋儀，DRAOONLAB公司。

試劑：苯醚甲環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)品，SB05-170-2008，100 μg/mL，購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所；ProElut QuEChERS，Dikma公司；Cleanert MAS-Q，Agela公司；乙腈，色譜純。

1.2　提取與凈化

取15 g（準(zhǔn)確到0.01 g） 番茄樣品，加入15 mL乙腈，渦旋2 min后加入ProElut QuEChERS，渦旋2 min，以5 000 r/min離心5 min。取5 mL番茄上清液于15 mL離心管中，加入Cleanert MAS-Q，渦旋2 min，以5 000 r/min離心5 min后取上清液，過孔徑0.45 μm濾膜，待氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS） 測定。

1.3　儀器分析條件

氣相色譜條件：初始柱溫50℃，保持2 min，以10℃/min升到180℃，保持1 min，以3℃/min升到270℃，保持14 min；進(jìn)樣口溫度280℃；載氣為氮?dú)猓恢魉?.0 mL/min；進(jìn)樣量1 mL；不分流進(jìn)樣。

質(zhì)譜條件：離子源溫度230℃，四級桿溫度150℃，EI電離能70 eV，溶劑延遲5 min。選擇離子監(jiān)測（SIM） 方式檢測，苯醚甲環(huán)唑的定量離子為 m/z 323，定性離子為 m/z 265、m/z 327、m/z 267，2個(gè)對映異構(gòu)體的典型保留時(shí)間約為41.59 min和 41.79 min。

1.4　工作曲線

采用外標(biāo)法定量，配制成質(zhì)量濃度分別為0.01 μg/mL、0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用GC-MS測定。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，其線性方程為Y=31 022X-2 128，相關(guān)系數(shù)R2=0.999。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線見圖1。結(jié)果表明，苯醚甲環(huán)唑在 0.01 μg/mL～0.20 μg/mL范圍內(nèi)線性良好。

圖1　標(biāo)準(zhǔn)曲線

2　結(jié)果與分析

2.1　方法的選擇性、準(zhǔn)確度和靈敏度

采用氣相色譜-質(zhì)譜選擇離子監(jiān)測（GC-MS/SIM）模式檢測番茄中的苯醚甲環(huán)唑，苯醚甲環(huán)唑2個(gè)異構(gòu)體出峰處均無明顯的雜質(zhì)峰干擾，方法具有較好的選擇性，可以獲得良好的定性和定量結(jié)果，添加苯醚甲環(huán)唑的番茄樣品色譜圖見圖2。

苯醚甲環(huán)唑的儀器檢出限為2.0×10-10g，本方法對于番茄中苯醚甲環(huán)唑的最低檢測濃度為0.05 mg/kg。說明該方法的準(zhǔn)確度和靈敏度較好，符合農(nóng)藥殘留分析。

圖2　添加苯醚甲環(huán)唑的番茄樣品的氣相色譜-質(zhì)譜圖(添加濃度0.1 mg/kg)

2.2　添加回收率試驗(yàn)

分別添加3個(gè)不同質(zhì)量濃度的苯醚甲環(huán)唑于樣品中，測定方法的回收率，結(jié)果見下頁表1。當(dāng)添加量為0.05 mg/kg、0.10 mg/kg、0.5 mg/kg時(shí)，番茄中的平均加標(biāo)回收率分別為87.6%、90.4%、98.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為3.8%、7.0%、8.1%。結(jié)果表明，本文建立的樣品前處理方法和氣相色譜測定方法能有效地測定番茄中苯醚甲環(huán)唑的殘留量，方法重現(xiàn)性好，靈敏度、準(zhǔn)確度、精確度均符合中華人民共和國農(nóng)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》的要求。

表1　苯醚甲環(huán)唑添加回收率試驗(yàn)結(jié)果

3　結(jié)論

本文研究并建立了一種采用QuEChERS前處理方法結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜儀測定番茄中苯醚甲環(huán)唑殘留的分析方法，該方法具有干擾少、簡單易行、準(zhǔn)確度和靈敏度較高的特點(diǎn)，適用于番茄樣品中苯醚甲環(huán)唑殘留量的分析檢測。

本方法與現(xiàn)有前處理方法相比，無需液液分配、過SPE小柱或?qū)游鲋葍艋僮鳎坏?jié)省了大量溶劑而且使前處理步驟更加簡單，分析速度更加快速；同時(shí)，與采用GC-ECD相比，采用GC-MS/SIM方式檢測，不僅有效地降低了基質(zhì)雜質(zhì)對目標(biāo)物的干擾以及對樣品前處理凈化效果的要求，而且可以同時(shí)進(jìn)行定性和定量分析。檢測效率高，在大批量樣品的處理中具有明顯優(yōu)勢，能夠滿足農(nóng)藥殘留測定的要求。

［1］GOPINATH K，RADHAKRISHNAN N V，JAYARAJ J.Effect of propieonazole and difenoeonazole on the control of anthraenose of chilli fruits caused by colletotrichum capsiei［J］.Crop Protection，2006，25（9）:1 024-1 031.

［2］ALLEN T W，ENEBAK S A，CAREY W A.Evaluation of fungicides for control of species of fusarium on longleaf pine seed［J］.Crop Protection，2004，23（10）:979-982.

［3］JAYASENAKW， LOUGHMANR， MAJEWSKIJ.Evaluation of fungieides in control of spot-type net blotch on barley［J］.Crop Protection，2002，21（l）:63-69.

［4］龔鵬博.苯醚甲環(huán)唑的應(yīng)用現(xiàn)狀［J］.農(nóng)藥市場信息，2011（4）:40.

［5］盧聲宇，徐敦明，余孔捷，等.氣相色譜/氣質(zhì)聯(lián)用分析5種農(nóng)產(chǎn)品中的苯醚甲環(huán)唑和丙炔氟草胺殘留［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2007（5）:1 827-1 831.

［6］王連珠，王登飛，俊超，等.氣相色譜-質(zhì)譜法測定荷蘭豆中氟硅唑、丙環(huán)唑、苯醚甲環(huán)唑殘留量［J］.理化檢驗(yàn)（化學(xué)分冊），2006，42（12）:1 025-1 028；1 031.

［7］秦曙，喬雄梧，王霞，等.應(yīng)用GC-MS測定葡萄中的5種農(nóng)藥殘留［J］.分析測試學(xué)報(bào)，2004（S1）:242-243；248.

［8］安晶晶，劉新剛，董豐收，等.苯醚甲環(huán)唑在番茄和土壤中的殘留動(dòng)態(tài)研究［J］. 環(huán)境科學(xué)研究，2009，22（7）:868-872.

［9］農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則［S］.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2004:5.

［10］曹建敏，邱軍，于衛(wèi)松，等.固相萃取氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法同時(shí)測定煙草中40種農(nóng)藥殘留［J］.分析試驗(yàn)室，2012（11）:24-29.

［11］劉躍華，何超，黃海濤，等.氣相色譜法測煙草中擬除蟲菊酯和有機(jī)磷類農(nóng)殘［J］.化學(xué)研究與應(yīng)用，2009，21（4）:459-462.