王道兵 ，鐘其頂 ，李國(guó)輝 ，岳紅衛(wèi)

（1.中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院有限公司，北京 100015； 2.全國(guó)食品發(fā)酵標(biāo)準(zhǔn)化中心，北京 100015）

甘油是葡萄酒中干浸出物的主要化合物，主要產(chǎn)生于葡萄酒發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程。雖然其對(duì)葡萄酒的香氣特征沒(méi)有直接貢獻(xiàn)，但卻賦予葡萄酒酒體豐滿的特征——不僅可以增加葡萄酒的甜度，而且使葡萄酒口感更厚重圓潤(rùn)[1]，因此一些歐洲國(guó)家也將甘油作為葡萄酒評(píng)級(jí)的依據(jù)[2]。因葡萄質(zhì)量不好或者發(fā)酵過(guò)程的問(wèn)題會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)出來(lái)的葡萄酒口感較差，雖然各國(guó)標(biāo)準(zhǔn)與法規(guī)禁止人為加入甘油，但一些不法酒商仍會(huì)添加甘油來(lái)改善葡萄酒的口感，更有甚者直接用工業(yè)甘油和三精一水化學(xué)原料生產(chǎn)“葡萄酒”。

穩(wěn)定同位素技術(shù)在葡萄酒摻假檢測(cè)中具有重要應(yīng)用[3]，利用穩(wěn)定碳同位素的自然分餾特征檢測(cè)葡萄酒中非法添加的甘油組分，對(duì)維護(hù)葡萄酒市場(chǎng)公平競(jìng)爭(zhēng)、保護(hù)消費(fèi)者權(quán)益、打擊葡萄酒造假具有重要意義。自1997年以來(lái)，關(guān)于甘油碳同位素分析的報(bào)道有很多[4-8]，其中，Weber等[4]和Rossmann等[5]首先分析了不同產(chǎn)品中甘油的碳同位素分布特征，F(xiàn)ronza等[6-7]研究了動(dòng)物脂肪轉(zhuǎn)化的甘油同位素特點(diǎn)，陳珊珊等[8]測(cè)定了植物油中甘油碳同位素組成，然而上述方法僅限于分析甘油含量較高的樣品——樣品中甘油提純后再測(cè)定。隨著在線分析技術(shù)的發(fā)展，氣相色譜-燃燒-穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜（GC-C-IRMS）在有機(jī)物碳同位素分析中的研究與應(yīng)用越來(lái)越廣泛，其分析精度也可優(yōu)于0.3‰[9-10]。2004年，Calderone報(bào)道了直接進(jìn)樣模式聯(lián)用GC-CIRMS測(cè)定葡萄酒中甘油碳同位素比值的方法[11]，該方法也被國(guó)際葡萄與葡萄酒組織（OIV）采納為標(biāo)準(zhǔn)方法（Resolution OIV/OENO 343/2010），然而我們?cè)趹?yīng)用OIV方法時(shí)發(fā)現(xiàn)其存在一些問(wèn)題：葡萄酒樣品用乙醇稀釋4倍后取0.3 μL進(jìn)樣（分流比120∶1，進(jìn)樣口溫度270℃）測(cè)定，卻未能監(jiān)測(cè)到甘油的色譜峰，為此，我們針對(duì)樣品的不同屬性進(jìn)行了方法驗(yàn)證。

GC-C-IRMS適于氣體或較低沸點(diǎn)物質(zhì)的碳氮同位素特征分析，然而常壓下甘油的沸點(diǎn)是290℃，在205℃或稍高溫度時(shí)會(huì)隨受熱時(shí)間而有不同程度的聚合和分解，在此過(guò)程中必然會(huì)發(fā)生同位素動(dòng)力學(xué)分餾[12-13]。根據(jù)穩(wěn)定同位素分析“IT”原則[14-15]，測(cè)定樣品甘油δ13C時(shí)只需確保和標(biāo)準(zhǔn)品中的甘油具有相同的氣化特征而無(wú)需完全氣化，但是考慮到葡萄酒中甘油含量?jī)H為4～11 g/L，而IRMS精確分析需要約200 ng C[16]，因此，探討色譜條件對(duì)甘油氣化和碳同位素分餾的影響對(duì)準(zhǔn)確測(cè)定葡萄酒甘油δ13CVPDB值具有重要意義。本研究針對(duì)上述因素對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響展開(kāi)了探討，以期為我國(guó)葡萄酒中甘油的穩(wěn)定同位素分布特征調(diào)查和真實(shí)性應(yīng)用研究選擇合適的技術(shù)方法提供數(shù)據(jù)支持。

1　材料與方法

1.1　材料、試劑及儀器

葡萄酒：市售。

儀器設(shè)備：Delta V Advantage穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜儀，配備Ultra Trace GC氣相色譜、IsoLink接口和Triplus自動(dòng)進(jìn)樣器，以及Flash 2000元素分析儀，以上儀器均購(gòu)自Thermo Fisher公司。超純水由Milipore公司的Milli-Q系統(tǒng)制備。氦氣（純度為99.999%）和二氧化碳?xì)怏w（純度99.99%）均購(gòu)于北京北溫氣體制造廠。HP-INNOwax氣相色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）購(gòu)于安捷倫科技（中國(guó)）有限公司。十萬(wàn)分之一電子天平購(gòu)于瑞士Mettler-Toledo公司。

試劑：乙醇（色譜純），購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；甘油（分析純），編號(hào)為WS-1、WS-2和WS-3，購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

IAEA-CH-6(國(guó)際原子能機(jī)構(gòu))，δ13CV-PDB=-10.45‰±0.2 ‰；IAEA-601（國(guó)際原子能機(jī)構(gòu)），δ13CV-PDB=-27.77‰±0.04‰。

1.2　儀器條件

1.2.1　GC條件

進(jìn)樣量1 μL，進(jìn)樣口溫度240～270℃，載氣為氦氣，流速1.2 mL/min，分離比10∶1。程序升溫條件為：初溫120℃，升溫速度為25℃/min。

1.2.2　甘油轉(zhuǎn)化條件

燃燒轉(zhuǎn)化裝置（IsoLink）中配備陶瓷（Al2O3）氧化管（填料為CuO、NiO 和Pt），工作溫度為1000 ℃[12-13]。

1.2.3　EA條件[15]

氧化管溫度980℃，還原管溫度680℃，柱溫60℃，氦氣流速100 mL/min，氧氣充入時(shí)長(zhǎng)為3 s（流速250 mL/min）；稱(chēng)取0.1 mg有機(jī)物于錫杯中，包樣后測(cè)定。

1.2.4　IRMS條件

離子源電壓2.97 kV，真空度1.8×10-6mbar，轟擊電壓120.8 eV。

1.3　數(shù)據(jù)處理

Thermo isodat version 3.0軟件用于數(shù)據(jù)采集和碳同位素值的計(jì)算（注：δ13C值僅是實(shí)際測(cè)定結(jié)果，未經(jīng)過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品校正。校正后的結(jié)果記為δ13CVPDB）。

2　結(jié)果與討論

受同位素?zé)崃W(xué)分餾作用的影響，物質(zhì)在兩種或兩種以上物質(zhì)（物相）之間的分配時(shí)具有不同的同位素比值，而分餾系數(shù)取決于物質(zhì)分配時(shí)的條件，如溫度、溶劑等[17]。GC-C-IRMS系統(tǒng)中存在兩個(gè)分配節(jié)點(diǎn)：進(jìn)樣口和燃燒管/裂解管接口，本研究中，我們重點(diǎn)針對(duì)上述兩個(gè)節(jié)點(diǎn)中有樣品損失的情況而重點(diǎn)分析溫度、溶劑對(duì)甘油碳同位素分餾的影響。

2.1　甘油工作標(biāo)準(zhǔn)

由于國(guó)內(nèi)外均缺乏甘油碳同位素參考物質(zhì)，因此我們選擇國(guó)際碳同位素參考物質(zhì)標(biāo)定的方法得到甘油工作標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：用IAEA-CH-6和IAEA-601反標(biāo)定EA-IRMS中參考?xì)釩O2的δ13CVPDB[18]，然后多次測(cè)定純甘油的穩(wěn)定碳同位素比值并取其平均值，得到3個(gè)甘油WS-1、WS-2和WS-3的 δ13CVPDB值分別為-30.98‰±0.05‰、-27.95‰±0.04‰和-25.08‰±0.04‰。由此可見(jiàn)，上述3個(gè)純甘油具有不同的碳同位素特征且均勻穩(wěn)定，因而可以作為實(shí)驗(yàn)室工作標(biāo)準(zhǔn)用于方法驗(yàn)證和同位素分餾特征研究。

2.2　進(jìn)樣口溫度對(duì)葡萄酒甘油測(cè)定的影響

Schmitt等[19]的研究表明，進(jìn)樣口參數(shù)設(shè)置會(huì)影響氣體物質(zhì)分析時(shí)的同位素分餾特征，而為了保持良好的分離度和峰形，我們一般采用分流進(jìn)樣的模式，這種分流造成的樣品損失必然也會(huì)帶來(lái)同位素分餾。研究進(jìn)樣口條件對(duì)GC-C-IRMS測(cè)定甘油δ13C的影響，保持色譜柱溫度240℃，設(shè)定IsoLink的反吹閥（Backflush valve）在0～300 s處于打開(kāi)狀態(tài)以防止乙醇進(jìn)入反應(yīng)管。以甘油乙醇溶液（WS-1、WS-2、WS-3）和葡萄酒（Wine-01）為研究對(duì)象，分別在進(jìn)樣口溫度200℃、240℃、270℃和300℃時(shí)進(jìn)樣，每個(gè)試樣進(jìn)樣3次，測(cè)試序列中以270℃條件下的測(cè)定結(jié)果為基準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果初校正。甘油經(jīng)GC-C-IRMS轉(zhuǎn)化的CO2的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）見(jiàn)圖1，δ13C結(jié)果見(jiàn)表1。

圖1　不同進(jìn)樣口溫度時(shí)甘油轉(zhuǎn)化的CO2的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）

從圖1可看出，信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）因進(jìn)樣口溫度不同而有差異：小于240℃時(shí)，信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）隨溫度升高而增強(qiáng)；大于270℃時(shí)，信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）與溫度呈反相關(guān)關(guān)系；乙醇為溶劑的甘油樣品在240℃和270℃時(shí)幾乎是一樣的，但葡萄酒中甘油的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）在270℃條件下達(dá)到最高值。這與甘油在氣相色譜進(jìn)樣口的氣化特性有關(guān)，低于240℃時(shí)有相當(dāng)一部分甘油未氣化而未能進(jìn)入色譜柱；高于270℃時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致甘油分解，也可能是高溫條件下的乙醇、水等其他低沸點(diǎn)物質(zhì)的蒸汽分壓太大，導(dǎo)致甘油的氣化占比變小，而進(jìn)入色譜柱的比例也隨之降低的緣故。

表1數(shù)據(jù)表明，試樣在4個(gè)溫度條件下δ13C值的標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于0.3‰，尤其是WS-1，其不同溫度下測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差均優(yōu)于0.20‰，考慮到進(jìn)樣口溫度270℃時(shí)，Wine-01的甘油具有更高的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44），后續(xù)研究中均固定進(jìn)樣口溫度為270℃。

表1　甘油在不同進(jìn)樣溫度下的δ13C測(cè)定結(jié)果　(‰)

對(duì)比各樣品的甘油δ13C實(shí)測(cè)值可以看出，不同溫度條件下測(cè)定結(jié)果均不相同，并且呈現(xiàn)出隨進(jìn)樣口溫度升高而δ13C值下降的趨勢(shì)，并且甘油中13C/12C比值越大，測(cè)定結(jié)果變化的程度也越大，這表明GC-C-IRMS測(cè)定甘油碳同位素時(shí)，在進(jìn)樣口處出現(xiàn)了碳同位素分餾，溫度越高時(shí)，質(zhì)量數(shù)大的甘油分子越容易進(jìn)入色譜柱，這符合瑞利分餾的相關(guān)特征[20]。

由2.1可知，3個(gè)甘油工作標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的δ13CVPDB差值（Δ13C）最大為5.90‰（WS-3與WS-1），然而GC-C-IRMS測(cè)定結(jié)果（δ13C值）的差值卻不是5.90‰，而是在6.43‰～7.34‰范圍內(nèi)變化，顯然，EA-IRMS與GC-C-IRMS在分析樣品時(shí)具有不同的同位素分餾特征，若以WS-1為基準(zhǔn)進(jìn)行數(shù)據(jù)校正，WS-3的校正結(jié)果與EA-IRMS標(biāo)定值也會(huì)存在偏差，偏差的大小與進(jìn)樣口溫度密切相關(guān)。結(jié)合分餾系數(shù)（ɑ）因溫度而變的特點(diǎn)，說(shuō)明只依靠工作參考?xì)釩O2或單點(diǎn)校正法計(jì)算樣品的δ13C值是不充分的，而應(yīng)該按照“PIT”原則，并且依據(jù)Stephen等[22]建立的兩點(diǎn)校正模型來(lái)進(jìn)行數(shù)據(jù)校正：以進(jìn)樣口270℃下的測(cè)定結(jié)果為例，3個(gè)標(biāo)樣的測(cè)定值與給定值之間的線性擬合程度R2=1，這說(shuō)明該分析條件（進(jìn)樣口270℃、色譜柱240℃恒溫、分流進(jìn)樣10∶1）下甘油碳同位素分餾特征是線性的、分餾系數(shù)是固定的。采用兩點(diǎn)校正法，任取2個(gè)標(biāo)樣的測(cè)定值和給定值建立回歸曲線，如WS-1和WS-2之間的線性擬合公式為δ13CVPDB=0.8832*δ13C-6.5792，由此計(jì)算得出WS-2的δ13CVPDB值為-27.93‰，與給定值-27.95‰十分接近。

2.3　色譜柱溫度對(duì)甘油測(cè)定的影響

如上文所述，分流進(jìn)樣模式下進(jìn)樣口溫度影響樣品的氣化特征進(jìn)而影響甘油產(chǎn)生的CO2的信號(hào)強(qiáng)度，同樣地，GC-C-IRMS體系中毛細(xì)色譜柱并非直接連在檢測(cè)器上，色譜柱流出的物質(zhì)約有90%的物質(zhì)轉(zhuǎn)入燃燒管中（其余10%經(jīng)裂解管排出）。甘油在該節(jié)點(diǎn)處并未100%進(jìn)入燃燒管，因此碳同位素分餾在該處同樣存在。為驗(yàn)證色譜柱溫度對(duì)甘油δ13C測(cè)定的影響，在進(jìn)樣口溫度270℃、載氣流速1.2 mL/min的情況下，設(shè)定程序升溫的初始溫度為80℃，保持1 min，然后以30℃/min升至180℃、200℃、220℃、240℃或260℃，并分別保持恒溫至分析結(jié)束。甘油乙醇溶液（WS-1、WS-2、WS-3）和葡萄酒（Wine-01）分別進(jìn)樣，每個(gè)試樣進(jìn)樣3次，甘油經(jīng)GC-C-IRMS轉(zhuǎn)化的CO2的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）見(jiàn)圖2，δ13C結(jié)果見(jiàn)表2。

圖2　不同色譜柱最終溫度時(shí)甘油轉(zhuǎn)化的CO2的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）

由圖2可知，各試樣中甘油轉(zhuǎn)化的CO2信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）隨色譜柱最終溫度的升高而增大，最大相差近4倍，這表明柱溫影響了甘油流出色譜柱后的分配情況，溫度越高，越有利于甘油進(jìn)入燃燒管。

表2　甘油在不同色譜柱溫度下的δ13C測(cè)定結(jié)果　(‰)

表2中，180～220℃時(shí)甘油δ13C測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)偏差較大（＞0.4‰），分析其原因，可能是由于甘油的沸點(diǎn)較高，甘油流出色譜柱后或在色譜柱中有一部分被液化的緣故。根據(jù)同位素?zé)崃W(xué)分餾原理，溫度越高時(shí)同位素越能快速達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，甘油在柱溫180℃和200℃時(shí)，流入反應(yīng)管的部分與剩余部分可能未達(dá)到平衡狀態(tài)，因此導(dǎo)致碳同位素測(cè)定精度差。240℃和260℃時(shí)甘油δ13C的測(cè)定重復(fù)性均比較理想（標(biāo)準(zhǔn)偏差小于0.25‰），但相對(duì)于240℃，柱溫設(shè)定在260℃時(shí)甘油標(biāo)準(zhǔn)品（乙醇為溶劑）產(chǎn)生的CO2的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）提升有限（2%～5%），而葡萄酒樣品中甘油的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）提高了約9%。

穩(wěn)定同位素分析領(lǐng)域，分析系統(tǒng)的測(cè)定尺度（“scale”）對(duì)分析準(zhǔn)確性至關(guān)重要[23]，而由于穩(wěn)定同位素分析誤差的存在（δ13C≤0.3‰），我們認(rèn)為測(cè)定尺度越大，分析誤差對(duì)樣品準(zhǔn)確性的影響越?。ū热玑槍?duì)兩個(gè)物質(zhì)的測(cè)定尺度：實(shí)際差值=2，即使分析誤差為0.3‰，那么數(shù)據(jù)經(jīng)校正后結(jié)果的誤差則可能僅為0.15‰）。標(biāo)品WS-1與WS-3之間δ13CVPDB差值為5.90‰，180℃和220℃時(shí)差值最大，但分析精度差；與260℃的數(shù)據(jù)相比，240℃時(shí)GC-CIRMS的測(cè)定尺度更大一些，雖然260℃更有利于提升含水試樣中甘油信號(hào)強(qiáng)度，但仍選擇240℃作為后續(xù)研究的色譜柱的最終溫度。

2.4　水分對(duì)甘油測(cè)定的影響

以上研究過(guò)程中，葡萄酒和甘油-乙醇溶液在測(cè)定時(shí)表現(xiàn)出了一些不同，其原因可能是由于樣品中溶劑不同導(dǎo)致的：純甘油樣品的溶劑為純乙醇，而葡萄酒中則是10%左右的乙醇水溶液。為研究水分對(duì)甘油測(cè)定的影響，分別配制含水量為0、20%、40%、60%、80%、90%和100%的乙醇水溶液，然后分別稀釋甘油工作標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（WS-1和WS-3）至6 g/L，并在進(jìn)樣口270℃、流速1.2 mL/min、程序升溫（80℃/1 min//30//240℃/5 min）條件下進(jìn)樣測(cè)定，每個(gè)試樣測(cè)定3次，結(jié)果見(jiàn)圖3和表3。

圖3　不同溶劑中甘油轉(zhuǎn)化CO2的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）

由圖3可知，CO2信號(hào)強(qiáng)度均隨溶液中水分含量的增加而降低，擬合度分析表明相關(guān)系數(shù)R2可達(dá)0.98，這表明溶液中水分影響了甘油在GC中的分配特征。事實(shí)上，同體積同條件進(jìn)樣，水蒸汽的體積是乙醇蒸汽的3倍以上，因此，進(jìn)樣溶液含水量越高，甘油氣化后占比越低，進(jìn)入色譜柱的氣態(tài)甘油也會(huì)相應(yīng)減少。

表3中所有試樣的標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于0.21‰，這說(shuō)明水分未影響甘油δ13C的測(cè)定穩(wěn)定性。但是各試樣中甘油δ13C的分析結(jié)果存在微小差異，測(cè)定值隨溶液中含水量的增加而升高，樣品中的水分影響了甘油的碳同位素分餾情況，此時(shí)，進(jìn)樣口處含13C較多的甘油分子更容易被轉(zhuǎn)移至色譜柱中。葡萄酒的含水量一般為84%～95%，對(duì)比表3數(shù)據(jù)可知，樣品含水量在80%～100%波動(dòng)時(shí)，兩個(gè)甘油（WS-1和WS-2）δ13C測(cè)定值的極差分別為0.49‰和0.89‰，因此，按照穩(wěn)定同位素分析的“IT”原則，應(yīng)確保工作標(biāo)準(zhǔn)樣品與葡萄酒樣品盡可能具有相同的水/乙醇比例。2.5甘油濃度對(duì)δ13C測(cè)定的影響

表3　不同溶劑中甘油δ13C測(cè)定結(jié)果　(‰)

表4　不同濃度下甘油δ13C測(cè)定結(jié)果　(‰)

Hall等指出分析單體化合物的碳同位素分布特征時(shí)δ13C測(cè)定結(jié)果受濃度的影響較大[21]，然而葡萄酒甘油含量因受多種因素的影響而存在差異，有報(bào)道指出葡萄酒中甘油含量最低時(shí)僅為4 g/L，而最高則可達(dá)21 g/L[2]。為研究甘油濃度對(duì)δ13C測(cè)定的影響，我們模擬葡萄酒中酒精含量，以12%乙醇水溶液為溶劑配制濃度為3～21 g/L的甘油樣品，分別測(cè)定δ13C，并以100%乙醇為溶劑配制的甘油樣品為基準(zhǔn)進(jìn)行數(shù)據(jù)校正，結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可看出，峰面積與甘油濃度呈顯著正相關(guān)關(guān)系（R2=0.978），然而當(dāng)甘油濃度加倍時(shí)，甘油轉(zhuǎn)化CO2的m/z 44峰面積的增加量卻不止一倍。對(duì)比分析精度，除濃度為3 g/L時(shí)測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定性SD大于0.4‰以外，其余濃度梯度時(shí)SD均優(yōu)于0.3‰，但是甘油濃度在12 g/L時(shí)的樣品與相鄰兩個(gè)濃度樣品的測(cè)定結(jié)果具有明顯差異，這意味著測(cè)定結(jié)果在甘油濃度9～15 g/L時(shí)存在較大變化，而甘油濃度在6～9 g/L與15～21 g/L范圍時(shí)，δ13C測(cè)定值則保持了相對(duì)穩(wěn)定（差異均小于0.2‰）。一般來(lái)說(shuō)，連續(xù)流-穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜儀（CF-IRMS）測(cè)定CO2時(shí)，δ13C測(cè)定結(jié)果會(huì)因信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）的不同而線性變化，根據(jù)儀器公司提供的測(cè)試指標(biāo)要求，變化率在±0.065‰/V范圍內(nèi)時(shí)即可認(rèn)為儀器測(cè)定結(jié)果是穩(wěn)定的。本研究中，3 g/L（信號(hào)強(qiáng)度為502 mV）時(shí)，δ13C測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏正，高濃度21 g/L（信號(hào)強(qiáng)度為13994 mV）時(shí)，結(jié)果最偏負(fù)，雖然變化是線性的，但是3個(gè)甘油工作標(biāo)準(zhǔn)的變化率不一致，分別為-0.084‰/V～-0.117‰/V，其中甘油中13C含量越高變化率越大，說(shuō)明GC-C-IRMS分析甘油δ13C時(shí)具有特殊的碳同位素分餾效應(yīng)，而且濃度確實(shí)造成了δ13C測(cè)定結(jié)果的差異。

當(dāng)然，根據(jù)“IT”原則可在測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定的前提下進(jìn)行數(shù)據(jù)校正，然后依據(jù)“IT”原則，用于校正的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)與待測(cè)樣品具有相同的理化特征和處理過(guò)程。采用GC-C-IRMS分析葡萄酒甘油時(shí)應(yīng)確保標(biāo)準(zhǔn)品的甘油濃度和乙醇含量完全一致（或接近），然而葡萄酒乙醇含量為8%vol～20%vol，而甘油濃度在3～21 g/L之間波動(dòng)，并且不同產(chǎn)區(qū)、不同品種的葡萄酒樣品上述兩指標(biāo)均存在較大差異，為確保數(shù)據(jù)有效性應(yīng)根據(jù)單個(gè)樣品進(jìn)行針對(duì)性的配制標(biāo)準(zhǔn)品，而這間接地影響了分析效率，增加了前處理和分析工作量。基于此，不建議使用GCC-IRMS技術(shù)測(cè)定葡萄酒中甘油碳同位素比值。

3　結(jié)論

本研究分析了溫度、樣品含水量及甘油濃度對(duì)GC-C-IRMS測(cè)定甘油δ13C的影響，其中甘油產(chǎn)生的CO2的信號(hào)強(qiáng)度（m/z44）與溫度、濃度呈顯著正相關(guān)關(guān)系，然而與樣品含水量呈顯著負(fù)相關(guān)；甘油δ13C測(cè)定值與溫度呈顯著負(fù)相關(guān)而與樣品含水量呈顯著正相關(guān)，但與濃度的相關(guān)性不明顯；各條件下3個(gè)工作標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定結(jié)果與標(biāo)定值（EA數(shù)據(jù)）具有良好相關(guān)性，可根據(jù)數(shù)據(jù)模型用于數(shù)據(jù)校正，但前提是用于校正的標(biāo)準(zhǔn)品與待測(cè)樣品的乙醇和甘油濃度一致，而該過(guò)程會(huì)直接增加前處理工作量和測(cè)定任務(wù)量，分析效率低下，因此不建議使用GC-CIRMS技術(shù)測(cè)定葡萄酒中甘油碳同位素比值。

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