杜忠偉 胡志強(qiáng) 亢學(xué)平 王 旭 李 健 王 鑫
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不同靈芝菌株林下仿野生栽培對(duì)比試驗(yàn)
杜忠偉 胡志強(qiáng) 亢學(xué)平 王 旭 李 健 王 鑫*
(延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院,吉林 延邊 133000)
以12個(gè)靈芝菌株為試驗(yàn)材料,采用林下覆土出菇的試驗(yàn)方法,對(duì)比在相同環(huán)境條件下不同靈芝菌絲體的長(zhǎng)勢(shì)、子實(shí)體形態(tài)特征。結(jié)果表明,不同靈芝菌株在相同條件下生長(zhǎng)差異明顯,以編號(hào)為12即龍泉市農(nóng)業(yè)局的靈芝菌種綜合性狀較好,適合于林下仿野生栽培。
靈芝;菌株;菌絲體;仿野生;子實(shí)體
靈芝()在我國(guó)有著悠久的歷史文化,深受人們的推崇,是著名的藥用真菌,廣泛分布于我國(guó)東部地區(qū)。國(guó)內(nèi)外對(duì)其研究、生產(chǎn)和應(yīng)用十分重視,已研發(fā)出較多藥用和保健用產(chǎn)品。靈芝含有的靈芝多糖、三萜類化合物等成分有顯著的藥理作用,對(duì)抗腫瘤、保肝護(hù)肝、降血糖血脂、調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)等有很好的功效[1~5]。目前我國(guó)大部分靈芝栽培以溫室人工栽培為主,少有林下仿野生栽培,而靈芝的產(chǎn)量、質(zhì)量及有效成分的積累在很大程度上受栽培原料及栽培環(huán)境條件的影響[6,7]。我們通過(guò)引進(jìn)國(guó)內(nèi)不同地方的靈芝菌株,在吉林延邊地區(qū)進(jìn)行林下仿野生栽培試驗(yàn),測(cè)定比較不同菌株菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)和子實(shí)體形態(tài),以選育出適合本地區(qū)林下仿野生栽培的優(yōu)良靈芝品種。
表1 菌株編號(hào)及來(lái)源
從不同地區(qū)引進(jìn)12個(gè)靈芝菌株樣本,試驗(yàn)編號(hào)和來(lái)源如表1所示。
母種培養(yǎng)基選用麥麩浸汁,配方為麥麩50 g、瓊脂粉15 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1.5 g、水1 000 mL。原種培養(yǎng)基配方:硬雜木木屑86%、稻糠10%、豆粉2%、白灰1%、石膏1%。試驗(yàn)采用段木栽培法,選用樺樹(shù)、櫟樹(shù)等硬雜木。
試驗(yàn)所用母種、原種在延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)室制作;栽培袋制作和仿野生林下試驗(yàn)地點(diǎn)選在吉林省和龍市頭道鎮(zhèn)林地。
(1)母種的制作。配制好的培養(yǎng)基裝入試管中,經(jīng)高壓滅菌、擺斜面、冷卻后移入超凈工作臺(tái)中,紫外線殺菌30 min。每個(gè)菌株制作25支試管菌種,放入恒溫培養(yǎng)箱25 ℃暗培養(yǎng),經(jīng)10天左右長(zhǎng)滿試管,記錄母種菌絲長(zhǎng)滿試管時(shí)間,并及時(shí)挑出感染雜菌的試管。
(2)原種的制作。培養(yǎng)基按比例配好后,混合均勻,使含水量為65%,裝入栽培袋中,經(jīng)高壓滅菌,冷卻后移入超凈工作臺(tái)中接種,每個(gè)菌株接種100個(gè)料袋,每支試管接4個(gè)料袋。將制作好的原種轉(zhuǎn)移到發(fā)菌室,25 ℃恒溫培養(yǎng)。
(3)栽培段制作。將硬雜木枝椏材切段捆在一起,直徑為20 cm左右,裝入規(guī)格為22×43×0.003(cm)的聚乙烯栽培袋中,采用常壓滅菌,溫度升至100 ℃后保持13 h,再燜24 h出鍋。滅菌結(jié)束待料包溫度降至40 ℃左右時(shí)接種。之后將所有試驗(yàn)袋統(tǒng)一移入培養(yǎng)室進(jìn)行避光培養(yǎng),培養(yǎng)室溫度控制在24~28 ℃,空氣相對(duì)濕度控制在70%左右,并保持培養(yǎng)室內(nèi)空氣流通。發(fā)菌期間及時(shí)將污染雜菌的菌袋挑出。菌絲長(zhǎng)滿袋后放置10天左右,當(dāng)袋口出現(xiàn)菌皮時(shí),移至林下進(jìn)行仿野生栽培。記錄菌絲長(zhǎng)滿菌袋的時(shí)間。
(1)出菇管理。菌絲滿袋后移入林下覆土出芝。選擇三分陽(yáng)七分陰的林地坡地,覆土前脫掉塑料袋,將菌段豎直擺放。菌段間隔10 cm左右,5個(gè)菌段擺成一排。擺好后在菌段面上覆蓋約3 cm厚的泥土。挖好排水溝,保證出芝場(chǎng)地不低洼積水,覆土后30天左右開(kāi)始出原基。記錄覆土?xí)r間、出芝時(shí)間、采收時(shí)間、產(chǎn)量和外觀品質(zhì)等。
(2)采收。在天氣轉(zhuǎn)冷、靈芝成熟而未彈孢子時(shí)采收并測(cè)量子實(shí)體的大小,經(jīng)晾干后稱重,計(jì)算平均大小和干重。
母種接種后2~3天菌絲開(kāi)始萌發(fā),經(jīng)10天左右長(zhǎng)滿試管,相同接種時(shí)間和培養(yǎng)條件下,12個(gè)靈芝菌株的菌絲體長(zhǎng)勢(shì)存在差別(表2),其中編號(hào)為8、9、10、12的菌株菌絲長(zhǎng)勢(shì)好,長(zhǎng)滿試管斜面快,菌絲潔白;編號(hào)為2、3、7的菌株菌絲長(zhǎng)勢(shì)弱,生長(zhǎng)速度慢,菌絲稀疏,且產(chǎn)生黃色色素。
2月中旬制作栽培袋,菌絲滿袋時(shí)間為4月中下旬,養(yǎng)菌時(shí)間在60天左右,因東北氣溫較低,5月下旬林下覆土栽培,經(jīng)一個(gè)月左右時(shí)間出現(xiàn)原基。試驗(yàn)證明覆土產(chǎn)生原基的快慢與菌絲長(zhǎng)勢(shì)成正相關(guān)(表2)。12、8、9和10號(hào)菌株,覆土產(chǎn)生原基時(shí)間分別為27天、28天、28天和28天。其余菌株均超過(guò)30天。2號(hào)菌株最慢,35天才產(chǎn)生原基。
表2 不同靈芝菌株周期生長(zhǎng)對(duì)比
注 :菌絲長(zhǎng)勢(shì)“+”多表示菌絲粗壯濃白,“+”少表示菌絲長(zhǎng)勢(shì)較弱。
9月中旬靈芝子實(shí)體達(dá)到成熟,彈射孢子前對(duì)各品種進(jìn)行拍照(圖1),采收后測(cè)量子實(shí)體的菌蓋大小和菌柄長(zhǎng)短并計(jì)算平均值。曬干后,每品種隨機(jī)挑選20個(gè)樣本,測(cè)每個(gè)子實(shí)體干重并計(jì)算平均值。結(jié)果,平均干重以12號(hào)菌株較高,為60.25 g;編號(hào)11和3居次,分別為51.22 g和50.18 g(表3)。
通過(guò)對(duì)12個(gè)靈芝菌株的菌絲生長(zhǎng)和在林下仿野生出菇的對(duì)比試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)12號(hào)靈芝菌株菌絲生長(zhǎng)速度快,子實(shí)體菌蓋呈暗紅色,菌蓋大而厚,菌柄短,表現(xiàn)性狀優(yōu)良,子實(shí)體形態(tài)更接近野生靈芝,與其他菌株存在明顯的差異。本試驗(yàn)靈芝菌株的子實(shí)體形態(tài)受當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件影響明顯,因此因地制宜選育出適合本地區(qū)的靈芝菌種,對(duì)于發(fā)展林下仿野生栽培靈芝產(chǎn)業(yè)有著重要的意義。繼之,應(yīng)對(duì)適合林下仿野生栽培的菌株進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)研究,以觀察其穩(wěn)定性,并測(cè)定靈芝多糖、萜類化合物等的含量。
圖1 試驗(yàn)菌株的靈芝子實(shí)體照片
表3 子實(shí)體形態(tài)特征及單重
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現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-20)
杜忠偉(1989—),男,農(nóng)學(xué)碩士,研究實(shí)習(xí)員,從事食藥用菌栽培育種研究,E-mail:337230214@qq.com。
,E-mail:wangxin5887@163.com。
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