熊雨美，楊好妹，劉光明，李佩青

(廣州市婦女兒童醫(yī)療中心急診科，廣東 廣州 510120)

人類巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)是人類皰疹病毒組中最大的一種病毒，臨床上亦被稱為涎病毒，由于其進(jìn)入人體細(xì)胞后很容易使細(xì)胞增大，因此稱為巨細(xì)胞病毒。有研究表明，聽力損害與連接蛋白Cx26基因突變密切相關(guān)[1]。為此，本研究將2014年5月至2017年2月廣州市婦女兒童醫(yī)療中心收治的104例新生兒作為研究對象，探討其巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus，CMV)感染情況及與連接蛋白Cx26基因突變的相關(guān)性。

1對象與方法

1.1研究對象

將2014年5月至2017年2月廣州市婦女兒童醫(yī)療中心收治的104例新生兒作為研究對象，其中42例CMV-DNA陰性新生兒作為甲組，62例CMV-DNA陽性新生兒作為乙組。甲組中男23例，女19例；乙組中男32例，女30例。兩組性別的比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

所有入選新生兒均出生胎齡大于37周且無嚴(yán)重并發(fā)癥；所有新生兒家屬均知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：胎齡低于37周的新生兒；合并有重大臟器并發(fā)癥的新生兒；需采取重癥監(jiān)護(hù)治療的新生兒；因各種原因無法配合完成本次研究的新生兒。

1.3研究方法

采集兩組新生兒臍血，根據(jù)反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)法對兩組新生兒的Cx26基因mRNA表達(dá)情況進(jìn)行檢測，同時分析兩組新生兒的血生化情況，即血清總膽紅素(total bilirubin，TBil)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartate amino￣transferase，AST)、谷氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase，ALT)等。將先天性CMV感染的新生兒劃分為肝功能異常型和肝功能正常型兩種。追蹤兩組新生兒的聽力情況，分析兩組新生兒的聽力檢測結(jié)果、Cx26基因變異情況和CMV感染類型的相關(guān)性。

1.4聽力隨訪

對于早產(chǎn)兒，在其出生3～14天內(nèi)采用耳聲發(fā)射儀進(jìn)行聽力初步篩查，而足月新生兒則在其出生2～3天內(nèi)采用耳聲發(fā)射儀進(jìn)行聽力初步篩查；對于沒有通過初步篩查的新生兒，在出生42天時采用耳聲發(fā)射儀進(jìn)行復(fù)篩，如果仍然沒有通過，則在出生3個月時進(jìn)行腦干誘發(fā)電位檢查，將雙耳聽閾大于25dBnHL的新生兒判斷為感音神經(jīng)性聾(sensorineural hearing loss，SNHL)[2]。根據(jù)結(jié)果對非先天性和先天性CMV感染新生兒的聽力變化進(jìn)行分析，同時將新生兒的聽力變化情況與其Cx26基因突變情況進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法

2結(jié)果

2.1比較各組新生兒的生化指標(biāo)

甲組血生化指標(biāo)檢測均無異常，乙組27例新生兒的AST、ALT水平顯著高于正常值，且TBil水平也顯著升高，因此將該27例新生兒劃分為肝功能異常型的先天性CMV感染，而另外35例新生兒則劃分為肝功能正常型的先天性CMV感染。乙組的TBil、AST、ALT值都高于甲組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t值分別為9.57、15.73、12.04，均P<0.05)，見表1。

表1 兩組新生兒的生化指標(biāo)比較Table 1 Comparison of biochemical indexes

2.2 Cx26基因突變結(jié)果

甲組新生兒中有2例出現(xiàn)235delC突變，有1例出現(xiàn)多態(tài)性改變343A-G1。乙組新生兒中肝功能正常型有21例出現(xiàn)235delC突變，有1例出現(xiàn)多態(tài)性改變79G-A；肝功能異常型中有18例出現(xiàn)235delC突變。

2.3聽力隨訪結(jié)果

甲組新生兒中有36例通過聽力初篩，其余6例均通過聽力復(fù)篩。乙組肝功能正常型新生兒中，有24例通過聽力初篩，有4例通過聽力復(fù)篩，其余7例新生兒中有3例經(jīng)腦干誘發(fā)電位檢查判斷為異常；乙組肝功能異常型新生兒中有8例通過聽力初篩，有6例通過聽力復(fù)篩，其余13例新生兒中有8例經(jīng)腦干誘發(fā)電位檢查判斷為異常，見表2。

2.4 Cx26基因突變與CMV感染和感音神經(jīng)性聾的關(guān)系

在控制感音神經(jīng)性聾變量時進(jìn)行偏相關(guān)分析，Cx26基因突變與CMV感染的相關(guān)系數(shù)r=0.571，P<0.05；在控制CMV感染變量時進(jìn)行偏相關(guān)分析，感音神經(jīng)性聾與Cx26基因突變之間的相關(guān)系數(shù)r=0.209，P<0.05；在控制Cx26基因突變變量時進(jìn)行偏相關(guān)分析，感音神經(jīng)性聾與CMV感染之間的相關(guān)系數(shù)r=0.381，P<0.05，見表3。

表2 聽力隨訪結(jié)果[n(%)]Table 2 Results of hearing followed up[n(%)]

3討論

3.1 CMV對新生兒的危害

CMV在我國流行較為廣泛，其中成人感染率高達(dá)95%，一般情況下大多數(shù)正常人會有CMV潛伏，其潛伏部位主要是白細(xì)胞、睪丸、子宮頸、腎臟、乳腺、唾液腺及其他腺體之中[3]。該病毒可致畸，作用機(jī)制主要是染色體分裂異常、基因整合、同源基因表達(dá)受影響以及胎盤和絨毛損害等[4]。但是對于大對數(shù)免疫正常的個體而言均表現(xiàn)為無癥狀感染，在部分胎兒、嬰幼兒及免疫抑制個體中感染則會出現(xiàn)明顯的病癥。臨床上人類CMV感染可以根據(jù)感染的時間分為先天性感染和后天性感染兩種類型，前者是由于孕婦接觸病毒，使得病毒進(jìn)入胎盤致胎兒感染，另外部分隱性感染的孕婦，其病毒在妊娠后期被激活，經(jīng)產(chǎn)道或泌尿道排出使得分娩時新生兒在經(jīng)過產(chǎn)道時被感染。據(jù)報道，先天性感染CMV的新生兒絕大多數(shù)會有如感音神經(jīng)性聾等較為明顯的后遺癥，其發(fā)生時間一般在新生兒出生后至數(shù)年之間，并且大多數(shù)都會呈現(xiàn)為漸進(jìn)性惡化[5]。無癥狀感染的新生兒雖然具有較好的預(yù)后，但是也會存在單側(cè)或雙側(cè)的進(jìn)行性神經(jīng)性耳聾。據(jù)有關(guān)資料顯示，先天性CMV感染肝功能異常型新生兒有35%～65%的幾率會出現(xiàn)聽力障礙，而肝功能正常的新生兒出現(xiàn)聽力障礙的幾率為7%～15%，并且前者出現(xiàn)聽力障礙的時間更早，亦較為嚴(yán)重[6]

3.2 Cx26基因突變是導(dǎo)致患兒出現(xiàn)感音神經(jīng)性聾的根本原因

本次研究中，甲組新生兒的血生化指標(biāo)檢測均無異常，乙組新生兒中則有27例新生兒的AST和ALT的水平顯著高于正常值，且TBil水平也顯著升高。因此將該27例新生兒劃分為肝功能異常型的先天性CMV感染，而另外35例新生兒則劃分為肝功能正常型的先天性CMV感染。甲組新生兒中有2例新生兒出現(xiàn)235delC突變，有1例出現(xiàn)多態(tài)性改變343A-G1；乙組新生兒中肝功能正常型有21例出現(xiàn)235delC突變，有1例出現(xiàn)多態(tài)性改變79G-A；肝功能異常型中有18例出現(xiàn)235delC突變。本次研究中Cx26基因突變主要表現(xiàn)為235delC突變，與既往調(diào)查資料相符[7]，而多態(tài)性基因改變由于不是致病性突變，因此不需要分析該基因突變與聽力損害的關(guān)系?？p隙連接是完成細(xì)胞間通訊的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，而Cx26基因則參與該連接中離子通道的形成，因此Cx26基因突變會破壞該蛋白質(zhì)的正常結(jié)構(gòu)，上皮細(xì)胞間連接通道完整性破壞及通道開關(guān)異常，使細(xì)胞間信息傳遞受阻或紊亂，而細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度是毛細(xì)胞能量轉(zhuǎn)換的基礎(chǔ)，從而形成異?？p隙連接使得鉀離子回流受阻，最終導(dǎo)致患兒出現(xiàn)感音神經(jīng)性聾[8]。

3.3 Cx26基因、CMV和感音神經(jīng)性聾三者間的關(guān)系

在本次研究中，甲組新生兒中有36例通過聽力初篩，其余6例均通過聽力復(fù)篩；乙組肝功能正常型新生兒中，有24例通過聽力初篩，有4例通過聽力復(fù)篩，剩下7例新生兒中有3例經(jīng)腦干誘發(fā)電位檢查判斷為異常；乙組肝功能異常型新生兒中有8例通過聽力初篩，有6例通過聽力復(fù)篩，剩下13例新生兒中有8例經(jīng)腦干誘發(fā)電位檢查判斷為異常。在控制感音神經(jīng)性聾變量時進(jìn)行偏相關(guān)分析，Cx26基因突變與CMV感染的相關(guān)系數(shù)r=0.571，P<0.05，提示Cx26基因突變與CMV感染有正相關(guān)關(guān)系。在控制CMV感染變量時進(jìn)行偏相關(guān)分析，感音神經(jīng)性聾與Cx26基因突變的相關(guān)系數(shù)r=0.209，P<0.05，提示感音神經(jīng)性聾與Cx26基因突變之間具有弱相關(guān)關(guān)系。在控制Cx26基因突變變量時進(jìn)行偏相關(guān)分析，感音神經(jīng)性聾與CMV感染之間的相關(guān)系數(shù)r=0.381，P<0.05，提示感音神經(jīng)性聾與CMV感染之間具有正相關(guān)關(guān)系。

綜上所述，新生兒CMV感染會使其Cx26基因發(fā)生突變，并且會進(jìn)一步損害患兒的聽力，其中肝功能異常型CMV感染會大大增加患兒出現(xiàn)感音性神經(jīng)性聾和Cx26基因突變的概率。

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[專業(yè)責(zé)任編輯：艾 婷]