劉翠玲 邢瑞芯 吳靜珠 孫曉榮 胡 瑩
(1.北京工商大學(xué)計(jì)算機(jī)與信息工程學(xué)院, 北京 100048;2.北京工商大學(xué)食品安全大數(shù)據(jù)技術(shù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 北京 100048)
花生是我國(guó)主要油料作物之一,種植面積僅次于油菜[1]?;ㄉ饕M成物質(zhì)有脂肪、蛋白質(zhì)和碳水化合物,其中脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)占46%~52%,不飽和脂肪酸更是高達(dá)85%以上。我國(guó)所產(chǎn)的花生中有55%用于制油,花生油年產(chǎn)量?jī)H次于菜籽油[2-4]。然而,花生品種不同,則其脂肪含量(含油率)、蛋白質(zhì)含量也差異顯著。其中,含油率作為油料作物品質(zhì)的重要參考指標(biāo)之一,決定著花生的食用價(jià)值或榨取價(jià)值。在花生制油過程中,花生種子作為花生油的提取原料,其含油率不同,適合的榨油方式也不同,進(jìn)而得到的花生油在氣味、口感方面也良莠不齊。我國(guó)花生品種繁多、含油率參差不齊,通常情況下制油廠多采取壓榨法來制油,但壓榨法只適用于高含油率品種,對(duì)于含油量較低的品種應(yīng)采用溶劑浸出法提油[5-6]。由于花生品種加工特性研究的缺乏,我國(guó)尚未形成統(tǒng)一的、適宜加工制油的專用花生品種準(zhǔn)則,多個(gè)品種混合應(yīng)用的現(xiàn)狀,也導(dǎo)致我國(guó)的花生制油產(chǎn)業(yè)的發(fā)展受到阻礙[7-8]?;ㄉ贩N的鑒別與選取,對(duì)于制油產(chǎn)量的提升至關(guān)重要。
目前針對(duì)花生品種的鑒別技術(shù)主要有:形態(tài)學(xué)鑒定、生化鑒定、DNA分子標(biāo)記鑒定、圖像處理技術(shù)等[9-10]。其中,形態(tài)學(xué)鑒定技術(shù)主要是花生在田間生長(zhǎng)期間,根據(jù)莢果形狀經(jīng)驗(yàn)性地判定品種及純度;生化鑒定包括同工酶和種子儲(chǔ)藏蛋白電泳技術(shù),主要通過鑒定蛋白質(zhì)的種類、含量、結(jié)構(gòu)的不同來鑒定花生品種;DNA分子標(biāo)記鑒定技術(shù)直接以花生種子的DNA作為檢測(cè)對(duì)象來鑒別花生品種;圖像處理技術(shù)通過掃描儀等成像器件采集花生莢果圖像,結(jié)合模式識(shí)別方法來識(shí)別花生品種。這些技術(shù)雖然操作方法不同,但都存在操作過程復(fù)雜、專業(yè)性強(qiáng)、不易實(shí)現(xiàn)等特點(diǎn)。太赫茲(THz)作為一種新興的光譜技術(shù),是指波長(zhǎng)為0.03~30 mm (頻率0.1~10 THz)范圍內(nèi)的電磁波。太赫茲波段包含大多數(shù)生物大分子的振-轉(zhuǎn)能級(jí)躍遷,具有穿透性能好、光子能量低損耗小、承載信息更多等優(yōu)于其他光譜技術(shù)的特點(diǎn),已被證明在農(nóng)產(chǎn)品及食品,特別是植物選種、品質(zhì)檢測(cè)及食品加工等方面能夠起重要的作用[11-12]。
太赫茲在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的研究和應(yīng)用剛起步,因此在農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)檢測(cè)方面的應(yīng)用仍然受到一些限制,限制之一就是難以檢測(cè)高含水率樣品,特別是對(duì)新鮮果蔬等含水率較高的農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)檢測(cè)研究非常少見[13-14]。但對(duì)于含水率很低的油料作物,太赫茲光譜檢測(cè)技術(shù)存在巨大潛能[15-16]。本文利用太赫茲衰減全反射技術(shù)(Terahertz attenuated total reflection,THz-ATR)研究不同花生品種的太赫茲光譜,并結(jié)合多種預(yù)處理方法及建模算法來研究花生品種的快速鑒別方法。
實(shí)驗(yàn)所用花生種子樣本均購(gòu)自某種子公司,包括3個(gè)花生品種:魯花9號(hào)、魯花1號(hào)和花育36號(hào)。每一個(gè)品種隨機(jī)選取20粒,并制作成厚度約1 mm、切片尺寸約1 cm×1 cm的花生仁切片,樣本數(shù)量共計(jì)60個(gè)。為防止花生仁發(fā)生氧化等反應(yīng),該操作要盡可能快速準(zhǔn)確。為保證儀器系統(tǒng)穩(wěn)定性,實(shí)驗(yàn)的環(huán)境溫度控制在22℃。
實(shí)驗(yàn)儀器為劍橋Tera View公司生產(chǎn)的太赫茲脈沖光譜儀,型號(hào)為TeraPulse 4000,如圖1a所示。光譜范圍2~133 cm-1(0.06~4 THz)、信噪比最高達(dá)到70 dB。
實(shí)驗(yàn)利用太赫茲脈沖光譜儀和入射角為35°的單晶硅ATR模塊。ATR的工作范圍在10~120 cm-1(0.3 ~3.6 THz)的電磁頻譜區(qū)域內(nèi),能夠測(cè)量固體和液體樣本,具有采樣面積小、樣品量小(固體一般為1 mg)、樣品制備及采集方式簡(jiǎn)單等特點(diǎn)[17]。ATR采樣技術(shù)示意圖見圖1b。
圖1 實(shí)驗(yàn)儀器Fig.1 Experiment instrument1.樣品 2.ATR晶體 3.衰逝波
實(shí)驗(yàn)采集60個(gè)花生樣本切片的ATR光譜。采集方法為:首先,確保ATR晶體未放置任何樣品并干凈無污染,進(jìn)行ATR采集,得到參考信號(hào);其次,將制作好的花生仁切片置于ATR采集部位,為確保樣品和ATR晶體之間有良好的光學(xué)接觸,需擰緊壓力螺釘。一旦螺桿達(dá)到20 kg的負(fù)荷,沒有更多的壓力施加到窗口,螺桿將自由旋轉(zhuǎn),最大限度地提高吸光度[17]。逐一采集所有花生仁切片的ATR光譜。其中,為提高精確度,ATR采集參數(shù)設(shè)置為:分辨率0.94 cm-1,每次快速掃描的平均次數(shù)為450。
圖2 時(shí)域信號(hào)Fig.2 Time domain signal
3個(gè)品種的花生仁切片樣本的時(shí)域信號(hào)如圖2所示。從圖中可以看出,由于空氣中的水分干擾,樣本信號(hào)的波形均存在較小抖動(dòng)。此外,3個(gè)品種樣本的脈沖波形相似,差異細(xì)微,說明了系統(tǒng)的穩(wěn)定性。進(jìn)一步將主脈沖放大進(jìn)行對(duì)比,發(fā)現(xiàn)不同品種的花生仁切片對(duì)THz波的吸收強(qiáng)度不同,表現(xiàn)在主脈沖的相位和幅度上均存在一定程度的延遲和衰減,吸收強(qiáng)度從高到低依次為:魯花1號(hào)、魯花9號(hào)、花育36號(hào)。含油率較高的2個(gè)品種的信號(hào)更強(qiáng)一些,這可能是由于高含油率的花生品種對(duì)太赫茲波的吸收小于低含油率品種[18]。
由于實(shí)驗(yàn)儀器存在噪聲和空氣中水分對(duì)太赫茲波的吸收,所采集的樣本信號(hào)存在一定幅度范圍的波動(dòng),難以達(dá)到儀器理想的信噪比,不易直接通過太赫茲特征光譜來有效鑒別某一花生樣本的真實(shí)品種。因此,采集得到的時(shí)域信號(hào)需要進(jìn)一步處理,提取出更有效的光學(xué)常數(shù)進(jìn)行分析,或借助模式識(shí)別方法建立鑒別模型。
2.1.1光學(xué)常數(shù)提取
光學(xué)常數(shù)是表征物質(zhì)宏觀光學(xué)性質(zhì)的重要物理量。在從采集到的THz電場(chǎng)的時(shí)域波形中提取這些光學(xué)常數(shù)前,需要利用快速傅里葉變換(FFT)將參考信號(hào)和樣本的時(shí)域光譜進(jìn)行轉(zhuǎn)換,得到對(duì)應(yīng)的頻域光譜,進(jìn)而利用頻域信號(hào)的幅值和相位(實(shí)部和虛部)信息計(jì)算得到所需的光學(xué)常數(shù)[19]。此外,在獲得信號(hào)頻域譜的過程中,為避免信號(hào)數(shù)據(jù)開頭和結(jié)尾不連續(xù)造成信號(hào)頻譜顯示的失真,必須對(duì)信號(hào)執(zhí)行一個(gè)切趾(加窗)的過程,減少時(shí)域信號(hào)截?cái)嗨鶐淼恼`差[20]。切趾函數(shù)的種類多樣,比如Boxcar用于高分辨率,Blackman Harris用于高信噪比,本研究選擇最常用的Happ Genzel,因?yàn)樗骖櫫诵旁氡群头直媛省?/p>
THz光譜分析中常用的光學(xué)常數(shù)是吸光系數(shù)和折射率。其中,吸收系數(shù)定義為該樣本單位厚度的吸光度。折射率是光在真空中的傳播速度與光在該介質(zhì)中的傳播速度之比,可以通過不同樣本在時(shí)域信號(hào)上的延遲反映出來。圖3和圖4分別是樣本的吸收系數(shù)圖和折射率圖。
圖3 吸收系數(shù)Fig.3 Absorption coefficient
圖4 折射率Fig.4 Refractive indices
盡管太赫茲衰減全反射技術(shù)具有諸多其他光譜技術(shù)無法比擬的優(yōu)勢(shì),但對(duì)于太赫茲光譜信號(hào)缺乏深入研究。目前對(duì)于儀器、樣本特征和測(cè)量環(huán)境變化帶來的信號(hào)干擾,并沒有通用的解決方法,缺乏對(duì)于處理效果進(jìn)行評(píng)定的指標(biāo),通常只能對(duì)采集的光譜進(jìn)行簡(jiǎn)單處理來解決一些主要的問題,包括:提高信噪比、過濾噪聲影響、有效光譜范圍篩選等。本研究所用實(shí)驗(yàn)儀器信噪比在一定范圍內(nèi)高達(dá)70 dB,在對(duì)樣本信號(hào)進(jìn)行FFT變換前也選取了特定的切趾函數(shù)去除噪聲影響,但實(shí)驗(yàn)過程中仍然受到各種隨機(jī)噪聲的干擾。本次實(shí)驗(yàn)采集到的花生樣本信號(hào),是在較低和較高頻域(即在10 cm-1以下和120 cm-1以上),受噪聲干擾嚴(yán)重,信噪比下降劇烈,光譜振蕩明顯。因此,需要人為地對(duì)樣本信號(hào)進(jìn)行有效光譜范圍篩選。
2.1.2光譜范圍篩選
本研究使用的THz脈沖光譜儀ATR模塊工作范圍在10~120 cm-1頻域內(nèi),但是通過觀察實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),所有樣本的吸收系數(shù)和折射率均在116 cm-1左右就開始受到隨機(jī)噪聲干擾,因此,本研究通過對(duì)有效光譜范圍篩選,即手動(dòng)選擇10~116 cm-1作為吸收系數(shù)和折射率數(shù)據(jù)的有效頻域進(jìn)行后續(xù)研究分析,簡(jiǎn)單有效地剔除了噪聲信息干擾。
在10~116 cm-1頻域內(nèi),隨著頻率的增加,所有樣本的吸收系數(shù)整體呈水平趨勢(shì),折射率則呈現(xiàn)微弱上升趨勢(shì),但重疊度較高,難以分辨。局部區(qū)域放大發(fā)現(xiàn),3個(gè)品種的樣本之間的存在明顯差異。圖5為所有樣本在25~40 cm-1的吸收系數(shù)圖,由上往下依次為花育36號(hào)、魯花9號(hào)和魯花1號(hào),吸收系數(shù)越來越低,雖然與含油率沒有明顯的線性關(guān)系,但較高含油率的2個(gè)品種的吸收系數(shù)小于低含油率的花育36號(hào)。相比蛋白質(zhì),脂肪在太赫茲波段的吸收很弱,因此可以推測(cè),含油率較高的花生品種對(duì)太赫茲波的吸收有可能小于含油率較低的品種。這一點(diǎn)也與時(shí)域信號(hào)大致相符。
圖5 吸收系數(shù)局部圖Fig.5 Local graph of absorption coefficient
圖6a、6b分別為3種樣本在10~20 cm-1、20~116 cm-1的折射率圖,其中,20 cm-1是一個(gè)轉(zhuǎn)折點(diǎn)。在20 cm-1以下,由上往下分別為魯花1號(hào)、魯花9號(hào)和花育36號(hào),折射率依次降低,且與吸收系數(shù)變化方向相反;在20 cm-1以上,由上往下依次為花育36號(hào)、魯花9號(hào)和魯花1號(hào),這與吸收系數(shù)變化方向一致。雖然相比吸收系數(shù),含油率均較高的魯花9號(hào)和魯花1號(hào)界限不是十分清晰,但與低含油率的花育36號(hào)差異明顯。因此,3種樣本在其吸收系數(shù)和折射率上存在的差異,可為花生品種鑒別模型的建立提供可能。
圖6 折射率局部圖Fig.6 Local graphs of index of refractive indices
如圖5、6所示,難以直觀地從圖中曲線來區(qū)分樣本所屬的品種,因此有必要借助定性方法來建立定性模型,實(shí)現(xiàn)對(duì)花生品種進(jìn)行快速鑒別的目的。本研究選取所有樣本的吸收系數(shù)數(shù)據(jù),結(jié)合距離匹配(Distance match,DM)定性算法,建立基于吸收系數(shù)的花生品種快速鑒別模型。距離匹配是一種常用的定性算法,通過計(jì)算每個(gè)樣本到各自類別中心點(diǎn)的距離,來判別一個(gè)未知樣本到兩個(gè)或更多已知樣本類別的匹配程度。本研究中得到的不同的3種花生切片樣本的吸收系數(shù)和折射率曲線差異較小難以分辨,主要的不同僅體現(xiàn)在曲線的上下分布。在這種情況下,距離匹配算法可以很好地建立不同含油率的分類模型,能用于測(cè)試單個(gè)樣本的種類和等級(jí)。
(1)
最后計(jì)算距離匹配值,即計(jì)算新光譜中超出距離匹配限(設(shè)為4.9)的波長(zhǎng)點(diǎn)所占總波長(zhǎng)點(diǎn)的百分比,便可得到該未知樣本與每個(gè)類別之間的匹配值。匹配值在0~100%之間,匹配值越接近于0,表示該樣本距某個(gè)類別越近,因此會(huì)被歸屬到這個(gè)類別。
本研究為放大和分辨重疊信息,并減小隨機(jī)噪聲和提高信噪比,對(duì)2.1.2節(jié)中的光譜使用一階導(dǎo)數(shù)和歸一化處理,建立基于吸收系數(shù)的距離匹配模型。隨機(jī)挑選15個(gè)樣本對(duì)模型進(jìn)行測(cè)試,剩余45個(gè)作為建模集樣本。模型結(jié)果如圖7所示,橫、縱坐標(biāo)分別代表樣本與不同類別的馬氏距離。圖中箭頭所指為1個(gè)錯(cuò)誤預(yù)測(cè)樣本,剩余14個(gè)測(cè)試樣本都準(zhǔn)確地被劃分到自身所屬類別當(dāng)中。因此,模型預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率為93.3%。
圖7 距離匹配定性識(shí)別結(jié)果Fig.7 Qualitative identification results of DM
為更清楚地說明預(yù)測(cè)結(jié)果,樣本距離各個(gè)類別的匹配值和具體預(yù)測(cè)結(jié)果如表1所示。其中,類別1為花育36號(hào)樣本,類別2為魯花1號(hào)樣本,類別3為魯花9號(hào)樣本。
花生品種鑒別對(duì)于新品種的選育、榨油方式選取和提高制油產(chǎn)量以及食用加工品質(zhì)等都起著至關(guān)重要的作用。利用太赫茲衰減全反射技術(shù)研究了花育36號(hào)、魯花1號(hào)和魯花9號(hào)3個(gè)花生品種在0.3~3.6 THz波段的時(shí)域譜、吸收系數(shù)譜和折射率譜。通過比較,發(fā)現(xiàn)3種花生在此頻率范圍內(nèi)的吸收系數(shù)譜和折射率譜都存在顯著差異。因此通過一階導(dǎo)數(shù)及歸一化處理,結(jié)合距離匹配算法,建立了相應(yīng)的吸收系數(shù)分類模型。結(jié)果表明,距離匹配算法對(duì)未知樣本的總體識(shí)別準(zhǔn)確率高達(dá)93.3%,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)不同花生品種進(jìn)行快速分類鑒別,這說明利用太赫茲衰減全反射光譜技術(shù)結(jié)合一定的分類算法快速鑒別花生品種具有可行性。
表1 距離匹配定性識(shí)別結(jié)果Tab.1 Qualitative identification result of distance match
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