趙志兵 孫百勝 任延玲 法云智 邱業(yè)峰

(1. 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心，北京 100071)(2. 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬307醫(yī)院急診科，北京 100071)

比格犬(Beagle dog)又稱小獵兔犬，原產(chǎn)于英國。由于其性情溫順、生理指標穩(wěn)定、測試結(jié)果重復(fù)性好、遺傳性能穩(wěn)定、反應(yīng)均一等，在藥理學(xué)、毒理學(xué)等多個領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，被作為國際通用的標準化實驗用犬。本研究旨在建立比格犬深靜脈穿刺置管模型，并探討該模型的應(yīng)用范圍。現(xiàn)報道如下

1 材料與方法

1.1 實驗動物

成年比格犬，8只，雌雄不限，體質(zhì)量(8.0±1.2)kg，平均體質(zhì)量8.2 kg。北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院豐臺實驗動物中心提供，動物合格證編號：SCXK(京)2015-0005。

1.2 主要實驗材料

(1)手術(shù)條件：動物用手術(shù)室、手術(shù)臺、動物用呼吸麻醉機、動物用心電監(jiān)護儀、喉鏡、氧氣瓶、氣管導(dǎo)管(6.5F)。(2)手術(shù)材料：一次性使用深靜脈穿刺包、無菌紗布、醫(yī)用75%酒精、碘伏。(3)藥品：丙泊酚注射液、異氟烷、肝素鈉注射液。

1.3 實驗方法

1.3.1術(shù)前準備：術(shù)前12 h禁食，2 h禁水，比格犬固定于保定架上，在前肢內(nèi)側(cè)備皮，給予丙泊酚注射液1.0 mL/kg體質(zhì)量靜脈推注進行麻醉誘導(dǎo)，取仰臥位于動物手術(shù)臺，固定四肢，行經(jīng)口氣管插管并連接動物用呼吸麻醉機并且給予1.5%～3%異氟烷和氧氣混合吸入麻醉[1-4]，連接動物用心電監(jiān)護儀監(jiān)測比格犬生命體征，前肢頭靜脈建立靜脈通道，在右側(cè)腹股溝或右側(cè)頸部備皮，常規(guī)消毒鋪單。

1.3.2股靜脈穿刺置管術(shù)：右下肢伸直，呈外展外旋位，腹股溝中點搏動最明顯處皮下為股動脈，在其內(nèi)側(cè)0.3～0.5 cm處為股靜脈定位點，在腹股溝下方約2 cm處皮膚穿刺進針。穿刺時左手固定穿刺處皮膚，右手持穿刺針進行穿刺，進針時針體與皮膚呈15°～30°夾角，邊進針邊回抽，見有暗紅色回血后左手固定穿刺針，右手導(dǎo)入導(dǎo)絲，待導(dǎo)絲導(dǎo)入后左手固定導(dǎo)絲，將穿刺針拔出，再用擴張器擴張皮膚及皮下組織，擴張完畢后順導(dǎo)絲植入單腔或雙腔深靜脈導(dǎo)管，導(dǎo)管進入深度約10～12 cm，然后將導(dǎo)管妥善固定并用無菌輔料包扎。用肝素鈉生理鹽水封管。

1.3.3頸內(nèi)靜脈穿刺置管術(shù)：比格犬取仰臥，頭低20°～30°或肩枕過伸位，頭轉(zhuǎn)向?qū)?cè)。找出胸鎖乳突肌的鎖骨頭、胸骨頭和鎖骨三者所形成的三角區(qū)，該區(qū)的頂部即為穿刺點。穿刺針由穿刺點刺入，針體與頸部皮膚呈15°夾角，針尖指向胸鎖關(guān)節(jié)的后下方，邊進針邊回抽，見有暗紅色回血后即表明已進入頸內(nèi)靜脈，左手固定穿刺針，右手導(dǎo)入導(dǎo)絲，待導(dǎo)絲導(dǎo)入后左手固定導(dǎo)絲，將穿刺針拔出，再用擴張器擴張皮膚及皮下組織，擴張完畢后順導(dǎo)絲植入單腔或雙腔深靜脈導(dǎo)管，導(dǎo)管進入深度約8～10 cm，然后將導(dǎo)管妥善固定并用無菌輔料包扎。用肝素鈉生理鹽水封管。

1.3.4肝素鈉生理鹽水的配比：取1 mL含12 500 U的普通肝素鈉注射液，加入到100 mL生理鹽水中，配成濃度為125 U/mL的肝素鈉生理鹽水溶液[5]。

2 結(jié)果

所有比格犬均采取1.5%～3%異氟烷和氧氣混合吸入麻醉，麻醉效果良好，未出現(xiàn)麻醉意外等情況，麻醉誘導(dǎo)和復(fù)蘇均較快，平均蘇醒時間為15 min。行深靜脈穿刺置管術(shù)的8只比格犬手術(shù)前后生命體征穩(wěn)定，導(dǎo)管植入順利，穿刺部位無明顯出血，導(dǎo)管回血正常，通暢性良好，導(dǎo)管末端固定牢靠。股靜脈穿刺置管組4只比格犬平均手術(shù)時間約30 min，血管定位及穿刺操作較容易，術(shù)中出血量較少，術(shù)后對穿刺管的包扎和護理簡單易行。頸內(nèi)靜脈穿刺置管組4只比格犬平均手術(shù)時間約60 min，主要因為比格犬頭部固定及頸內(nèi)靜脈血管定位不如股靜脈清晰，并且術(shù)后對穿刺管的包扎較困難。術(shù)后每天用肝素鈉生理鹽水沖管可保證長期維持管道通暢。根據(jù)需要可以選擇單腔或雙腔深靜脈穿刺導(dǎo)管，術(shù)后留置的導(dǎo)管可以連接血液灌流機或血液透析機，還可以用于獸醫(yī)對比格犬的輸液、搶救輸血等治療過程。對本次參加實驗的兩組比格犬的監(jiān)測指標見表1。

3 討論

比格犬生物學(xué)特性可靠，遺傳性穩(wěn)定，來源清晰，個體差異小，性情溫順，易飼養(yǎng)，抗病能力強，適用于生物醫(yī)學(xué)各學(xué)科的研究[6-9]。其血液循環(huán)系統(tǒng)發(fā)達，器官功能一致，實驗結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好，尤其適合藥理、循環(huán)、生理、毒理、外科、眼科及腫瘤學(xué)病因和治療等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究，是國際醫(yī)學(xué)、生物學(xué)界公認的最標準的理想的實驗用犬，世界衛(wèi)生組織將其定為安全性評價研究的首選犬種，廣泛應(yīng)用于食品、 藥品、農(nóng)藥、化妝品等安全性評價研究[10]。

深靜脈穿刺留置導(dǎo)管術(shù)是臨床重癥監(jiān)護中常用的操作技術(shù)，是危重、大手術(shù)及慢性消耗性疾病患者進行中心靜脈壓監(jiān)測、輸血、輸液、血液透析及血液灌流最有效的途徑之一。深靜脈置管由于保留時間長、輸液種類廣泛、導(dǎo)管彈性好等優(yōu)點[11]，目前已廣泛應(yīng)用于危重患者的救治、腸外靜脈營養(yǎng)、血液標本的采集等，還擴展到血液灌流、血液透析、化療、排除體腔積液等方面。但如果護理不當(dāng)則會造成導(dǎo)管堵塞、血栓形成、導(dǎo)管相關(guān)性感染等嚴重并發(fā)癥，所以在成功置管的同時還需要加強護理措施，例如精細操作、固定導(dǎo)管、重視封管、防止感染等[12]。我院實驗動物中心在保障科研實驗人員完成實驗研究的過程中發(fā)現(xiàn)，有部分實驗研究涉及到對比格犬的血液灌流和血液透析治療并未發(fā)現(xiàn)比格犬深靜脈穿刺置管模型的相關(guān)報道，為更好地配合我院相關(guān)研究人員做好相關(guān)的動物實驗，我們探索建立比格犬深靜脈穿刺置管模型，并探討該模型的應(yīng)用范圍，填補了比格犬深靜脈穿刺置管模型的空白，為今后開展相關(guān)實驗研究提供技術(shù)支持和參考。為提高手術(shù)成功率，全程對比格犬行經(jīng)口氣管插管并連接動物用呼吸麻醉機，給予1.5%～3%異氟烷和氧氣混合吸入麻醉，連接動物用心電監(jiān)護儀監(jiān)測比格犬生命體征，該麻醉方法效果良好，未出現(xiàn)麻醉意外等情況，麻醉誘導(dǎo)和復(fù)蘇均較快，手術(shù)結(jié)束后停止給藥，比格犬很快蘇醒，約10 min即可站立。穿刺置管的方法參照對臨床病人操作進行，由于比格犬和人的解剖有所差異，所以在置管準備階段通過對比格犬解剖探明股靜脈和頸內(nèi)靜脈血管的部位和走向，明顯提高了穿刺置管的成功率。比格犬深靜脈穿刺置管模型的建立，實現(xiàn)了血液灌流及血液凈化等技術(shù)在實驗動物身上的應(yīng)用，為開展相關(guān)臨床基礎(chǔ)研究提供方便。該項技術(shù)也可應(yīng)用于獸醫(yī)對中毒犬行血液灌流或血液凈化救治，對休克犬進行快速大量補液等。