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        抗纖益心濃縮丸對大鼠下腔靜脈血栓形成及凝血功能影響*

        2018-03-28 09:05:29王振濤張曉丹柴松波常紅波
        中國中醫(yī)急癥 2018年3期
        關(guān)鍵詞:抗纖益母草低劑量

        王振濤 張曉丹 吳 鴻 柴松波 常紅波

        (1.河南省中醫(yī)院,河南 鄭州 450002;2.上海中醫(yī)藥大學(xué),上海 200032;3.河南中醫(yī)藥大學(xué),河南 鄭州 450046)

        抗纖益心濃縮丸是本院臨床經(jīng)驗方,由黃芪、紅參、益母草、丹參、澤蘭、等組成,具有益氣、活血、利水的功效。前期臨床觀察和實驗研究表明,抗纖益心方應(yīng)用于擴張型心肌?。馓撗鲎C)患者,在改善臨床癥狀、血流動力學(xué)、心功能及抑制心室重構(gòu)等方面均取得良好療效[1-3],為方便患者應(yīng)用,現(xiàn)已將其研發(fā)制作丸劑。本實驗在前期實驗的基礎(chǔ)上,就抗纖益心濃縮丸在抗靜脈血栓形成及其部分凝血功能方面進行實驗研究?,F(xiàn)報告如下。

        1 材料與方法

        1.1 實驗動物 SD大鼠,雌雄各半,體質(zhì)量(200±20)g,由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供,合格證號:1140700105088。

        1.2 試藥與儀器 抗纖益心濃縮丸由紅參、益母草、丹參、澤蘭、麥冬、黃芪、升麻、茯苓、白術(shù)組成(由河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥劑室提供)。華法林鈉片(2.5 mg/片,上海信宜九福藥業(yè)有限公司,批號:H31022123)。水合氯醛(鄭州派尼有限公司生產(chǎn),批號:20100614)。凝血酶時間(TT)測定試劑盒(德國 Siemens,批號:45625)。凝血酶原時間 (PT)測定試劑盒 (德國Siemens,批號:546887)。部分活化凝血酶原時間(APTT)測定試劑盒(德國 Siemens,批號:557191)。

        1.3 干預(yù)方法 1)抗纖益心濃縮丸對靜脈血栓的影響。取40只SPF級SD大鼠,雌雄各半,隨機分為4組,即模型對照組(等量生理鹽水)、中藥高劑量組(18.8 g/kg),中藥低劑量組(4.7 g/kg),華法林鈉組(1.1 mg/kg)。 各組大鼠每日給藥1次,連續(xù)灌胃1周。末次給藥30 min后,進行深靜脈血栓形成造模[4],將大鼠以4%水合氯醛麻醉,用安爾碘常規(guī)消毒腹部,沿其腹部正中線剪開進腹,將腹腔內(nèi)全部腸管移出,暴露血管,用沾滿生理鹽水的濕紗布包裹腸管,后置于腹部一側(cè),用棉簽逐步分離下腔靜脈,于左腎靜脈下方用粗絲線結(jié)扎下腔靜脈,將暴露的腸管回納腹腔,依次連續(xù)縫合腹腔,于結(jié)扎下腔靜脈4 h后,打開腹腔,在結(jié)扎位置下方2 cm處用止血鉗夾閉管腔,并用小剪刀剪斷瘀血段血管,剖開瘀血段管腔,鑷子取出血栓,放于濾紙上,沾去血液,稱取血栓濕質(zhì)量。后放置烘干機處烘干24 h,稱取血栓干質(zhì)量。2)抗纖益心濃縮丸對大鼠凝血功能的影響。按上述實驗方法,在剖取瘀血段前,將各組大鼠腹主動脈取血,以 3.8%的枸櫞酸鈉(1∶9)抗凝,3000 r/min 離心15 min,分離血漿待測。按試劑盒說明測定APTT、PT、TT。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件。計量資料以(±s)表示。多組間比較,若方差齊,用方差分析,若方差不齊則用非參數(shù)檢驗,兩兩組間比較用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié) 果

        2.1 各組大鼠靜脈血栓干、濕質(zhì)量比較 見表1。中藥高、低劑量組及華法林鈉組均可以減輕結(jié)扎大鼠下腔靜脈所形成的血栓的干、濕質(zhì)量。與模型對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

        表1 各組大鼠靜脈血栓干、濕質(zhì)量比較(mg,±s)

        表1 各組大鼠靜脈血栓干、濕質(zhì)量比較(mg,±s)

        與模型對照組比較,△P<0.05。

        組 別 n 血栓濕質(zhì)量 血栓干質(zhì)量模型對照組 1 0 2 6.2 3±4.4 2 9.9 0±3.1 4中藥高劑量組 1 0 1 5.1 1±4.3 9△ 5.0 4±0.8 4△中藥低劑量組 1 0 2 2.6 7±3.3 5△ 6.8 4±1.9 1△華法林鈉組 1 0 1 1.7 1±1.3 8△ 1.4 8±0.3 5△

        2.2 各組大鼠凝血功能比較 見表2。中藥高、低劑量及華法林鈉組均能延長大鼠PT、TT、APTT。與模型對照組相比,中藥高劑量組及華法林鈉組均能延長PT、TT、APTT,差異具有統(tǒng)計意義(P<0.01)。 中藥高劑量組與華法林鈉組相比,作用相當,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P >0.05)。

        表2 各組大鼠凝血功能比較(s,±s)

        表2 各組大鼠凝血功能比較(s,±s)

        與模型對照組比較,△P<0.05,△△P<0.01。

        組別 n P T T T A P T T模型對照組 1 0 1 3.4 1±1.4 6中藥高劑量組 1 0 2 4.0 2±2.5 3△△中藥低劑量組 1 0 1 5.1 4±1.6 1 4 0.5 3±1 2.0 4 1 7.0 5±1.5 7 5 0.8 5±1 2.6 0△△ 3 6.2 7±4.9 7△△3 7.8 3±6.6 5 2 0.5 2±3.1 0華法林鈉組 1 0 2 5.9 9±3.0 9△△5 3.5 5±3.7 2△△ 3 9.5 3±4.1 5△△

        3 討 論

        近些年,中醫(yī)藥在治療擴張型心肌病方面發(fā)揮了重要作用。根據(jù)疾病的臨床表現(xiàn)本病可歸屬于中醫(yī)“喘證”“胸痹”“心悸”等范疇。筆者在長期治療本病的實踐中歸納其臨床特點,結(jié)合有關(guān)文獻及一些醫(yī)家認識,認為本病早期以氣虛為本,瘀血為標。晚期患者出現(xiàn)心腎陽氣衰微,失去溫煦功能,逐漸出現(xiàn)瘀血、痰濁、水濕,但總以氣虛陽虛為本。其中氣虛是中心環(huán)節(jié),因此筆者認為治療擴張型心肌病可予益氣活血法,擬抗纖益心方治療。方中丹參活血化瘀,通經(jīng)止痛,涼血清心。實驗研究顯示[5],丹參可以明顯抑制血小板聚集、降低血液黏稠度、擴張微血管、增加血流量,從而具有較好的抗血小板聚集、防止血小板活化、防止血栓形成的作用。澤蘭可活血、祛瘀、利水。黃芪益氣、固表、利水,研究[6]顯示黃芪可能通過抑制血管內(nèi)皮細胞PAI-1表達和活性發(fā)揮抗血栓作用。益母草清熱解毒,通經(jīng)活血,利水消腫,現(xiàn)代藥理研究顯示[7-12],益母草提取物具有抗血栓,抗血小板聚集,改善微循環(huán)等作用。

        研究中對照藥選用華法林,是目前臨床中最常用經(jīng)典的抗凝藥之一,其通過抑制凝血因子的活化抑制新的血栓形成,限制血栓的擴大和延展,抑制在血栓的基礎(chǔ)上形成新的血栓,抑制血栓脫落和栓塞的發(fā)生,有利于機體纖溶系統(tǒng)清除已經(jīng)形成的血栓。靜脈血栓形成[13]主要是由于靜脈損傷、血流緩慢、血液高凝引起血液在血管內(nèi)不能正常的凝結(jié),阻塞靜脈管腔,導(dǎo)致血栓的形成。實驗結(jié)果顯示中藥高、低劑量組與模型對照組對比,能夠減少靜脈血栓干濕質(zhì)量,但是效果沒有華法林鈉組顯著。表明抗纖益心濃縮丸可以抑制靜脈血栓的形成,但是效果沒有抗凝藥物華法林鈉的作用明顯。

        凝血功能的測定主要是指測定 APTT、PT、TT[14]。APTT反應(yīng)內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的凝血功能,因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ的水平對APTT的水平有直接影響;PT是反應(yīng)外源性凝血系統(tǒng)的凝血功能,能反應(yīng)血漿凝血酶原的水平,也可以反應(yīng)凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平活性;TT反應(yīng)凝血、抗凝血及纖維蛋白溶解系統(tǒng)功能。對凝血功能的檢測可以了解藥物的相關(guān)凝血功能[15-18]。上述實驗顯示,與模型對照組相比,抗纖益心濃縮丸高、低劑量組及華法林鈉組均能延長PT、TT、APTT,差異具有統(tǒng)計意義(P<0.05),其中,高劑量與華法林鈉組作用更明顯(P<0.01);高劑量組與華法林鈉組相比,作用相當,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。說明抗纖益心濃縮丸可能通過延長APTT、PT、TT,達到一定的預(yù)防血栓形成的作用。

        綜上所述,抗纖益心濃縮丸可以減少靜脈血栓干濕質(zhì)量,亦能延長APTT、PT、TT,從而說明抗纖益心濃縮丸具有一定抑制血栓形成的作用。這可能與抗纖益心濃縮丸對血液運行及凝血系統(tǒng)影響有一定的關(guān)聯(lián),但具體機制有待進一步探究。

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