程鎮(zhèn)燕， 范 澤， 張植元， 曲 木， 劉宏超， 喬秀亭， 白東清

(天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院/天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300384)

糖類或脂肪對蛋白質(zhì)的節(jié)約效應(yīng)是非蛋白能量源影響魚類蛋白需求的關(guān)鍵因素。研究表明，魚類對脂肪的高利用性，使得脂肪能夠充分發(fā)揮節(jié)約蛋白質(zhì)的作用，90%以上的脂肪均可利用于魚體增質(zhì)量和分解供能[1]。但相對更為廉價的能源-糖類在節(jié)約養(yǎng)殖魚類飼料蛋白過程中所產(chǎn)生的效果并不如脂肪那么顯著。大量研究表明，相對于陸生動物，魚類尤其是肉食性魚類對糖的利用能力低下[2]，并擁有自身獨(dú)特的體質(zhì)，這種體質(zhì)有2個特點(diǎn)：“低血糖耐受性”——指魚類對低血糖的耐受能力強(qiáng)[3]；“高血糖不耐受性”——指增加糖負(fù)荷后，魚類血糖水平升高，并且高血糖狀態(tài)持續(xù)的時間長，即臨床上所指的葡萄糖不耐癥[4]，也正因?yàn)榇唆~類被冠以“先天的糖尿病患者”。

隨著近些年研究的深入，發(fā)現(xiàn)造成魚類糖利用能力低下的傳統(tǒng)主流觀點(diǎn)，如魚類血液中胰島素水平較低、魚類外周組織對葡萄糖利用能力較弱、能更為有效地刺激魚類胰島素分泌的因素是氨基酸而非糖類等。但在一些草食性、雜食性魚類，甚至一些肉食性魚類中并非如此[3]，如隨著胰島素放射免疫測定方法的發(fā)展，很多研究發(fā)現(xiàn)魚類胰島素水平相似于甚至高于哺乳動物，鯉魚(Cyprinuscarpio)即使在空腹時胰島素水平也高于哺乳動物[5]，說明內(nèi)生胰島素絕對量的不足并非是造成魚類對糖的低利用性的關(guān)鍵因素[6]。糖負(fù)荷增加后，魚類胰島素響應(yīng)時間通常慢于哺乳動物[7]，也就是說在攝食糖類一段時間后，胰島素調(diào)節(jié)作用才會充分發(fā)揮，與之相關(guān)的調(diào)節(jié)因素包括機(jī)體內(nèi)在的胰島素受體數(shù)量、受體與胰島素的親和力等。在各種魚類中進(jìn)行葡萄糖耐受試驗(yàn)的結(jié)果不盡相同，但有些差異是值得重視的，如血糖峰值出現(xiàn)的時間點(diǎn)因魚種不同而有差異；對不同葡萄糖劑量的應(yīng)答反應(yīng)亦不相同；雜食性魚類的基礎(chǔ)血糖水平比肉食性魚類低[3]等等?？梢姡瑸榱藢?shí)現(xiàn)糖類對養(yǎng)殖魚類飼料蛋白節(jié)約作用的這一設(shè)計(jì)，真正勾勒和展現(xiàn)魚類糖代謝調(diào)控機(jī)制的清晰藍(lán)圖，還有一些空白和存在不一致或矛盾的地方需要未來進(jìn)一步探索。

本試驗(yàn)選擇鯉魚為研究對象，采用葡萄糖耐受試驗(yàn)法，探討和比較了2個葡萄糖注射劑量對鯉魚血糖、血漿胰島素、胰高血糖素、肝糖原及糖酵解與糖異生關(guān)鍵酶的影響，旨在了解鯉魚餐后糖代謝應(yīng)答反應(yīng)特點(diǎn)，為探索和改善典型雜食性魚類——鯉魚的糖利用能力奠定理論基礎(chǔ)和實(shí)踐依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用魚及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)魚由天津天祥水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司所提供，在相同條件下飼養(yǎng)的健康鯉魚幼魚，運(yùn)至天津農(nóng)學(xué)院循環(huán)水養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室后，飼養(yǎng)于5個78 cm×58 cm×46 cm(約200 L)水族箱中，每天投喂商品飼料(粗蛋白32%、粗脂肪6.8%)2次，日投飼率4%左右，基本達(dá)到飽食狀態(tài)。

暫養(yǎng)1周后，選取體質(zhì)健壯、規(guī)格相近、無傷無病的魚隨機(jī)分配到12個78 cm×58 cm×46 cm(約200 L)的水族箱中，每箱放10尾。鯉魚先用市售飼料飼喂2周，然后禁食2周(充分耗盡試驗(yàn)魚肝糖原)，再用于葡萄糖耐受試驗(yàn)。試驗(yàn)時鯉魚平均體質(zhì)量為(36.12±1.18)g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 葡萄糖注射 試驗(yàn)魚在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)后，禁食24 h，然后注射葡萄糖溶液，一組劑量為常用糖耐量試驗(yàn)劑量，為1 670 mg/kg體質(zhì)量，記為高劑量組(H組)；另一組為 417 mg/kg體質(zhì)量，記為低劑量組(L組)。與直接投喂含糖飼料不同，采用注射方式，葡萄糖吸收入血的過程較快，血糖升高幅度也較大。因此，在本試驗(yàn)中設(shè)定了低劑量組，以期觀察到類似于進(jìn)食飼料糖后的代謝反應(yīng)。

從水族箱中逐尾撈取試驗(yàn)魚，H組和L組2個處理組分別依照1 670、417 mg/kg的劑量進(jìn)行腹腔葡萄糖注射。注射前隨機(jī)撈取9尾試驗(yàn)魚，并依次注射相應(yīng)體積的蒸餾水，作為0 h處理。

1.2.2 采樣 在注射后的1、3、6、9、12 h對2個劑量組試驗(yàn)魚采樣，每個水族箱代表一個采樣時間點(diǎn)。采樣時，在每個時間點(diǎn)逐尾撈取對應(yīng)水族箱試驗(yàn)魚，麻醉后用經(jīng)過7%肝素鈉溶液潤濕的2 mL注射器進(jìn)行靜脈抽血，全血樣本以 4 000 r/min 離心10 min，收集血漿。每箱共取9尾魚，每3尾魚的血漿合并為一個樣本。血漿保存于-80 ℃冰箱中待測。

1.2.3 指標(biāo)測定 血糖采用葡萄糖氧化酶——過氧化物酶法進(jìn)行測定，試劑盒由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。血漿胰島素、胰高血糖素均采用購自南京建成生物工程研究所的酶聯(lián)免疫試劑盒測定。血漿中丙酮酸激酶(PK)和己糖激酶(HK)的活性均使用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行測定。肝糖原用堿消化法測定。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 注射不同劑量葡萄糖后鯉魚血漿葡萄糖含量隨時間的變化

2個劑量組鯉魚在注射葡萄糖后的12 h內(nèi)血糖含量的總體趨勢相似。注射葡萄糖后1 h血糖值迅速升高，隨后迅速下降，并在6 h時降至空腹水平，隨后繼續(xù)下降，但在12 h時又恢復(fù)至空腹水平。但兩者血糖含量達(dá)到峰值的時間不同，H組在3 h時達(dá)到峰值，而L組在1 h達(dá)到峰值。2個劑量組血糖含量的變化幅度不同，在6 h前H組鯉魚血糖值在注射葡萄糖后的每個時間點(diǎn)均高于L組，且在注射后的1、3 h時，H組血糖值顯著高于L組(P<0.05)(圖1)。

2.2 注射不同劑量葡萄糖后鯉魚血漿胰島素含量隨時間的變化

由圖2可知，2個劑量組鯉魚血漿胰島素含量在注射前和注射后的每個時間點(diǎn)均無顯著差異(P>0.05)。注射葡萄糖后，H組鯉魚血漿胰島素含量從注射前的6.76 mIU/L上升至約10.54 mIU/L，然后呈下降趨勢，但均高于注射前水平。L組血漿胰島素含量變化幅度較小，注射葡萄糖后1 h血漿胰島素含量上升至約7.33 mIU/L，在之后的3～12 h內(nèi)幾乎沒有變化，均接近于注射前水平。

2.3 注射不同劑量葡萄糖后鯉魚血漿胰高血糖素含量隨時間的變化

在注射前和注射后的每個時間點(diǎn)2個劑量組鯉魚血漿胰高血糖素含量差異并不顯著(P>0.05)。注射葡萄糖后6 h內(nèi)，2個劑量組鯉魚血漿胰高血糖素變化相似，均呈先下降后上升再下降的趨勢。而在注射6 h后，2個劑量組血漿胰高血糖素含量呈不同的的變化趨勢，H組含量先上升后恢復(fù)至注射前水平，L組則是先下降后恢復(fù)至注射前水平(圖3)。

2.4 注射不同劑量葡萄糖后鯉魚血漿肝糖原含量隨時間的變化

由圖4可見，在注射葡萄糖后的不同時間點(diǎn)H組鯉魚肝糖原含量大體上高于注射前的水平(8.19 mg/g)，但與注射前水平相比差異不顯著(P>0.05)。L組鯉魚肝糖原含量在注射葡萄糖后的不同時間點(diǎn)則總體低于注射前的水平。在注射葡萄糖后6 h時，H組和L組均恢復(fù)至注射前水平，但之后兩組呈現(xiàn)不同的變化，H組肝糖原含量先上升，在12 h時接近于空腹水平，而L組在6 h后呈下降趨勢。

2.5 注射不同劑量葡萄糖后鯉魚血漿糖酵解關(guān)鍵酶活性隨時間的變化

由圖5、圖6可知，在注射葡萄糖后H組和L組鯉魚糖酵解關(guān)鍵酶活性的變化趨勢相似。丙酮酸激酶的活性均在注射葡萄糖后3 h時達(dá)到最高水平，且顯著高于其他各時間點(diǎn)(P<0.05)。而2個劑量組鯉魚在注射葡萄糖后12 h內(nèi)血漿己糖激酶活性均未發(fā)生顯著變化(P>0.05)。

3 討論

3.1 注射不同劑量葡萄糖對鯉魚血漿葡萄糖含量的影響

“葡萄糖耐量”是指經(jīng)口攝入或注射葡萄糖使血糖水平升高后，由機(jī)體細(xì)胞從血液中帶走的糖使得血糖濃度降到原來正常水平的速度，用曲線來表示這一變化叫做耐糖曲線。在本研究中，注射葡萄糖后高、低2個劑量組鯉魚的耐糖曲線存在一定差異，2組血糖含量峰值、達(dá)到峰值的時間及血漿葡萄糖含量恢復(fù)至注射葡萄糖前水平的時間均不同。H組在 3 h 時達(dá)到峰值，峰值約為14.98 mmol/L，血糖恢復(fù)時間為 6 h，而L組在1 h達(dá)到峰值，峰值約為8.86 mmol/L，血糖恢復(fù)時間為3 h。

耐糖曲線的意義在于通過曲線中的“兩值兩時”，即空腹血糖值、口攝人或注射葡萄糖后血漿葡萄糖含量的峰值、達(dá)到峰值的時間及血糖恢復(fù)時間，可以直觀地看出機(jī)體血糖變化情況從而推斷出機(jī)體對血糖濃度的調(diào)節(jié)能力?？崭寡?6.1 mmol/L，30～60 min血漿葡萄糖含量達(dá)高峰，峰值<11.1 mmol/L，2 h恢復(fù)到正常水平，即<7.8 mmol/L，上述為人類正常糖耐量水平，依據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)發(fā)現(xiàn)低劑量組鯉魚的耐糖曲線與上述描述吻合，說明本試驗(yàn)中，注射葡萄糖劑量為417 mg/kg時，鯉魚表現(xiàn)出較強(qiáng)的降低血糖負(fù)荷能力，這與同為雜食性魚類的羅非魚糖耐受試驗(yàn)結(jié)果[8]一致。而注射葡萄糖劑量為1 670 mg/kg時，鯉魚表現(xiàn)出糖耐量降低癥狀，但相對于其他魚類仍表現(xiàn)出較強(qiáng)的降低血糖負(fù)荷能力。在蔡春芳等對異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)進(jìn)行的葡萄糖耐量試驗(yàn)中，禁食時血糖含量為 6.06 mmol/L，在灌喂1 670 mg/kg葡萄糖后，1 h血糖顯著升高，達(dá)16.53 mmol/L，3 h升至 21.27 mmol/L，3 h后血糖開始緩慢下降，但18 h時血糖仍顯著高于禁食水平[9]。同采用腹腔注射方式，大菱鲆(Scophthalmusmaximus)在注射1 000 mg/kg葡萄糖時血糖恢復(fù)時間約需24 h[10]，虹鱒(Oncorhynchusmykiss)在注射 3 000 mg/kg 葡萄糖時血糖恢復(fù)時間約需18 h[11]。由此可以看出，雜食性魚類由高血糖狀態(tài)恢復(fù)到空腹水平的速度通常要快于肉食性魚類[12-13]。上述分析表明，葡萄糖負(fù)荷后鯉魚降低高血糖能力相對強(qiáng)于其他魚類，而灌喂或注射后魚類葡萄糖的應(yīng)答反應(yīng)也因魚種和劑量而異。

3.2 注射不同劑量葡萄糖后鯉魚的激素調(diào)節(jié)機(jī)制

在哺乳動物中，胰島素/胰高血糖素是一對拮抗調(diào)節(jié)血糖變化的激素，可進(jìn)行降血糖或升血糖調(diào)節(jié)。胰島素是一種降低血糖的激素，是促進(jìn)合成的激素，主要作用是促進(jìn)葡萄糖的轉(zhuǎn)化和糖原的生成，抑制糖原異生，從而維持血糖的動態(tài)平衡，而胰高血糖素的作用正好與之相反。因?yàn)橐葝u素在哺乳動物調(diào)節(jié)和維持血糖動態(tài)平衡中的關(guān)鍵作用和地位，所以在進(jìn)行口服糖耐量試驗(yàn)的同時，通常也會進(jìn)行胰島素釋放試驗(yàn)，來了解胰島B細(xì)胞的儲備功能，從而有助于糖尿病的早期診斷、分型和指導(dǎo)治療[14-15]。在本研究中也對注射不同劑量葡萄糖后鯉魚胰島素的變化情況進(jìn)行了檢測，將耐糖曲線和胰島素釋放曲線結(jié)合分析，發(fā)現(xiàn)雖然高低劑量組的2種曲線存在一定差異，但均能證明鯉魚為糖尿病體質(zhì)，首先空腹胰島素含量約為6.75 mIU/L，略低于正常水平，在高劑量組中，血糖在注射后3 h達(dá)到最高水平，而在高血糖的刺激下胰島素卻在6 h時達(dá)到最高，刺激后呈遲緩反應(yīng)，且峰值低于正常應(yīng)到達(dá)的水平，表現(xiàn)為“胰島素釋放障礙型”；而在低劑量組中，雖然血糖和胰島素峰值均出現(xiàn)在注射后1 h，但因?yàn)槲礄z測注射后2 h血漿胰島素濃度，無法確定峰值出現(xiàn)時間，需要在今后的研究中進(jìn)一步確定，但從總體趨勢來看，所表現(xiàn)類型亦屬于“胰島素釋放障礙型”。這種類型在人類臨床醫(yī)學(xué)中屬于2型糖尿病，原名叫成人發(fā)病型糖尿病。2型糖尿病患者體內(nèi)產(chǎn)生胰島素的能力并非完全喪失，而是因胰島素受體數(shù)量少，且與胰島素親和力弱，導(dǎo)致胰島素的作用效果較差[16]。這種情況也在魚類的糖耐量試驗(yàn)中得到證實(shí)，如吉富羅非魚(Oreochromismiloticus)[17]。上述分析表明，胰島素及其受體的響應(yīng)時間滯后于血糖反應(yīng)的特點(diǎn)是魚類對糖不耐受的一個十分重要的原因。

血糖穩(wěn)態(tài)的一個重要特征是胰島A細(xì)胞有效地釋放胰高血糖素，但是近年隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)胰高血糖素分泌調(diào)節(jié)受損可能是誘發(fā)糖尿病的另一獨(dú)立因素[16，18-19]，特別是2型糖尿病體質(zhì)的患者。在本研究中，在低劑量組中，胰高血糖素含量隨血糖含量變化較為正常。但在高劑量組中，由于機(jī)體長時間處于高血糖狀態(tài)，胰島A細(xì)胞對血糖的敏感性下降，導(dǎo)致血糖對胰高血糖素分泌的抑制作用減弱。此外，還發(fā)現(xiàn)胰島素水平的升高并不能抑制胰高血糖素的分泌，提示胰島A細(xì)胞存在胰島素抵抗。

3.3 注射不同劑量葡萄糖后鯉魚的糖代謝調(diào)節(jié)機(jī)制

糖代謝包含了很多途徑，雖看似雜亂無章、毫無關(guān)聯(lián)，但實(shí)際上每個途徑之間都有一個非常關(guān)鍵的紐帶將它們聯(lián)系在一起，使得糖代謝能夠高效有序地進(jìn)行。因此，在分析糖代謝過程時，應(yīng)該用聯(lián)系的觀點(diǎn)分析各個途徑，找出相互影響、相互制約和相互作用的部分，有利于真正了解魚類的糖代謝調(diào)節(jié)機(jī)制。魚類的糖代謝途徑主要通過肝臟的糖酵解、糖異生、檸檬酸循環(huán)、磷酸戊糖、糖原合成和降解等過程。在本研究中，在注射葡萄糖后，對糖酵解的關(guān)鍵限速酶及肝糖原含量進(jìn)行了檢測，結(jié)合耐糖曲線和胰島素釋放曲線綜合分析發(fā)現(xiàn)：注射高劑量葡萄糖時血漿血糖含量呈上升趨勢且在3 h出現(xiàn)峰值，在6 h時含量迅速降低至接近注射前水平，而糖酵解關(guān)鍵酶己糖激酶和丙酮酸激酶活性注射后也呈上升趨勢且峰值也出現(xiàn)在3 h，后因血糖含量下降二者的活性也逐漸下降。在分析肝糖原含量變化時應(yīng)考慮其變化是一個合成與分解同時存在的動態(tài)平衡過程，注射后1 h因糖酵解酶活性不強(qiáng)，所以參與糖原合成的血糖較多，肝糖原含量呈上升趨勢，隨著時間的推進(jìn)，糖酵解關(guān)鍵酶活性逐漸增強(qiáng)，參與糖原合成的血糖減少，在注射后3 h，糖酵解關(guān)鍵酶活性出現(xiàn)峰值，糖酵解強(qiáng)度最大，而肝糖原此時分解大于合成，所以3 h時其含量出現(xiàn)了低峰，之后隨血糖含量下降肝糖原卻在3～9 h呈上升趨勢，是因?yàn)檠獫{胰島素的含量在不斷上升，并在6 h出現(xiàn)峰值，促進(jìn)了肝糖原的合成。在9 h后的下降趨勢是因?yàn)轶w內(nèi)血糖水平已低于注射前水平，需要通過肝糖原的分解來調(diào)節(jié)體內(nèi)血糖濃度恢復(fù)至正常水平。注射低劑量葡萄糖時，血漿血糖含量呈上升趨勢且在1 h出現(xiàn)峰值，而糖酵解關(guān)鍵酶的變化情況相同，所以血糖含量在1 h后呈現(xiàn)下降趨勢。血糖含量雖在 1 h 出現(xiàn)峰值，但明顯低于正常峰值水平，且其中一部分還參與糖酵解，所以需要肝糖原分解來維持血糖平衡，因此肝糖原含量呈下降趨勢，之后肝糖原的變化趨勢及原因與注射高劑量葡萄糖時相同。鯉魚的這種糖代謝機(jī)制在其他魚類的糖耐量試驗(yàn)中并未出現(xiàn)過，如同食性的吉富羅非魚表現(xiàn)出糖酵解關(guān)鍵酶活性和糖原含量出現(xiàn)峰值的時間依然滯后于魚類對糖類的吸收[8]，以及肉食性的斜帶石斑魚(Epinepheluscoioides)表現(xiàn)出高葡萄糖負(fù)荷下肝糖原合成代謝增強(qiáng)，而低葡萄糖負(fù)荷下肝糖原分解代謝增強(qiáng)[20]。上述分析表明，葡萄糖負(fù)荷后鯉魚通過糖代謝途徑調(diào)節(jié)血糖處于動態(tài)平衡的能力相對強(qiáng)于其他魚類，但上述分析僅是從宏觀水平去解釋了糖代謝關(guān)鍵酶活性及糖原含量在葡萄糖負(fù)荷后如何發(fā)生變化，并未從微觀水平闡述糖代謝調(diào)節(jié)機(jī)制和找出其中影響糖代謝的關(guān)鍵因子，如鯉魚胰島素受體數(shù)量及其作用于胰島素的響應(yīng)時間和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體家族轉(zhuǎn)運(yùn)能力在葡萄糖負(fù)荷后會發(fā)生怎樣的變化，這些可以在今后的研究中進(jìn)行深入的研究。

4 結(jié)論

通過對鯉魚注射葡萄糖后的耐糖曲線和胰島素釋放曲線分析發(fā)現(xiàn)，血糖水平顯著提高，且維持時間較長，激素調(diào)節(jié)相對滯后，屬于2型糖尿病體質(zhì)。但同時發(fā)現(xiàn)鯉魚自身的糖代謝調(diào)節(jié)對于這種體質(zhì)有很好的適應(yīng)，糖酵解關(guān)鍵酶活性與血糖含量同時達(dá)到峰值，糖原的合成與分解靈活且有效地調(diào)節(jié)著血糖濃度的平衡。因此，胰島素及其受體的響應(yīng)時間滯后于血糖反應(yīng)的特點(diǎn)是鯉魚糖耐量降低的一個十分重要的原因。目前，關(guān)于鯉魚胰島素受體數(shù)量及其作用于胰島素的響應(yīng)時間和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體家族轉(zhuǎn)運(yùn)能力在葡萄糖負(fù)荷后如何變化的研究相對較少，尚待進(jìn)一步思考和探索。

[1]李愛杰. 水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1996：18-19.

[2]蔡春芳，陳立僑. 魚類對糖的利用評述[J]. 水生生物學(xué)報(bào)，2006，30(5)：608-613.

[3]Polakof S，Mommsen T P，Soengas J L. Glucosensing and glucose homeostasis：from fish to mammals[J]. Comparative Biochemistry and Physiology Part B：Biochemistry and Molecular Biology，2011，160(4)：123-149.

[4]Legate N J，Bonen A，Moon T W. Glucose tolerance and peripheral glucose utilization in rainbow trout (Onacorhyachusmykiss)，American eel(Anguillarostrata)，and black bullhead catfish(Ameiurusmelos)[J]. General and Comparative Endocrinology，2001，122(1)：48-59.

[5]Hertz Y，Epstein N，Abraham M，et al. Effects of metformin on plasma insulin，glucose metabolism，and protein synthesis in the common carp(CyprinuscarpioL.)[J]. Aquaculture，1989，80(1/2)：175-187.

[6]Mommse T P，Plisetskaya E M. Insulin in fishes and agnathans：history，structure and metabolic regulation[J]. Reviews in Aquatic Sciences，1991，4(2/3)：225-259.

[7]Peres H，Gongalves P，Oliva-Teles A. Glueose tolerance in gilthead seabream(Sparusaurata)and European seabass(Dicentrarchuslabrax)[J]. Aquaeulture，1999，179(1/2/3/4)：415-423.

[8]劉含亮，孫敏敏，王紅衛(wèi)，等. 注射葡萄糖對吉富羅非魚血漿生化指標(biāo)、胰島素和糖酵解關(guān)鍵酶的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué)，2012，19(5)：813-820.

[9]蔡春芳，陳立僑，宋學(xué)宏，等. 異育銀鯽口服葡萄糖后血糖、血脂和肝糖原的變化[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2002，26(3)：237-241.

[10]Garcia-Riera M P. Hemre G-I. Glucose tolerance in turbot，ScophthalmusmaximusL.[J]. Aquaculture Nutrition，1996，2(2)：117-120.

[11]Harmon J S，Eilertson C D，Sheridan M A，et al. Insulin suppression is associated with hypersomatostatinemia and hyperglucagonemia in glucose-injected rainbow trout[J]. The American Journal of Physiology，1991，261(3 Pt 2)：R609-R613.

[12]黃鶴忠，丁 磊，宋學(xué)宏，等. 青魚和草魚葡萄糖耐量的比較研究[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué)，2005(4)：496-500.

[13]毛義波，劉泓宇，譚北平，等. 飼料碳水化合物水平及饑餓處理對斜帶石斑魚生長及葡萄糖耐受能力的影響[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2014，38(4)：549-558.

[14]陳偉訓(xùn)，金珍成. OGTT和胰島素釋放試驗(yàn)在肝源性糖尿病的診斷價值[J]. 浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2007，19(1)：9-11.

[15]王純敬，羅玉珍. 肝源性糖尿病患者OGTT和胰島素釋放試驗(yàn)的臨床價值[J]. 北京中醫(yī)藥大學(xué)，2014，12(14)：88-89.

[16]趙靈燕. 2型糖尿病中醫(yī)證候要素診斷量表的研制及初步應(yīng)用研究[D]. 北京：北京中醫(yī)藥大學(xué)，2014.

[17]劉含亮. 注射葡萄糖對羅非魚糖代謝，胰島素受體和GLUT4基因表達(dá)的影響[D]. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

[18]徐 濤，石 梅，邱云霞，等. 胰高血糖素與2型糖尿病及糖調(diào)節(jié)異常的相關(guān)性研究[J]. 中國中藥雜志，2014(12)：2356-2363.

[19]賀宏波. 胰高血糖素與2型糖尿病相關(guān)研究述評[C]//中華中醫(yī)藥學(xué)會糖尿病分會. 第十四次全國中醫(yī)糖尿病大會論文集. 北京：中華中醫(yī)藥學(xué)會糖尿病分會，2012.

[20]楊 偉，葉繼丹，王 琨，等. 斜帶石斑魚經(jīng)葡萄糖灌喂后的代謝反應(yīng)[J]. 水生生物學(xué)報(bào)，2012，36(3)：563-568.