劉淑雯

摘要：隨著抗生素在各領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，致病菌對(duì)大多數(shù)抗生素產(chǎn)生抗性，細(xì)菌耐藥性的出現(xiàn)使抗生素的效果越來越不明顯。噬菌體作為新的抗菌制劑在細(xì)菌性感染的治療方面具有抗生素?zé)o法比擬的優(yōu)勢，可以顯著高效地提高細(xì)菌感染動(dòng)物的存活率，近年來在畜禽疾病防控及人醫(yī)上都有愈加深入的研究及應(yīng)用，成為細(xì)菌性疾病防治新突破。本篇主要綜述了噬菌體的抗菌及防治細(xì)菌性疾病的作用機(jī)理，噬菌體治療技術(shù)的研究、發(fā)展及應(yīng)用，以及其現(xiàn)有進(jìn)展與對(duì)該領(lǐng)域未來發(fā)展方向的展望等等。

關(guān)鍵詞：噬菌體；生物學(xué)特性；噬菌體治療；細(xì)菌感染

Abstract： With the wide application of antibiotics in various fields， pathogenic bacteria are resistant to most antibiotics， and the emergence of bacterial resistance makes the effect of antibiotics less and less obvious. As a new antibacterial preparation， phage has the advantage that antibiotics cant be compared in the treatment of bacterial infections， and can significantly improve the survival rate of bacteria-infected animals. In recent years， there has been more in-depth research on prevention and control of livestock diseases and human medicine. And application， a new breakthrough in the prevention and treatment of bacterial diseases. This article mainly reviews the antibacterial and antibacterial mechanism of bacteriophage， the research， development and application of phage therapeutic technology， as well as its current progress and prospects for the future development of the field.

Key words： phage； biological characteristics； phage therapy； bacterial infection

一、噬菌體的生物學(xué)特性

噬菌體能夠感染細(xì)菌、真菌、放線菌等微生物，病毒屬。Brussow 等[1]研究顯示：噬菌體在自然界中約有1032個(gè)存在，數(shù)目龐大。其生活周期過程呈現(xiàn) 2種類型，烈性和溫和噬菌體。噬菌體在侵襲細(xì)菌的過程中還表現(xiàn)出很獨(dú)特的專一性，一種噬菌體往往只侵染一種細(xì)菌或某一菌株，而對(duì)哺乳類動(dòng)物細(xì)胞無任何影響。此外，其裂解細(xì)菌的效率非常高，效能十分驚人[2]。

二、噬菌體治療技術(shù)

（一）噬菌體治療的作用機(jī)理

不同類噬菌體生物學(xué)特性不同，通常情況下對(duì)噬菌體作用機(jī)理的闡述從烈性噬菌體展開。研究發(fā)現(xiàn)，溶菌周期的差異不影響噬菌體對(duì)細(xì)菌的破壞，一類是吸附注入，即以細(xì)菌的表面蛋白作為受體吸附到細(xì)菌上或利用溶菌酶降解細(xì)菌表面莢膜樣物質(zhì)達(dá)到細(xì)菌細(xì)胞壁。一類是溶菌，該過程由噬菌體中專一溶解基因編碼的特異性蛋白或噬菌體自身蛋白介導(dǎo)的溶解系統(tǒng)來完成。

（二）噬菌體治療必要性及優(yōu)勢

抗生素的濫用使越來越多的致病菌產(chǎn)生抗性，耐藥性問題日趨嚴(yán)重，現(xiàn)代畜牧業(yè)、醫(yī)學(xué)獸醫(yī)學(xué)界面臨巨大挑戰(zhàn)。噬菌體治療方法的出現(xiàn)及時(shí)地為這一問題帶來新機(jī)遇，這種方式十分必要，也具有無與倫比的優(yōu)越性：噬菌體宿主譜窄；有宿主特異性，只破壞目標(biāo)菌而不會(huì)破壞菌群平衡；隨宿主死亡而死亡，不會(huì)有噬菌體殘留；增殖很快；未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的副反應(yīng)；研制速度快，制劑獲取較方便，價(jià)格低廉等等。

（三）噬菌體治療局限

目前，噬菌體治療細(xì)菌性疾病技術(shù)效果顯著但不成熟，完全安全代替抗生素，還需大量研究成果作為支撐，總體存在許多局限：宿主范圍窄，應(yīng)用范圍?。恢蛔饔锰禺惒≡?；穩(wěn)定性差；作用機(jī)制不明；噬菌體攜帶的一些毒素基因可能帶來不利影響，研究[3]表明：細(xì)菌還存在多種抵抗機(jī)制，如吸附抑制、流產(chǎn)感染和溶原狀態(tài)的建立等。

三、噬菌體治療應(yīng)用

（一）應(yīng)用及進(jìn)展

1.畜禽生產(chǎn)

在禽類養(yǎng)殖業(yè)大腸桿菌病、沙門菌病、禽霍亂等細(xì)菌性疾病的發(fā)生概率較高且造成較高致死率，每年造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。利用噬菌體治療細(xì)菌性禽病具備理論與試驗(yàn)基礎(chǔ)，是解決這一問題的良好途徑[4]。

Barrow[5]等對(duì)由致病性大腸埃希菌K1引起的家禽敗血癥和腦膜炎的效果研究以及Atterbury[6]等對(duì)噬菌體清除34日齡肉雞體內(nèi)沙門菌的效果研究，均表明噬菌體能夠顯著清除有害菌。噬菌體在禽類疾病控制方面獲得了許多成果。

2.家畜

家畜細(xì)菌性疾病眾多種類中，以大腸埃希菌引起的疾病最為廣泛與常見。Wall[7]等研究噬菌體對(duì)豬沙門菌的控制作用中認(rèn)為適量噬菌體制劑可有效控制仔豬消化道沙門菌數(shù)量。李隴平等[8]對(duì)金黃色葡萄球菌與奶牛乳房炎的研究也有突破。

3.人醫(yī)臨床應(yīng)用

早期臨床研究表明噬菌體的使用未產(chǎn)生明顯副作用。無論是東歐地區(qū)的臨床治療實(shí)踐，還是歐美等國開展的安全性研究均表明噬菌體具有較高的臨床安全性。對(duì)免疫功能不全患者的使用也未發(fā)現(xiàn)副作用[9]。

（二）實(shí)際應(yīng)用安全性質(zhì)疑

對(duì)噬菌體應(yīng)用安全性的質(zhì)疑，主要集中如下： 是否感染人體細(xì)胞；是否對(duì)人體有毒理作用； 是否破壞正常菌群； 是否引發(fā)內(nèi)毒素血癥。

從理論上來說病毒具有嚴(yán)格的宿主特異性，通常認(rèn)為噬菌體不會(huì)感染人或動(dòng)物細(xì)胞。不少如Hwang [10]，Biswas[11] 等的報(bào)道也是如此。但上述研究多以療效評(píng)價(jià)為主要目的，缺少系統(tǒng)規(guī)范性，用藥者本身體質(zhì)狀況不同也有影響。現(xiàn)階段仍存在安全質(zhì)疑。[12]

（三）噬菌體疾控治療相關(guān)優(yōu)化方法

噬菌體疾控治療存在不少威脅，但相應(yīng)也發(fā)展出了不同的優(yōu)化方法例如篩選、穩(wěn)定并純化裂解效果好的噬菌體使其商品化；制混合制劑（雞尾酒）；提取裂解酶純化利用；噬菌體改造技術(shù)等等。

值得一提的是噬菌體改造技術(shù)，包括體內(nèi)同源重組、酵母改造系統(tǒng)、合成噬菌體等方法。體內(nèi)同源重組指兩條不同的含有一段23 bp以上同源序列的DNA鏈同源重組并人為進(jìn)行插入、敲除或替換操作。合成噬菌體：直接合成則省略了改造、重組和篩選等諸多程序，在堿基水平直接合成目的噬菌體[13]。酵母改造系統(tǒng)在這里不作過多解釋。

四、展望

抗生素的耐藥性及治療效果問題愈加嚴(yán)重，人們正加急找尋其可靠替代品。噬菌體以其各方面的優(yōu)越性被一些著名的科學(xué)家、醫(yī)藥公司及企業(yè)所關(guān)注，被認(rèn)為是替代抗生素的首選。毫無疑問噬菌體治療細(xì)菌性疾病的應(yīng)用將會(huì)不斷取得突破，越來越多噬菌體產(chǎn)品會(huì)走向市場[14]，逐步替代抗生素。

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