安 寧，張 明，蘭海濤(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院腫瘤科，四川 成都 610072)

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，在女性惡性腫瘤的發(fā)病率僅次于乳腺癌，其發(fā)病年齡呈低齡化趨勢(shì)，近年來(lái)在我國(guó)的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，其中西部地區(qū)宮頸癌的發(fā)病率高于東部，這與西部地區(qū)經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)，很多婦女沒有定期體檢，缺乏衛(wèi)生知識(shí)，生活方式不健康有關(guān)。早期宮頸癌以根治性手術(shù)為主，中晚期則以放化療為主，酌情輔以手術(shù)。胸苷激酶 1(thymidine kinase1，TK1)為一種核苷激酶，在嘧啶代謝循環(huán)中可與細(xì)胞DNA合成與增殖相關(guān)的關(guān)鍵酶，在非增殖細(xì)胞及健康人血清中檢測(cè)不到或含量極少，但在惡性腫瘤患者中可隨腫瘤細(xì)胞的大量增殖而升高[1]。由于TK1與惡性腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖關(guān)系密切，可用于評(píng)估其增殖速度從而檢測(cè)惡性腫瘤的增殖度[2]。研究表明血清胸苷激酶 1(serum thymidine kinase 1，S-TK1)有利于多種惡性腫瘤的早期篩查診斷、評(píng)價(jià)療效、判斷預(yù)后。而血清腫瘤標(biāo)志物CA125作為宮頸癌檢測(cè)的良好指標(biāo)已在臨床廣泛應(yīng)用。本研究通過監(jiān)測(cè)我院腫瘤中心2014年至2017年期間收治的局部進(jìn)展期子宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者放化療前后S-TK1及相關(guān)腫瘤標(biāo)志物水平，以探索S-TK1在局部進(jìn)展期子宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者放化療療效評(píng)估的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇2014～2017年我院腫瘤中心收治的子宮頸癌患者38例作為觀察組，納入標(biāo)準(zhǔn)：均經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)為子宮頸鱗狀細(xì)胞癌，初診外科手術(shù)不可切除，分期為IIB～I(xiàn)VA期，年齡29～67歲，中位年齡51歲；KPS評(píng)分≥70分，預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月，可耐受治愈性的放化療，入組前未接受任何抗腫瘤治療。治療前骨髓功能、肝腎功能、心電圖等基本正常，無(wú)放化療禁忌證。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤者；孕期或哺乳期婦女；存在精神疾病者。健康組30例，納入標(biāo)準(zhǔn)：隨機(jī)選取我院體檢中心女性健康體檢人群，年齡30～70歲，中位年齡48歲；排除月經(jīng)期、炎性疾病、貧血、良性腫瘤等情況。

1.2治療方法觀察組采用TP方案化療，放療前輔助化療具體劑量為：紫杉醇135 mg/m2，ivgtt，d1(或紫杉醇脂質(zhì)體175 mg/m2，ivgtt 2 h，d1+順鉑75 mg/m2，ivgtt，d1，21天為1周期。同步放化療時(shí)化療具體劑量為：紫杉醇60 mg/m2，ivgtt，d1+ 順鉑40 mg/m2，ivgtt，d1，14天為1周期。放療采用IMRT技術(shù)盆腔外照射，GTV包括原發(fā)腫瘤和腫大轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)，CTV包括GTV、宮頸、宮體、宮旁、陰道及髂總、髂內(nèi)、髂外、閉孔、骶前淋巴結(jié)引流區(qū)；GTV劑量為5500 Gy/220 Gy/25 f，CTV劑量為4500 Gy/180 Gy/25 f。所有患者至少完成2周期輔助化療或同步化療及25次放療，放療結(jié)束后14～30天評(píng)價(jià)療效，再酌情考慮手術(shù)治療。根據(jù)RECIST1.1標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)患者近期客觀療效，包括完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)和進(jìn)展(PD)，總有效率(RR)=CR率+PR率。

1.3S-TK1及血清腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及結(jié)果判斷

采集38例局部進(jìn)展期子宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者治療前1周內(nèi)及放療結(jié)束后14～30天的清晨空腹靜脈血各3 ml，30例健康體檢者采集清晨空腹靜脈血3 ml，所有采集的標(biāo)本在3000 ～4000 r/min離心5 min后分離血清，儲(chǔ)存于-80 ℃冰箱中。采用深圳市華瑞同康生物技術(shù)有限公司的 TK1 診斷試劑盒，通過免疫印跡增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法檢測(cè) S-TK1水平，光強(qiáng)度用CIS化學(xué)發(fā)光數(shù)字成像分析儀進(jìn)行分析。S-TK1單位為pmol/L，其檢測(cè)值大于2為結(jié)果陽(yáng)性[4]。在采集S-TK1的同時(shí)采集靜脈血進(jìn)行血清腫瘤標(biāo)志物CA125的檢測(cè)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組之間比較采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1觀察組與健康組S-TK1及CA125水平比較

觀察組S-TK1水平及陽(yáng)性率均高于健康組(P< 0.05)，CA125水平及陽(yáng)性率也均高于健康組(P< 0.05)；觀察組經(jīng)放化療后S-TK1及CA125水平均低于治療前(P< 0.05)，見表1。

表1 健康組與觀察組治療前后S-TK1及CA125水平比較

*與健康組比較，P<0.05

2.2觀察組S-TK1、CA125水平與放化療療效的比較觀察組放化療后CR+PR組及SD組測(cè)得S-TK1及CA125水平低于放化療前水平(P< 0.05)，且CR+PR組最低；而PD組放化療后S-TK1及CA125水平較放化療前是明顯升高(P< 0.05)，見表2。

*與治療組比較，P<0.05

2.3不同臨床病理特征之間S-TK1、CA125水平比較觀察組患者不同年齡、一般狀況、分期、腫瘤分化程度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間S-TK1及CA125水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)，見表3。

3 討論

胸苷激酶(thymidine kinase，TK)可催化脫氧胸苷轉(zhuǎn)變成脫氧胸苷酸，為合成DNA提供原料，是細(xì)胞內(nèi)嘧啶代謝循環(huán)中的一種關(guān)鍵酶[3]。其中存在于線粒體中的同功酶為線粒體胸苷激酶(TK2)，與細(xì)胞增殖無(wú)關(guān)。TK1定位于細(xì)胞質(zhì)中，與細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂相關(guān)，在細(xì)胞增殖周期中均有不同程度的表達(dá)，在Gl后期和S期迅速增長(zhǎng)，S 后期達(dá)到峰值，G2期降低。而在惡性腫瘤細(xì)胞的大量增殖過程中，TK1的迅速增長(zhǎng)可持續(xù)到M期，大量TK1進(jìn)入外周血，成為臨床評(píng)估惡性腫瘤細(xì)胞增殖程度的基礎(chǔ)。而糖類抗原CA125屬于糖蛋白類，作為血清腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用于臨床，尤其在卵巢癌、宮頸癌、肺腺癌等惡性腫瘤的診斷及療效評(píng)估中具有較為重要的價(jià)值。

表3 S-TK1及CA125水平與患者臨床病理特征的比較

目前大量研究表明肺癌、乳腺癌、食管癌、胃癌、頭頸部腫瘤、膀胱癌、甲狀腺癌患者的S-TK1水平明顯高于正常健康體檢者；部分研究提示其升高程度與腫瘤分期、轉(zhuǎn)移有相關(guān)性。宮頸癌患者在血清及組織中的TK1 水平也被證實(shí)明顯高于正常健康體檢者[4]。另有文獻(xiàn)報(bào)道S-TK1及VEGF、SCC-Ag、IGF-II的聯(lián)合檢測(cè)在宮頸癌的早期篩查診斷中有臨床價(jià)值[5]。本研究聯(lián)合檢測(cè)了38例局部進(jìn)展期子宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者治療前及30例健康體檢者的S-TK1及CA125水平，發(fā)現(xiàn)患者的S-TK1、CA125水平及陽(yáng)性率均高于健康體檢者。該結(jié)果也為S-TK1及CA125在宮頸癌早期篩查及診斷中的臨床應(yīng)用提供了一些依據(jù)。

近年多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤患者經(jīng)過手術(shù)、放化療等治療后其S-TK1水平也有不同程度的變化。宮頸癌患者手術(shù)前S-TK1水平較正常人群明顯升高，手術(shù)后其濃度水平明顯下降[6]。有研究[7]檢測(cè)宮頸癌患者發(fā)現(xiàn)，同步放化療后S-TK1及CA125水平較治療前均顯著下降。本研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者治療后S-TK1及CA125水平均低于治療前。進(jìn)一步通過療效分組后發(fā)現(xiàn)，CR+PR組、SD組及PD組治療后組間S-TK1及CA125水平有明顯差異，其中PD組最高，且高于治療前水平；且 CR+PR組及SD組放化療后明顯低于治療前，其中CR+PR組最低。有研究者也發(fā)現(xiàn)在小細(xì)胞肺癌患者中化療前后PD組、SD組、PR組和CR組S-TK1水平呈遞減趨勢(shì)[8]。由此可見，S-TK1及CA125的動(dòng)態(tài)變化用于宮頸癌等惡性腫瘤患者的療效評(píng)估具有一定的可行性。

趙曉龍等[9]通過研究TK1在肺癌患者血清中的表達(dá)水平及其與腫瘤臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，肺癌患者S-TK1呈高表達(dá)，且其表達(dá)水平與TNM分期、是否遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)。另有研究表明[10]S-TK1的升高與惡性腫瘤患者的年齡、性別、部位、TNM分期、化療方案、既往治療史、檢測(cè)時(shí)間無(wú)關(guān)。在本研究中根據(jù)患者的年齡、一般狀況、分期、腫瘤分化程度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移這5個(gè)臨床病理特征進(jìn)行分組，發(fā)現(xiàn)組間的S-TK1及CA125水平變化無(wú)明顯差異。此結(jié)果有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行相關(guān)研究證實(shí)。

綜上所述，S-TK1及CA125的血清學(xué)檢測(cè)有助于宮頸癌的早期篩查和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，且方便無(wú)創(chuàng)，在腫瘤患者的篩查診斷及評(píng)估療效中具有一定的應(yīng)用價(jià)值。

[1] Zhang TY，Huang B，Wu HB，et al.Synergistic effects of co-administration of suicide gene expressing mesenchymal stem cells and prodrug-encapsulated liposome on aggressive lung melanoma metastases in mice[J].J Control Release，2015，10(209)：260-271.

[2] Huang ZH，Tian XS，Li R，et al.Elevated thymidine kinase 1 in serumfollowing neoadjuvant chemotherapy predicts poor outcome forpatients with locally advanced breast cancer[J].Exp Ther Med，2012，3(2)：331-335.

[3] Zer A，Ding K，Lee SM，et al.Pooled Analysis of the Prognostic andPredictive Value of KRAS Mutation Status and Mutation Subtype inPatients with Non-Small Cell Lung Cancer Treated with EpidermalGrowth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitors [J].J ThoracOncol，2016，11(3)：312-323.

[4] 廖媛，簡(jiǎn)燚，羅克樞，等.增殖細(xì)胞核抗原67與胸腺激酶1在宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌中的表達(dá)[J].實(shí)用醫(yī)院臨床雜志，2017，14(1)：55-58.

[5] 劉淼，鄧玉清，劉平，等.血清 SCC-Ag、VEGF、IGF-Ⅱ及TK1聯(lián)合檢測(cè)在早期宮頸癌診斷中的價(jià)值[J].海南醫(yī)學(xué)，2012，23(13)：91-93.

[6] 陳賽英，史佃云.血清胸苷激酶Ⅰ在宮頸癌患者預(yù)后以及復(fù)發(fā)評(píng)估中的意義[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2012，28(13)：2228-2230.

[7] 林麗平.宮頸癌患者血清胸苷激酶、CA125的表達(dá)及臨床意義[J].中外醫(yī)療，2014，33(33)：23-24.

[8] 管燕，郭其森，山鳳蓮，等.小細(xì)胞肺癌組織胸苷激酶表達(dá)臨床意義的研究[J].中華腫瘤防治雜志，2010，17(10)：746-748.

[9] 趙曉龍，孟勝藍(lán)，蔡云婷，等.TK1在肺癌患者血清中的表達(dá)水平及其與腫瘤臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2016，16(22)：4256-4259.

[10]王培榮，張緯建，蔡傳書.血清胸苷激酶1在惡性腫瘤患者化療前后檢測(cè)的意義[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2015，28(1)：12-14.