李云海 陳麗華 張志豪

摘要 本試驗(yàn)以紫皮石斛試管苗為試驗(yàn)材料，通過(guò)在1/2MS培養(yǎng)基中添加不同濃度的NAA，探索促進(jìn)紫皮石斛試管苗生根的適宜NAA濃度。結(jié)果表明，在1.0 mg/L NAA的作用下，其組培苗的生根狀況最佳。

關(guān)鍵詞 紫皮石斛；組織培養(yǎng)；試管苗；NAA；生根

中圖分類號(hào) S567.239 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2018）04-0080-01

石斛屬是蘭科中的最大屬之一，共有1 500多種，廣泛分布于亞洲、歐洲及大洋洲等熱帶及亞熱帶地區(qū)[1]，其中的紫皮石斛（Dendrobium devonianum Paxt.）莖呈紫色，其藥用價(jià)值僅次于鐵皮石斛[2]。紫皮石斛比鐵皮石斛更容易生長(zhǎng)，不需要有鐵皮石斛那樣苛刻的生長(zhǎng)條件，其植株高度超過(guò)40 cm，多糖含量較高，為鐵皮石斛的60%，所具有的滋陰清熱、益胃生津、潤(rùn)肺止咳和增強(qiáng)免疫力等保健藥理功效接近鐵皮石斛[3-4]。云南省是我國(guó)石斛的主產(chǎn)區(qū)之一，產(chǎn)量占全國(guó)的70%以上。但經(jīng)多年采集，野生的鐵皮石斛、紫皮石斛等幾乎滅絕，而市場(chǎng)需求逐年增加，產(chǎn)品供不應(yīng)求。因此，近年解決此供需矛盾的有效途徑即是利用植物組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)快速生產(chǎn)繁育紫皮石斛等的試管種苗，擴(kuò)大石斛人工或半人工種植的生產(chǎn)規(guī)模，以滿足市場(chǎng)需求。本試驗(yàn)以紫皮石斛的試管苗為試驗(yàn)材料，通過(guò)觀察不同濃度的NAA對(duì)試管苗生根情況的影響，篩選出適宜的NAA濃度，為紫皮石斛試管種苗的工廠化快速繁殖提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

選擇經(jīng)過(guò)壯苗培養(yǎng)階段、大小較一致的紫皮石斛試管苗，均勻接種到添加不同濃度NAA的1/2MS培養(yǎng)基上。添加NAA的濃度分別為0.2 mg/L（Z1）、0.6 mg/L（Z2）、1.0 mg/L（Z3）、1.4 mg/L（Z4）。每處理接種5瓶，每瓶接種5叢，每叢為3株。于培養(yǎng)室中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為21～23 ℃，光照強(qiáng)度2 000 lx，光照時(shí)間12 h/d。培養(yǎng)至第50天時(shí)，測(cè)定其根數(shù)、根長(zhǎng)和莖粗等生理指標(biāo)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[5-6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理試管苗生根數(shù)

不同處理下試管苗植株的生根數(shù)量（含氣生根）統(tǒng)計(jì)及單因素方差分析結(jié)果如表1所示。從植株生根數(shù)量這一指標(biāo)來(lái)看，隨著植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA濃度的升高，紫皮石斛生根數(shù)量先升高后降低。多重比較發(fā)現(xiàn)，處理Z1與處理Z2及處理Z3差異極顯著，與處理Z4差異不顯著；處理Z2與處理Z3差異不顯著，與處理Z4差異顯著；處理Z3與處理Z4差異極顯著。即在本試驗(yàn)中，當(dāng)NAA濃度為1.0 mg/L時(shí)，最適合紫皮石斛試管苗生根。

2.2 不同處理試管苗的根長(zhǎng)

不同處理下，對(duì)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)試管苗的植株根長(zhǎng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并利用單因素方差分析得出多重比較結(jié)果。由表2可知，處理Z1與處理Z3差異極顯著，與處理Z2、處理Z4差異不顯著；處理Z2與處理Z3和處理Z4差異均不顯著；處理Z3與處理Z4差異也不顯著。即從植株平均根長(zhǎng)這一指標(biāo)來(lái)看，隨著植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA濃度的升高，紫皮石斛試管苗植株的根長(zhǎng)也有所增加，但處理Z2、Z3、Z4三者之間的平均根長(zhǎng)差異不顯著。從經(jīng)濟(jì)節(jié)約和效率角度而言，處理Z3的NAA濃度仍然是較適宜根生長(zhǎng)的濃度。

2.3 不同處理試管苗莖粗

不同處理下試管苗植株莖粗的統(tǒng)計(jì)和方差分析結(jié)果如表3所示。處理Z1與處理Z3差異極顯著，與處理Z4差異顯著，與處理Z2差異不顯著；處理Z2與處理Z3差異顯著，與處理Z4差異不顯著；處理Z3與處理Z4差異不顯著。即隨著植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑NAA濃度的升高，紫皮石斛莖粗長(zhǎng)勢(shì)情況呈現(xiàn)先快后慢的趨勢(shì)。在本次試驗(yàn)中可以得出，當(dāng)NAA濃度為1.0 mg/L時(shí)，對(duì)紫皮石斛試管苗植株莖增粗的效果最好。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)通過(guò)控制NAA的濃度，研究其對(duì)紫皮石斛試管苗生根誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響。通過(guò)觀察測(cè)量及統(tǒng)計(jì)分析所培養(yǎng)試管苗植株的生根數(shù)、根長(zhǎng)和莖粗等指標(biāo)可得出，當(dāng)NAA濃度為1.0 mg/L時(shí)，紫皮石斛試管苗植株的生根數(shù)、根長(zhǎng)和莖粗指標(biāo)都最高。說(shuō)明當(dāng)其他生根誘導(dǎo)因素一致時(shí)，NAA濃度為

1.0 mg/L時(shí)最適合本試驗(yàn)室紫皮石斛試管苗的生根培養(yǎng)。

本次試驗(yàn)中，當(dāng)試管苗培養(yǎng)到一定時(shí)間后，葉片呈黃綠色，植株的長(zhǎng)勢(shì)不太強(qiáng)壯，且根數(shù)太多和根較細(xì)弱，是否會(huì)對(duì)后續(xù)的移栽成活產(chǎn)生較大影響，需要進(jìn)一步試驗(yàn)研究進(jìn)行確定和改進(jìn)[7]。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 魏小勇.石斛屬植物生物堿研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥事，2005，19（7）：445-447.

[2] 中國(guó)人民藥典委員會(huì).中國(guó)藥典（一部）[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1985：75.

[3] 陳曉梅，郭順星.石斛屬化學(xué)成分和藥理作用的研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2001，13（1）：70-75.

[4] 林萍，畢志明，徐紅，等.石斛屬植物藥理活性研究進(jìn)展[J].中草藥，2003，34（11）：19-22.

[5] 何俊平，涂小云.不同培養(yǎng)基配方對(duì)鐵皮石斛生根培養(yǎng)的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（2）：57-59.

[6] 常美花，金亞征，王莉.鐵皮石斛快繁技術(shù)體系研究[J].中草藥，2012，43（7）：1412-1417.

[7] 李瑩.鐵皮石斛組培及次生代謝物積累規(guī)律的研究[D].南京：南京林業(yè)大學(xué)，2012.