王亞男，曹洋(廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州50000；廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院)

Kaiso屬于鋅指蛋白超家族(POZ-ZF)中BTB/POZ轉(zhuǎn)錄因子家族中的成員之一，其編碼基因?yàn)閆BTB33，位于Xq23，相對(duì)分子質(zhì)量為97 kD。部分POZ-ZF家族成員可通過鋅指結(jié)構(gòu)識(shí)別特定的DNA序列，阻止腫瘤的發(fā)展進(jìn)程或有助于正常發(fā)育的基因轉(zhuǎn)錄[1]。在POZ-ZF家族中僅有Kaiso可雙重識(shí)別DNA序列的蛋白，可識(shí)別特殊序列的共同位點(diǎn)(TCCTGCnA)和Cp寡聚核苷酸基序兩個(gè)不同序列的成員[2]。肺癌是嚴(yán)重危害人類健康的惡性腫瘤之一。70%～80%的肺癌確診時(shí)已屬晚期，預(yù)后較差。肺癌難治的根源在于腫瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為——侵襲與轉(zhuǎn)移。肺癌的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移與預(yù)后密切相關(guān)。目前研究結(jié)果顯示，P120連環(huán)蛋白(P120ctn)與腫瘤細(xì)胞黏附、浸潤(rùn)密切相關(guān)，且P120ctn協(xié)助其最重要的結(jié)合伴侶分子Kaiso參與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移過程[3]。本文對(duì)Kaiso的生物學(xué)功能及其與肺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系作一綜述。

1 Kaiso的生物學(xué)功能

研究發(fā)現(xiàn)，Kaiso在人體中發(fā)揮著非常復(fù)雜的生物學(xué)功能，甚至在不同的動(dòng)物體、體內(nèi)外及不同的腫瘤組織中，Kaiso發(fā)揮著不同的甚至相悖的生物學(xué)功能[4，5]。其生物學(xué)功能通過識(shí)別兩種不同的基因序列實(shí)現(xiàn)的[6]。

1.1 Kaiso與P120ctn的相互作用 P120ctn是Armadillo連環(huán)蛋白家族的重要成員，可與上皮-鈣黏蛋白結(jié)合形成黏附蛋白-連環(huán)蛋白復(fù)合物，在細(xì)胞黏附過程中起重要作用[7]。Kaiso的C-端為C2H2的鋅指結(jié)構(gòu)域，可與P120ctn結(jié)合；P120ctn也是惟一可與Kaiso結(jié)合的蛋白[8]。P120ctn通過不同的剪切方式可以分為四種亞型，其中亞型1與亞型3都能夠?qū)aiso的表達(dá)和定位產(chǎn)生影響，而只有亞型3可通過與Kaiso結(jié)合直接對(duì)其核轉(zhuǎn)運(yùn)產(chǎn)生作用[9]。P120ctn有與Kaiso特異性結(jié)合的位點(diǎn)，因而其與Kaiso的結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)性地抑制了Kaiso與其他靶基因的結(jié)合，從而解除了Kaiso的抑制作用[7，10]。因而P120ctn的特異性改變會(huì)對(duì)Kaiso的表達(dá)和定位產(chǎn)生影響。研究發(fā)現(xiàn)，P120ctn在細(xì)胞核內(nèi)大量聚集，可對(duì)Kaiso產(chǎn)生抑制作用及阻止形成具有侵襲性的Wnt信號(hào)通路；而Kaiso調(diào)節(jié)β-連環(huán)蛋白(β-catenin)/T細(xì)胞因子4(TCF-4)的靶基因[11]。說明Kaiso與P120ctn均為Wnt信號(hào)通路的直接作用因子。

1.2 Kaiso與Wnt信號(hào)通路的相互作用 Wnt信號(hào)通路分為經(jīng)典型與非經(jīng)典型信號(hào)通路，是機(jī)體內(nèi)調(diào)節(jié)基礎(chǔ)胚胎軸建立與決定細(xì)胞分化的早期信號(hào)通路之一。其中經(jīng)典型Wnt信號(hào)通路的異常激活被認(rèn)為與腫瘤發(fā)展密不可分。β-catenin是細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量為92～95 kD。β-catenin可穿梭到核內(nèi)，調(diào)控基因表達(dá)，從而激活Wnt通路[12]。目前通過Kaiso發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞凋亡作用的基因有cyclin D1、MTA2、matrilysin(MMP7)、mS100A4、Siamois、xWnt11及發(fā)揮其結(jié)合后激活子作用的Rapsyn。這其中包括經(jīng)典Wnt途徑的靶基因及非經(jīng)典型Wnt途徑靶基因。Siamois基因是器官形成、脊椎動(dòng)物模型中的重要標(biāo)志物，有Kaiso共同序列中心，也是β-catenin/TCF目標(biāo)基因。研究證實(shí)，Kaiso對(duì)β-catenin/TCF有抑制作用[13～15]。研究表明，Kaiso可抑制Siamois基因表達(dá)，從而正向調(diào)控Wnt/β-catenin活動(dòng)通路[16]。然而有研究得出了與此相反的結(jié)論。激素誘導(dǎo)的Kaiso融合蛋白(xKaiso-GR)可在復(fù)雜的胚胎中發(fā)揮作用，并且可更好地檢測(cè)Kaiso表達(dá)升高對(duì)Wnt信號(hào)通路的作用。通過胚胎層面有關(guān)原癌基因的相關(guān)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，失去范圍移位能力的xKaiso-GR可抑制原腸胚的形成[17]；進(jìn)而證明Kaiso以負(fù)向調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin通路。以上研究得出Kaiso對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路有兩種截然不同的作用。由此推測(cè)，Kaiso對(duì)于Wnt/β-catenin信號(hào)通路是條件調(diào)節(jié)因子。然而Kaiso通過何種機(jī)制產(chǎn)生不同的調(diào)節(jié)作用仍未可知。

2 Kaiso與肺癌的關(guān)系

肺癌由于有較強(qiáng)的侵襲和轉(zhuǎn)移能力，因而惡性程度較高。在肺癌發(fā)展進(jìn)程的早期，黏蛋白分子的紊亂和細(xì)胞間黏附作用的損傷可能與其有密切關(guān)系[18]。既往已有相關(guān)研究證明，Kaiso與肺癌的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。劉樹立等[19]研究結(jié)果表明，肺癌組織中的Kaiso蛋白表達(dá)高于正常肺組織；同時(shí)，Kaiso在胞質(zhì)中的陽(yáng)性表達(dá)與肺癌患者的惡性表型和不良預(yù)后有關(guān)。

有關(guān)Kaiso影響肺癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)機(jī)制目前仍不明確。目前已有研究表明，Kaiso的定位與肺癌有密切關(guān)系且受P120ctn的影響。研究證實(shí)Kaiso在哺乳動(dòng)物的細(xì)胞核中[20]。Kelly等[21]研究表明，Kaiso存在1個(gè)高度保守的核定位信號(hào)(NLS)，且在不同物種間高度保守；然而在人正常組織及腫瘤組織中Kaiso大多定位于細(xì)胞質(zhì)，在細(xì)胞核中表達(dá)很少甚至不表達(dá)。因而推測(cè)Kaiso與P120ctn類似，也存在著核穿梭現(xiàn)象。而且Kaiso的細(xì)胞質(zhì)定位總伴隨著P120ctn的細(xì)胞質(zhì)表達(dá)。有研究結(jié)果表明，P120ctn的定位與細(xì)胞的侵襲能力有關(guān)。當(dāng)P120ctn進(jìn)入細(xì)胞核時(shí)，細(xì)胞核的侵襲能力顯著提高。其作用機(jī)制可能是P120ctn進(jìn)入細(xì)胞核與Kaiso結(jié)合形成復(fù)合物，增加了惡性表型靶基因(MMP7和MTA)的表達(dá)[22]。Kaiso與P120ctn的結(jié)合能力與P120ctn的磷酸化尤其是絲蘇氨酸的磷酸化有關(guān)[23]。Kaiso與P120ctn結(jié)合后減弱了其對(duì)Siamois基因的抑制作用，從而促進(jìn)了肺癌的侵襲、轉(zhuǎn)移；而P120ctn與Kaiso有直接作用的是P120-catenin亞型3，該亞型P120ctn可通過調(diào)控Kaiso的核輸出從而影響Kaiso的亞細(xì)胞定位，從而影響肺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移[24]。戴順東等[25]的研究表明，肺癌組織細(xì)胞質(zhì)中Kaiso及P120ctn的共同表達(dá)與正常肺組織比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并可檢測(cè)到P120-Kaiso復(fù)合物的存在，復(fù)合物與TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。然而，目前Kaiso細(xì)胞定位相關(guān)機(jī)制仍存在許多問題。

目前也有研究顯示，Kaiso的表達(dá)量與肺癌的惡性程度及不良預(yù)后有關(guān)。劉樹立等[19]通過下調(diào)Kaiso的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞增殖活性和侵襲能力增強(qiáng)，其原因可能與Kaiso對(duì)上皮-鈣黏蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞黏附和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路起調(diào)節(jié)作用有關(guān)。有研究證明，β-catenin的轉(zhuǎn)錄是通過Kaiso與β-catenin啟動(dòng)子區(qū)域甲基化的Cp G雙核苷酸序列來調(diào)節(jié)的，進(jìn)而對(duì)肺癌的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生影響[26]。目前已知Kaiso對(duì)Wnt/β-catenin信號(hào)通路有雙向調(diào)節(jié)作用，高表達(dá)或缺失都會(huì)對(duì)β-catenin產(chǎn)生抑制作用，然而其作用機(jī)制仍需進(jìn)一步探討。

δ-鈣黏蛋白是P120蛋白家族中的一員，并被認(rèn)為只在大腦組織中表達(dá)[27]。然而后來研究發(fā)現(xiàn)，δ-鈣黏蛋白在多種組織中出現(xiàn)高表達(dá)，并且與腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲密切相關(guān)。趙月等[28]研究發(fā)現(xiàn)，δ-鈣黏蛋白在肺癌組織中高表達(dá)，且與TNM分期、預(yù)后密切相關(guān)。雖然目前相關(guān)機(jī)制仍未完全明了，但已有研究結(jié)果顯示，δ-鈣黏蛋白可進(jìn)入細(xì)胞核與Kaiso結(jié)合發(fā)揮調(diào)控基因表達(dá)的作用，從而影響肺癌的侵襲、轉(zhuǎn)移[29]。

Wnt通路的異常活化對(duì)腫瘤的生物學(xué)行為有影響。目前已有研究結(jié)果表明，Kaiso可通過抑制Wnt通路靶基因MMP-7的轉(zhuǎn)錄從而對(duì)肺癌轉(zhuǎn)移和侵襲起到抑制作用[30]。cyclin D1是Wnt通路的靶基因之一，在細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮作用，而Kaiso對(duì)腫瘤的增殖也是通過阻礙細(xì)胞周期而發(fā)揮作用[31]。韓麗華等[32]研究證實(shí)，Kaiso能夠直接結(jié)合cyclin D1啟動(dòng)子區(qū)KBS，抑制cyclin D1轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)胞增殖能力下降，G0/G1期比例升高，S期比例下降。從而推斷Kaiso通過下調(diào)cyclin D1轉(zhuǎn)錄，抑制肺惡性腫瘤細(xì)胞增殖和周期進(jìn)程。

總之，雖然目前有關(guān)Kaiso與肺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系研究相對(duì)較少，但Kaiso確與肺癌的發(fā)生發(fā)展有密切的聯(lián)系，其定位及表達(dá)水平對(duì)肺癌的轉(zhuǎn)移和侵襲有一定程度的影響。然而Kaiso究竟通過何種機(jī)制發(fā)揮作用，目前尚無定論，還需進(jìn)一步研究探索。

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