丁俊仁,李旭廷,梁歌,李思聰,王斌,楊銳,詹素群
(1.四川省畜牧科學研究院,四川 成都 610066;2.動物遺傳育種四川省重點實驗室,四川 成都 610066)
新生仔豬腹瀉發(fā)生率高,病死率高,因其病因復雜,在防治工作中開發(fā)新型中獸藥制劑已成為研究熱點。
參金止痢口服液是由黨參、金銀花、干姜、半夏、藿香、甘草、茯苓、陳皮、白術等經(jīng)水醇提取法提取后,加工制成的,其具有芳香化濕、和胃止嘔之功效,可用于脾胃不和與霍亂吐瀉之證。參金止痢口服液防治新生仔豬腹瀉的臨床試驗如下。
1.1 材料
1.1.1 試驗動物 某豬場同批次新生仔豬(隨機分為試驗組和對照組)及昆明種小鼠,18~22g。
1.1.2 試驗藥物 參金止痢口服液(1 g含原生藥1.2g);止痢散(含藿香、滑石和雄黃);四環(huán)素類抗生素注射液。
1.1.3 試劑 微生物培養(yǎng)基和藥敏紙片,輪狀病毒、傳染性胃腸炎和流行性腹瀉病毒檢測試劑卡。
1.2 方法
1.2.1 參金口服液預防新生仔豬腹瀉試驗 選取新生仔豬752頭,中藥試驗組345頭,仔豬出生24h內(nèi)灌服參金止痢口服液,2mL/次,1次/d,連用3d;抗生素對照組407頭,仔豬出生24h內(nèi)肌肉注射四環(huán)素類抗生素注射液。
注射后觀察出生10 d內(nèi)新生仔豬的腹瀉情況。
1.2.2 參金口服液聯(lián)合止痢散治療新生仔豬腹瀉試驗 選擇21日齡前腹瀉仔豬142頭,按日齡隨機分為中藥試驗組和抗生素對照組,每組各71頭。
中藥試驗組用參金止痢口服液100mL稀釋止痢散50g后,每頭灌服4mL,一天一次,連用3d;抗生素對照組肌肉注射四環(huán)素類抗生素注射液,一天一次,連續(xù)3d。
觀察給藥7d內(nèi)仔豬腹瀉情況并統(tǒng)計治療有效率。
1.3 病原學診斷
1.3.1 細菌分離鑒定 采取腹瀉病豬肛門內(nèi)糞便,滅菌肉湯增菌培養(yǎng)24 h后,轉(zhuǎn)普通瓊脂平板和麥康凱培養(yǎng)基培養(yǎng)24h。
挑取單個培養(yǎng)菌落通過16sr DNA鑒定菌種,純化菌株用于藥敏試驗。
1.3.2 腹瀉病毒檢測 輪狀病毒、傳染性胃腸炎和流行性腹瀉病毒檢測試劑卡按照說明檢測腹瀉病豬糞便。
1.4 療效判定
1.4.1 預防效果 以預防保護率為標準,預防保護率=出生10d內(nèi)無腹瀉仔豬頭數(shù)/仔豬總頭數(shù)×100%
1.4.2 治療效果 以糞便評分為判斷標準,分痊愈、有效和無效。
痊愈:仔豬糞便成條索狀或球狀,表面無膿血、分泌物,軟硬適中。
有效:仔豬糞便基本呈固體,成堆狀分布,表面無膿血,可有少量分泌物,質(zhì)軟。
無效:仔豬糞便不成型,為稀便甚至水樣,表面或可見膿血、大量腸液,或見仔豬死亡。
1.5 統(tǒng)計方法 采用SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計學處理,各處理與仔豬腹瀉發(fā)病率和治療率的關系采用卡方檢驗統(tǒng)計學方法計算,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。
2.1 預防效果 參金止痢口服液和四環(huán)素類抗生素注射液預防新生仔豬腹瀉保護率分別為89.6%和69.0%,兩者之間差異極顯著(P<0.01),說明參金止痢口服液對新生仔豬腹瀉有很好的預防作用。
2.2 治療效果 參金止痢口服液聯(lián)合止痢散治療哺乳仔豬腹瀉的總有效率為84.5%,高于抗生素對照組的49.3%(P<0.05),說明參金止痢口服液聯(lián)合止痢散對哺乳仔豬腹瀉有較好的治療作用。
2.3 細菌分離鑒定結(jié)果 37℃培養(yǎng)12 h后,普通瓊脂平板長出隆起、圓滑、半透明的菌落,麥康凱瓊脂平板上的菌落呈紅色。
單個菌落革蘭氏染色呈陰性,為桿菌,通過16sr DNA鑒定腹瀉病豬糞便分離純化菌株為豬源大腸桿菌菌株。
2.4 細菌致病性及藥敏試驗結(jié)果 用分離到的大腸桿菌進行致病性試驗,結(jié)果接種小鼠24h內(nèi)死亡,而對照組正常。取死亡小鼠肝臟及小腸檢測,結(jié)果均分離到了原接種菌,由此證明分離到的大腸桿菌具有致病性。
分離的大腸桿菌僅對丁胺卡那霉素敏感,抑菌圈直徑為18.5 mm,對氟喹喏酮類、頭孢類、四環(huán)素類、β-內(nèi)酰胺類以及氨基糖苷類抗生素耐藥。
2.5 腹瀉病毒檢測結(jié)果 輪狀病毒、傳染性胃腸炎和流行性腹瀉病毒檢測試劑卡檢測結(jié)果顯示,試驗豬場未檢出流行性腹瀉病毒和傳染性胃腸炎病毒,但輪狀病毒檢測呈陽性,表明該場存在輪狀病毒感染。
參金止痢口服液組方源自半夏藿香湯,半夏藿香湯收載于明末著名溫病學家吳又可編撰的《瘟疫論》中,其具有芳香化濕、和胃止嘔之功效,用于脾胃不和與霍亂吐瀉之證。
新生仔豬腹瀉病因復雜,病毒和大腸桿菌是主要致病因素,低溫和管理不善可加重腹瀉的發(fā)生。對病豬臨床治療以清熱解毒、化濕止痢、澀腸止瀉為主,代表性組方有止痢散、烏梅散等。新生仔豬機體功能不健全,需加強保溫,保持環(huán)境干燥才能存活,若過度清熱解毒易耗傷正氣,尤其是損傷脾胃陽氣,劫奪津液,導致陰傷,因此選擇具有芳香化濕、和胃止嘔之功效的半夏藿香湯為基礎方,并調(diào)減金銀花用量,增加黨參補中益氣、和胃生津,調(diào)補泄瀉所致的正氣虧虛。
試驗結(jié)果表明參金止痢口服液對新生仔豬腹瀉的預防和治療效果優(yōu)于四環(huán)素類抗生素,其主要原因有兩方面,一是本次導致仔豬腹瀉的病菌不僅有大腸桿菌,還存在輪狀病毒,且致病性大腸桿菌有高度耐藥性。參金止痢口服液屬純中藥制劑,組方中含有金銀花等組分,對耐藥大腸桿菌有一定抑制作用,可發(fā)揮一定的預防效果;二是致使新生仔豬腹瀉死亡的原因為脫水、器官衰竭,中藥的多組分、多靶點、多功能效應可提高治療效果。在腹瀉病豬的治療中加入了中藥止痢散,止痢散中滑石的主要成分為硅酸鎂、氧化鋁、氧化鋅等,其有吸附和收斂作用,可保護腸黏膜,收澀腸液,加快糞便成型,止痢散中的雄黃量少但具有解毒殺蟲,燥濕祛痰,抗炎、鎮(zhèn)靜之功效,止痢散中的藿香芳香化濕,解暑辟濁,和中止嘔,可緩解病毒性腹瀉引起的嘔吐及減少體液流失。因此參金止痢口服液配合止痢散治療仔豬腹瀉的效果優(yōu)于單用四環(huán)素類抗生素。
試驗表明參金止痢口服液對新生仔豬腹瀉有較好的預防效果,與止痢散合用可治療臨床細菌性腹瀉、病毒性腹瀉。