郝 飛， 李文良， 毛 立， 許寶軍， 唐朝忠， 張紋紋， 李基棕， 楊蕾蕾， 侯福銀， 時(shí) 凱， 王建輝， 魏 勇， 陳應(yīng)江， 江杰元

(1.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所/農(nóng)業(yè)部獸用生物制品工程技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/國(guó)家獸用生物制品工程技術(shù)研究中心，江蘇南京 210014； 2.江蘇省盱眙縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇盱眙 211700； 3.江蘇沿海地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，江蘇鹽城 224002； 4.江蘇省睢寧縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)指導(dǎo)站，江蘇睢寧 221200)

通信作者：江杰元，博士，研究員，主要從事牛羊傳染病研究。E-mail：1776556843@qq.com。

小反芻獸疫(Peste des petits ruminants，PPR)是由小反芻獸疫病毒(Peste des petits ruminants virus，PPRV)引起山羊和綿羊等小反芻動(dòng)物的一種急性、烈性傳染病，是嚴(yán)重威脅和危害養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展的重要病毒性疾病。PPR是OIE規(guī)定的必須報(bào)告的傳染病[1]，我國(guó)將其列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。該病呈地方流行性，以往主要在撒哈拉以南的非洲、中東及印度流行，近年來(lái)呈蔓延趨勢(shì)，在我國(guó)周邊多個(gè)國(guó)家均有該病的發(fā)生和流行[2-4]。自2007年我國(guó)西藏阿里地區(qū)首次發(fā)生PPR疫情之后，2013年底再次從新疆傳入我國(guó)，并迅速蔓延至甘肅、寧夏、內(nèi)蒙、江蘇等20多個(gè)省份，對(duì)我國(guó)的養(yǎng)羊業(yè)造成極為嚴(yán)重的損失[5-7]。目前，該病尚未被清除，疫苗免疫是預(yù)防該病的有效措施之一，農(nóng)業(yè)部規(guī)定我國(guó)除北京、福建、海南、湖北及山東(青島)、廣東(深圳)之外所有地區(qū)羊群均需免疫PPR弱毒活疫苗[8]。如何監(jiān)測(cè)評(píng)價(jià)疫苗免疫效果是防制該病的關(guān)鍵，同時(shí)也是制定科學(xué)免疫程序、做好疫病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及考核免疫政策措施落實(shí)情況的基礎(chǔ)。當(dāng)前，國(guó)內(nèi)尚未存在有關(guān)小反芻獸疫母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律研究的報(bào)道，本研究旨在探討羔羊PPR母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律，進(jìn)而明確不同羊群母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律的差異，從而為制定羔羊的最佳免疫程序，提高免疫合格率，有效的預(yù)防和控制小反芻獸疫提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

ID Screen?小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自法國(guó)ID.vet公司。

1.2 分組

選擇江蘇省不同地區(qū)不同飼養(yǎng)模式和飼養(yǎng)條件下的4個(gè)自繁自養(yǎng)規(guī)?；窖蝠B(yǎng)殖場(chǎng)及4個(gè)規(guī)?；蝠B(yǎng)殖場(chǎng)(表1)進(jìn)行PPRV母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律研究。所選羊場(chǎng)母羊于配種前按說(shuō)明書(shū)免疫小反芻獸疫疫苗，血清抗體檢測(cè)為陽(yáng)性。每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)隨機(jī)選取6只未免疫過(guò)PPRV疫苗的1月齡羔羊進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)期間不進(jìn)行PPRV免疫，每半個(gè)月采血1次，直至4月齡，分離血清，進(jìn)行PPRV抗體檢測(cè)。

表1 試驗(yàn)羊場(chǎng)基本情況

1.3 抗體檢測(cè)及判定方法

PPRV抗體檢測(cè)按照ID Screen?小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。結(jié)果判定為：每個(gè)樣品阻斷率(1-S/N)≥0.5，判定為陽(yáng)性；0.4≤1-S/N<0.5，判定為可疑；1-S/N<0.4，判定為陰性。

2 結(jié)果與分析

由圖1可知，江蘇句容試驗(yàn)點(diǎn)羔羊在1月齡時(shí)小反芻獸疫母源抗體維持在較高水平，且整體離散度小，整齊度高。1～2月齡之間抗體水平有所下降，但下降速度較為平緩，至2月齡時(shí)所有羔羊的母源抗體仍均為陽(yáng)性。2.5～3.0月齡母源抗體水平下降速度加快，3/6的羔羊降至臨界值(0.5)以下，至 3.5 月齡時(shí)全部轉(zhuǎn)為陰性。江蘇盱眙試驗(yàn)點(diǎn)羔羊1月齡母源抗體平均值雖在0.5以上，但離散度較大，整齊度低，個(gè)體差異較大，有2只抗體僅為0.172和0.285，至1.5月齡時(shí)抗體迅速下降僅剩1只為陽(yáng)性，此后抗體水平持續(xù)下降，至2.5月齡時(shí)全部轉(zhuǎn)為陰性。江蘇泗陽(yáng)試驗(yàn)點(diǎn)羔羊1月齡時(shí)除1只為可疑，其余羊只的母源抗體水平均在臨界值以上，離散度不大，差異較小。其后抗體水平逐步下降，2月齡抗體均值在 0.5 左右，2.5月齡時(shí)大部分降為陰性，至3.5月齡時(shí)全部轉(zhuǎn)陰。睢寧試驗(yàn)點(diǎn)抗體變化趨勢(shì)與泗陽(yáng)相似，5/6的羔羊在1月齡時(shí)母源抗體為陽(yáng)性，1只可疑，但其離散度相對(duì)較大，隨后抗體水平隨月齡的增長(zhǎng)逐步下降，2月齡時(shí)抗體均值已降至0.5，3月齡全部轉(zhuǎn)陰，且1.5～2.5月齡間抗體水平離散度都比較大。

由圖2可知，江蘇太倉(cāng)試驗(yàn)點(diǎn)羔羊1月齡時(shí)母源抗體水平均在臨界值以上，離散度不大，差異相對(duì)較小。2.5月齡時(shí)抗體均值已降至0.5以下，3月齡全部轉(zhuǎn)陰。江蘇豐縣試驗(yàn)點(diǎn)4/6的羔羊在1月齡時(shí)母源抗體為陽(yáng)性，1只可疑，1只為陰性，其離散度相對(duì)較大，隨后抗體水平隨月齡的增長(zhǎng)逐步下降，2.5月齡時(shí)抗體均值已降至0.5，至3.5月齡全部轉(zhuǎn)陰，且1.5～2.5月齡間抗體水平離散度都比較大。泰州試驗(yàn)點(diǎn)抗體變化趨勢(shì)與豐縣相似，4/6的羔羊在1月齡時(shí)母源抗體為陽(yáng)性，其整體離散度大，差異較大，1.5月齡時(shí)抗體均值已降至0.5以下，3.5月齡全部轉(zhuǎn)陰，且整個(gè)過(guò)程中抗體水平離散度都比較大。鹽城試驗(yàn)點(diǎn)羔羊在1～4月齡時(shí)小反芻獸疫母源抗體均維持在較高水平，且整體離散度小，整齊度高。

3 討論與結(jié)論

小反芻獸疫是由小反芻獸疫病毒引起的一種高度接觸性傳染病，是嚴(yán)重制約養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展的烈性傳染病之一。該病2007年曾在中國(guó)西藏地區(qū)小規(guī)模暴發(fā)，2013年12月至2014年6月在我國(guó)大部分養(yǎng)羊大省暴發(fā)疫情，給我國(guó)養(yǎng)羊業(yè)及其相關(guān)產(chǎn)業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。近年來(lái)，由于采取強(qiáng)制免疫小反芻獸疫活疫苗的免疫政策，使得小反芻獸疫在我國(guó)境內(nèi)得到有效的控制。當(dāng)前規(guī)模化羊場(chǎng)對(duì)小反芻獸疫的防控均實(shí)施了以疫苗接種為主的綜合防制措施，但抗體檢測(cè)發(fā)現(xiàn)時(shí)常存在羔羊免疫失敗現(xiàn)象，這可能是羔羊首免日齡不當(dāng)受到母源抗體干擾而導(dǎo)致的。羔羊出生后可以通過(guò)吮吸母乳獲得母源抗體，母源抗體的存在，可使羔羊在一定時(shí)間內(nèi)被動(dòng)地得到保護(hù)，但又會(huì)給免疫接種帶來(lái)影響。羔羊母源抗體水平過(guò)高，接種小反芻獸疫疫苗會(huì)被母源抗體所中和，使得羔羊不產(chǎn)生抗體或產(chǎn)生的抗體水平較低，得不到應(yīng)有的保護(hù)。母源抗體過(guò)低接種疫苗，則羔羊在免疫空窗期易受到環(huán)境中小反芻獸疫病毒的侵襲。因此，研究羔羊小反芻獸疫母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律就顯得十分必要。

本研究在江蘇不同地區(qū)不同飼養(yǎng)模式的4個(gè)規(guī)?；窖蝠B(yǎng)殖場(chǎng)和4個(gè)湖羊規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行PPRV母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律研究，結(jié)果表明，不同飼養(yǎng)模式下PPRV母源抗體的持續(xù)時(shí)間存在較大差異，尤其是放養(yǎng)模式下的差異顯著。江蘇句容試驗(yàn)點(diǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)羔羊母源抗體持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，因其采取放牧的飼養(yǎng)方式，羔羊未斷奶，在試驗(yàn)過(guò)程中一直與母羊同群，可隨時(shí)吮吸母乳，羔羊在1月齡吮乳后對(duì)于母源抗體的吸收效率非常高，使得體內(nèi)的小反芻獸疫抗體效價(jià)維持在較高的水平，其后體內(nèi)的抗體開(kāi)始逐漸下降，說(shuō)明此時(shí)羔羊已經(jīng)不能再?gòu)哪溉橹形漳冈纯贵w進(jìn)入血液。2月齡后雖然羔羊仍然吮食母乳，但體內(nèi)小反芻獸疫抗體效價(jià)下降最為明顯，推測(cè)可能與吮乳量的減少及母乳中抗體水平下降有關(guān)。江蘇盱眙試驗(yàn)點(diǎn)同樣是采取放牧的飼養(yǎng)方式，但是所選羔羊在1月齡時(shí)母源抗體水平離散度較大，個(gè)體差異明顯，部分羔羊的母源抗體水平已處于臨界值以下，至1.5月齡時(shí)僅剩1只為陽(yáng)性。2處羊場(chǎng)相對(duì)應(yīng)母羊小反芻獸疫抗體檢測(cè)結(jié)果顯示，其阻斷率均可達(dá)0.8以上，表明其抗體水平較高，但其具體滴度可能仍存在較大差異，推測(cè)導(dǎo)致羔羊抗體水平差異可能與母羊抗體滴度的不同、羊場(chǎng)飼養(yǎng)管理及衛(wèi)生條件有關(guān)。

江蘇泗陽(yáng)及睢寧試驗(yàn)點(diǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)均采取圈養(yǎng)飼養(yǎng)模式，于羔羊出生后60 d左右斷奶，這造成所生羔羊母源抗體在2月齡之后逐步轉(zhuǎn)陰。泗陽(yáng)試驗(yàn)點(diǎn)羔羊所有時(shí)間點(diǎn)抗體整齊度較高，而睢寧試驗(yàn)點(diǎn)羔羊各時(shí)間點(diǎn)抗體離散度較大，個(gè)體差異明顯，反映出不同養(yǎng)殖場(chǎng)免疫效果的差異。

太倉(cāng)、豐縣及泰州試驗(yàn)點(diǎn)均為湖羊養(yǎng)殖場(chǎng)，采取圈養(yǎng)飼養(yǎng)模式并于羔羊出生后60 d左右斷奶。太倉(cāng)試驗(yàn)點(diǎn)羔羊所有時(shí)間點(diǎn)抗體整齊度較高，而江蘇豐縣和泰州試驗(yàn)點(diǎn)羔羊所選羔羊在1月齡時(shí)母源抗體水平離散度較大，部分羔羊(2/6)的母源抗體水平在臨界值以下，各時(shí)間點(diǎn)抗體離散度較大，反映出不同養(yǎng)殖場(chǎng)免疫效果存在較大差異。鹽城試驗(yàn)點(diǎn)湖羊采取圈養(yǎng)育肥的飼養(yǎng)模式，羔羊出生后50 d斷奶，所檢羊群在1～4月齡時(shí)小反芻獸疫母源抗體均維持在較高水平，且整體離散度小，整齊度高。該試驗(yàn)場(chǎng)能繁母羊在正常免疫PPRV疫苗的同時(shí)，于母羊配種前加強(qiáng)免疫1次，且2次免疫相隔不超過(guò)2個(gè)月，這可能是造成母源抗體長(zhǎng)時(shí)間維持較高水平的原因。

綜上所述，雖然PPR疫苗已被證實(shí)具有良好的免疫保護(hù)效果，但在生產(chǎn)實(shí)踐中，母源抗體的變化規(guī)律并不一致，須要要做好母羊和羔羊小反芻獸疫抗體水平的監(jiān)測(cè)，根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果調(diào)整免疫程序，這樣才能切實(shí)提高免疫效果，避免小反芻獸疫的發(fā)生。

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