屈 霄，李 凱，邱洪清

（張家港市第一人民醫(yī)院消化科，江蘇 蘇州 215600）

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是炎癥性腸病兩大主要類型之一，該病特點(diǎn)是治療時(shí)間長(zhǎng)，容易反復(fù)。因此，準(zhǔn)確評(píng)估患者疾病活動(dòng)性是指導(dǎo)臨床治療的重要依據(jù)。血沉（erythrocyte sedimentation rate，ESR）和C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）常常作為炎癥標(biāo)志物用于判斷和監(jiān)測(cè)UC活動(dòng)度[1]，但其血清水平與疾病活動(dòng)度及病情嚴(yán)重程度往往存在不相符合。近年來(lái)，有研究發(fā)現(xiàn)活動(dòng)期UC血清中中性粒細(xì)胞會(huì)發(fā)生形態(tài)學(xué)變化。本研究通過(guò)檢測(cè)潰瘍性結(jié)腸炎患者血清中中性粒細(xì)胞體積分布寬度（neutrophil volume distribution width，NVDW）值，探討NVDW值對(duì)活動(dòng)期UC的診斷價(jià)值，為UC的診斷和疾病活動(dòng)評(píng)估提供新的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集本院2015年3月～2016年12月所有診斷為潰瘍性結(jié)腸炎的患者病例作為疾病組，共84例，其中男52例，女32例，年齡28～75歲。UC診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)（2012年，廣州）》[2]，排除標(biāo)準(zhǔn)：合并感染和（或）炎癥性疾病患者。選取同期健康體檢人群80例作為對(duì)照組，其中男20例，女20例，年齡24～70歲。兩組患者臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 疾病組活動(dòng)度評(píng)分 采用Sutherland疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)估UC疾病活動(dòng)度[3]，評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)如下，①腹瀉：正常，0分；1～2次/d，1分；3～4次/d，2分；超過(guò)5次/d，3分。②便血：無(wú)，0分；少量，1分；明顯，2分；血便為主，3分。③腸黏膜：正常，0分；輕度易脆，1分；中度易脆，2分；重度易脆伴滲出，3分。④病情評(píng)估：正常，0分；輕，1分，中，2分；重，3分。其中0～2分為緩解，3～5分為輕度活動(dòng)，6～10分為中度活動(dòng)，11～12分為重度活動(dòng)。其中緩解期26例，活動(dòng)期58例，其中輕度14例、中度28例、重度16例。

1.3 方法 研究對(duì)象禁食8 h后，用EDTA抗凝真空管采集全及2 ml，運(yùn)用LH750全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及其配套試劑檢測(cè)中性粒細(xì)胞平均體積（MNV）、中性粒細(xì)胞體積分布寬度（NVDW），用ELISA法檢測(cè)血清C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）水平，所有標(biāo)本于4 h內(nèi)完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用SPSSP17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以表示，采用單因素方差分析進(jìn)行組間比較。采用ROC曲線計(jì)算曲線下面積、敏感性和特異性。

2 結(jié)果

2.1 兩組MNV、NVDW及血清中CRP水平比較 疾病組MNV、NVDW及血清中CRP水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組MNV、NVDW、血清CRP比較（Table1 The comparison of MNV,NVDW and CRP between the two groups

表1 兩組MNV、NVDW、血清CRP比較（Table1 The comparison of MNV,NVDW and CRP between the two groups

注：與正常組比較，aP＜0.05

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2.2 各期潰瘍性結(jié)腸炎MNV、NVDW、CRP水平 疾病組活動(dòng)期MNV、NVDW、CRP水平均高于緩解期（P＜0.05），并且其水平隨潰瘍性結(jié)腸炎患者病情嚴(yán)重程度增加而增高（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 各期潰瘍性結(jié)腸炎MNV、NVDW、CRP水平Table2 The level of MNV,NVDW and CRP in various stages of UC

表2 各期潰瘍性結(jié)腸炎MNV、NVDW、CRP水平Table2 The level of MNV,NVDW and CRP in various stages of UC

注：與緩解期比較，bP＜0.05；與輕度比較，cP＜0.05；與中度比較，dP＜0.05

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2.3 MNV、NVDW、CRP血清水平診斷活動(dòng)期UC的ROC曲線分析 ROC曲線下面積越大，表明其診斷效果越好。約登指數(shù)亦稱正確指數(shù)，指靈敏度和特異度之和減去1，取最大的約登指數(shù)作為最佳的診斷切割點(diǎn)。三者對(duì)活動(dòng)期UC的診斷性能指標(biāo)見(jiàn)表3、圖1。

表3 MNV、NVDW、CRP對(duì)活動(dòng)期UC的診斷價(jià)值比較Table3 The diagnostic value of MNV,NVDW and CRP in active UC

圖 1 MNV、NVDW、CRP的ROC曲線Figure1 ROC curves of MNV,NVDW and CRP

2.4 NVDW對(duì)UC輕、中、重度的最佳診斷閾值 為進(jìn)一步對(duì)活動(dòng)期UC進(jìn)行病情分度，利用ROC曲線分析并得出MNV在輕、中、重度 UC的參考范圍為 146.7～154.5、154.6～169.1、＞169.2，NVDW的參考范圍，分別為 21.5～27.3、27.4～33.5、＞33.5。

3 討論

潰瘍性結(jié)腸炎主要發(fā)生于直結(jié)腸，病變局限于腸黏膜及黏膜下層，近年來(lái)，有研究認(rèn)為其發(fā)病機(jī)制與基因易感性人群中體內(nèi)腸道菌群和腸黏膜免疫應(yīng)答平衡失調(diào)有關(guān)[4]。目前UC的主要治療原則為維持和誘導(dǎo)緩解，且因?yàn)楸静∪狈^為有效、快捷的檢測(cè)指標(biāo)，因此在臨床治療效果的判定方面亦較為麻煩。近年來(lái)有許多血清和糞便標(biāo)志物應(yīng)用于臨床，如CRP、ESR、核周型抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體、髓過(guò)氧化物酶、IL-6等，但由于腸黏膜炎癥的部位不同、疾病病程不同、服用的藥物因素及是否合并腸道感染等均可能影響著這些指標(biāo)的變化，以致于這些指標(biāo)不能準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)疾病的發(fā)展?fàn)顟B(tài)[5]。因此，目前臨床上急需簡(jiǎn)便易測(cè)可靠的生物學(xué)指標(biāo)，用于潰瘍性結(jié)腸炎的診斷和疾病預(yù)后的評(píng)估。

中性粒細(xì)胞在維持腸道穩(wěn)態(tài)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。它們通過(guò)清除透過(guò)腸黏膜上皮細(xì)胞的有害微生物，在腸腔與機(jī)體間形成一道至關(guān)重要的防御屏障。同時(shí)，當(dāng)腸內(nèi)發(fā)生炎癥時(shí)，中性粒細(xì)胞能夠募集大量的免疫細(xì)胞，并促進(jìn)活性介質(zhì)釋放來(lái)緩解炎癥，促進(jìn)黏腸膜愈合。然后，中性粒細(xì)胞同樣會(huì)促進(jìn)一些促炎癥因子、蛋白酶、過(guò)氧化物的釋放，因此過(guò)度的中性粒細(xì)胞活化，最終會(huì)導(dǎo)致組織損傷[6-7]。有研究報(bào)道，UC患者外周循環(huán)中存在過(guò)度活化的中性粒細(xì)胞[8]。在炎癥激活過(guò)程中，中性粒細(xì)胞除體積增大外，其不穩(wěn)定性和外形也會(huì)發(fā)生變化[9]。McCarthy等[10]通過(guò)使用定量光學(xué)顯微鏡觀察血細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)，與正常人群和緩解期IBD患者比較，活動(dòng)期IBD患者外周血中有大量極化的中性粒細(xì)胞。因此，在潰瘍性結(jié)腸炎急性活動(dòng)期，檢測(cè)中性粒細(xì)胞體積或可以反映出腸內(nèi)炎癥水平，有助于評(píng)估病情和疾病診斷。

LH750全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀是一種特殊結(jié)構(gòu)的流式細(xì)胞儀，其可以快速檢測(cè)出全血中中性粒細(xì)胞的體積（Vole）、傳導(dǎo)性（Conductivity）、光散射（Scatter）的參數(shù)，即VCS參數(shù)，并得出所有參數(shù)平均值如中性粒細(xì)胞平均體積（MNV），以及樣本標(biāo)準(zhǔn)差值（Standard Deviation，SD值），也稱中性粒細(xì)胞體積分布寬度（NVDW）。NVDW反映了中性粒細(xì)胞體積大小的差異性，其值增大說(shuō)明患者中性粒細(xì)胞體積大小不均一程度增加。因此，MNV、NVDW值可以反映中性粒細(xì)胞核的形態(tài)變化和中性粒細(xì)胞反應(yīng)性改變。有報(bào)道[9，11-12]，在細(xì)菌感染或敗血癥時(shí)，患者中性粒細(xì)胞形態(tài)學(xué)發(fā)生改變，而NVDW值變大反映了這一變化，推測(cè)NVDW對(duì)于炎癥診斷具有一定價(jià)值。

通過(guò)本次研究我們發(fā)現(xiàn)，UC患者M(jìn)NV、NVDW明顯高于正常組，說(shuō)明MNV、NVDW對(duì)UC診斷具有重要價(jià)值。同時(shí)MNV、NVDW水平隨UC疾病活動(dòng)度的增加而上升，提示MNV、NVDW水平可用于判斷UC炎癥的嚴(yán)重程度。此外，MNV、NVDW在UC活動(dòng)期高于緩解期，推測(cè)其可以用于評(píng)估UC的治療效果。

CRP長(zhǎng)期作為活動(dòng)期UC的輔助診斷、病情判斷、療效評(píng)估的重要指標(biāo)，但其對(duì)診斷UC的特異性不強(qiáng)[13]。本研究中，通過(guò)ROC曲線可以看出，MNV、NVDW的曲線下面積和約登指數(shù)均明顯高于CPR，表明MNV、NVDW在UC診斷中具有較高的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性，且其診斷價(jià)值明顯高于CPR。雖然臨床中CRP對(duì)UC活動(dòng)性起到參考價(jià)值，其值越大，提示疾病活動(dòng)性越大，但其沒(méi)有具體的濃度范圍用于評(píng)估輕、中、重度UC。本研究利用ROC曲線分析出輕、中、重度UC的MNV、NVDW范圍，有助于為UC疾病病情評(píng)估起到一個(gè)參考作用。

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