邱厚兵，王春燕，彭 胡，楊清明

(四川省瀘州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 瀘州 646000)

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染引發(fā)的慢性傳染病[1]。免疫逃逸是HBV難以徹底清除并導(dǎo)致肝炎慢性化以及推動(dòng)CHB進(jìn)展為肝硬化、肝衰竭以及肝癌的關(guān)鍵因素[2]。準(zhǔn)確評(píng)價(jià)CHB的病變程度，并進(jìn)行針對(duì)性的治療，對(duì)抑制HBV，促進(jìn)患者轉(zhuǎn)歸具有重要意義[3]。目前，對(duì)CHB病變程度的評(píng)價(jià)主要依據(jù)肝組織病理學(xué)檢查結(jié)果，盡管該檢查方式可準(zhǔn)確評(píng)價(jià)肝纖維化程度及肝炎活動(dòng)度，但具有創(chuàng)傷大，重復(fù)性低等缺點(diǎn)，臨床應(yīng)用局限性較大[4]。為探討準(zhǔn)確評(píng)價(jià)CHB病變程度，且方便操作的檢測(cè)方法，我院將血清補(bǔ)體C3、C4應(yīng)用于CHB病變程度的判斷，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇2014年1月至2016年12月我院接受診斷的CHB患者80例(觀察組)，男48例(60.00%)，女32例(40.00%)，年齡21～68歲[(43.57±4.72)歲]，體重指數(shù)(BMI)(24.33±2.46)kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)編制的《慢性乙型肝炎防治指南(2015年)》[5]診斷標(biāo)準(zhǔn)；未行免疫調(diào)節(jié)及抗病毒治療；知情同意；依從性良好。排除標(biāo)準(zhǔn)：并發(fā)其他類(lèi)型病毒性肝炎；合并其他肝?。蛔陨砻庖咝愿尾。粣盒阅[瘤；血液系統(tǒng)及腎臟疾?。蝗焉锲谂?。選擇同期健康體檢者80例為對(duì)照組，男45例(56.25%)，女35例(43.75%)；年齡22～69歲[(43.36±4.64)歲]，BMI(24.48±2.49)kg/m2。兩組基線資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)。

1.2方法對(duì)照組僅行血清補(bǔ)體C3、C4檢測(cè)：分別抽取清晨空腹靜脈血5 ml，于離心機(jī)下行15 min離心(3000 r/min)處理，分離血清1 h內(nèi)行血清補(bǔ)體C3、C4檢測(cè)。檢測(cè)方法：免疫散射比濁法。檢測(cè)儀器：西門(mén)子BN prospec型全自動(dòng)特定蛋白分析儀；正常參考值：C3：0.9～1.8 g/L；C4：0.1～0.4 g/L。

觀察組行肝組織病理學(xué)檢查及血清補(bǔ)體C3、C4檢測(cè)。肝組織病理學(xué)檢查：彩色超聲引導(dǎo)下，行快速經(jīng)皮肝穿刺術(shù)獲取長(zhǎng)≥1.5 cm并≥3個(gè)匯管的肝組織，以4%甲醛溶液固定，行石蠟包埋、切片，經(jīng)HE與網(wǎng)織纖維染色，然后由病理醫(yī)師于光鏡下進(jìn)行多視野觀察，并依據(jù)《慢性乙型肝炎防治指南(2015年)》[5]從病理學(xué)方面對(duì)肝組織進(jìn)行分級(jí)和分期。肝炎炎性分級(jí)：G1級(jí)：患者匯管區(qū)存在炎性表現(xiàn)；G2級(jí)：患者周邊匯管區(qū)呈輕度碎屑樣壞死或肝細(xì)胞灶性壞死樣表現(xiàn)；G3級(jí)：患者周邊匯管區(qū)呈輕度碎屑樣壞死樣表現(xiàn)；G4級(jí)：患者周邊匯管區(qū)呈重度碎屑樣壞死或肝細(xì)胞橋形壞死樣表現(xiàn)。肝纖維化分級(jí)：S0期：患者匯管區(qū)肝細(xì)胞無(wú)纖維化改變；S1：患者匯管區(qū)呈輕度纖維化或纖維化改變；S2期：患者小葉結(jié)構(gòu)完整，匯管區(qū)-匯管區(qū)呈纖維化改變；S3期：患者中央靜脈-匯管區(qū)或匯管區(qū)-匯管區(qū)呈橋樣纖維化改變；S4期：呈肝硬化樣表現(xiàn)。血清補(bǔ)體C3、C4檢測(cè)同對(duì)照組。

1.3觀察指標(biāo)兩組血清補(bǔ)體C3、C4水平；觀察組各炎性分級(jí)及肝纖維化分級(jí)患者血清補(bǔ)體C3、C4水平；觀察組各炎性分級(jí)及肝纖維化分級(jí)與血清補(bǔ)體C3、C4水平的相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較行方差分析及q檢驗(yàn)，兩組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)；相關(guān)性分析行Spearman分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1兩組血清補(bǔ)體C3、C4水平比較觀察組血清補(bǔ)體C3、C4水平均低于對(duì)照組(P< 0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組血清補(bǔ)體C3、C4水平比較 (g/L)

2.2觀察組各炎性分級(jí)患者血清補(bǔ)體C3、C4水平比較觀察組各炎性分級(jí)間血清補(bǔ)體C3、C4水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)，見(jiàn)表2。

表2 觀察組各炎性分級(jí)患者血清補(bǔ)體C3、C4水平比較 (g/L)

a與G2、G3、G4比較，P< 0.05；b與G3、G4比較，P< 0.05；c與G4比較，P< 0.05

2.3觀察組各肝纖維化分級(jí)患者血清補(bǔ)體C3、C4水平比較觀察組肝纖維化S1級(jí)與肝纖維化S2、S3、S4級(jí)間血清補(bǔ)體C3、C4水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)，見(jiàn)表3。

表3 觀察組各炎性分級(jí)患者血清補(bǔ)體C3、C4水平比較 (g/L)

a與S0、S2、S3、S4比較，P< 0.05

2.4觀察組炎性分級(jí)、肝纖維化分級(jí)與血清補(bǔ)體C3、C4的相關(guān)性分析觀察組炎性分級(jí)G1級(jí)、肝纖維化分級(jí)S0、S1級(jí)與血清補(bǔ)體C3、C4無(wú)相關(guān)性(P> 0.05)；炎性分級(jí)G2、G3、G4級(jí)及肝纖維化分級(jí)S2、S3、S4級(jí)與血清補(bǔ)體C3、C4呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P< 0.05)，見(jiàn)表4。

表4 觀察組炎性分級(jí)、肝纖維化分級(jí)與血清補(bǔ)體C3、C4水平的相關(guān)性

3 討論

HBV導(dǎo)致的肝損傷和機(jī)體免疫應(yīng)答水平及CHB變異相關(guān)，特別是和細(xì)胞免疫及補(bǔ)體系統(tǒng)關(guān)系密切[6]。資料顯示，CHB患者肝炎、肝硬化甚至肝癌的發(fā)生并非HBV感染的直接結(jié)果，而是HBV感染引發(fā)機(jī)體免疫功能紊亂導(dǎo)致的[7]。機(jī)體免疫功能紊亂與CHB的進(jìn)展相伴而行，互相影響，機(jī)體免疫功能紊亂推動(dòng)了CHB的進(jìn)展，CHB的進(jìn)展也會(huì)加劇機(jī)體免疫功能的紊亂程度，評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能有助于CHB病變程度的判斷[8]。

補(bǔ)體是血清及組織液中的一類(lèi)具有酶活性的蛋白質(zhì)，補(bǔ)體系統(tǒng)是自然免疫系統(tǒng)的重要組成。補(bǔ)體不但可抵抗病原體侵襲、免疫調(diào)節(jié)及維護(hù)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，還可介導(dǎo)免疫性病理?yè)p傷[9]。在補(bǔ)體系統(tǒng)30多種可溶性蛋白及膜結(jié)合蛋白中，C3、C4非常重要，其中C3水平和補(bǔ)體總水平相平行，可直接反映補(bǔ)體總水平，臨床常用于補(bǔ)體系統(tǒng)功能的檢測(cè)[10]。在補(bǔ)體系統(tǒng)中，C3的血清水平最高，在補(bǔ)體系統(tǒng)激活過(guò)程中，不管是常規(guī)激活還是旁路激活，首先必須激活C3，然后才可啟動(dòng)其他補(bǔ)體激活的連鎖反應(yīng)[11]。

肝臟是生成免疫因子的重要器官，約有90%以上的免疫因子源于肝臟[12]。隨著CHB的發(fā)展，肝臟生成補(bǔ)體的能力逐漸降低，血清補(bǔ)體C3、C4也隨之進(jìn)行性降低[13]。研究發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)可抑制補(bǔ)體激活，而CHB患者存在著CR1活性及數(shù)量表達(dá)缺陷，在CR1活性降低及數(shù)量減少的情況下，補(bǔ)體激活水平明顯提高。隨著大量補(bǔ)體被激活并消耗，機(jī)體免疫功能紊亂程度加重，HBV-DNA大量復(fù)制，推動(dòng)CHB進(jìn)展[14]。何濤君等[15]發(fā)現(xiàn)，血清補(bǔ)體C3、C4水平和HBV-DNA水平及CHB的病變程度關(guān)系密切，血清補(bǔ)體C3、C4水平越低，其HBV-DNA水平越高，病情也越嚴(yán)重。郭飛波[16]證明，CHB患者血清補(bǔ)體C3、C4水平顯著低于健康人群，且與肝炎炎性分級(jí)、肝纖維化分級(jí)呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系。林孟新等[17]證明，隨著CHB的逐漸加重，血清補(bǔ)體C3、C4水平逐漸降低。本研究結(jié)果與上述研究一致，提示血清補(bǔ)體C3、C4可準(zhǔn)確評(píng)價(jià)CHB的病變程度。

總之，本研究結(jié)果表明，CHB患者血清補(bǔ)體C3、C4水平顯著降低，可準(zhǔn)確反映CHB患者肝炎炎性分級(jí)及肝纖維化分級(jí)，對(duì)于判斷其病變程度具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

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